《Comparative Immunology, Microbiology and Infectious Diseases》：A common source outbreak of
Brucella melitensis infection in male dogs; Serological and molecular investigation
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犬舍犬布鲁氏菌病血清学与分子检测分析，发现56.7%血清阳性，分子鉴定确认B. melitensis生物型3，流行源为生肉饮食。
Sherin R. Rouby|Mohamed Mahmoud Abdel-Rahim|Amira M. Mazeed|Mohamed A Bakry|Shawky M. Aboelhadid
埃及贝尼苏夫大学兽医学院兽医学系，贝尼苏夫 62511
摘要
本研究旨在从血清学和分子生物学角度描述一个犬布鲁氏菌病爆发事件。受感染的犬只表现出睾丸肿大、附睾炎、前列腺炎和 orchitis（睾丸炎症）。所有犬只均接受了布鲁氏菌病的血清学检测，使用的方法包括 Rose Bengal 平板试验（RBPT）和缓冲酸化抗原平板试验（BAAPT）。血清样本和血清学检测呈阳性的犬只的全血被用于常规 PCR、物种特异性实时 PCR 和多重 PCR 检测，以分别确定循环中的 布鲁氏菌 的属、种和生物型。血清学检测的结果证实了光滑型 布鲁氏菌 的存在。通过 RBPT 和 BAAPT 检测到的 布鲁氏菌 抗体的总体血清阳性率为 56.7%。利用针对免疫优势抗原 bp26 的引物序列进行分子鉴定，确认了 布鲁氏菌 的属水平。物种特异性实时 PCR 的结果证实了犬只血液中存在 B. melitensis 的 DNA。多重 PCR 检测到了 B. melitensis 生物型 3 特有的三个片段，长度分别为 587 bp、1071 bp 和 1682 bp。进一步调查表明，犬只食用生肉可能是感染的主要来源。
引言
布鲁氏菌病是一种慢性、高度传染性的疾病，全球范围内会导致犬只流产、死产、不孕、胚胎早期死亡、前列腺炎和附睾炎 [13],[14]。虽然 Brucella canis 是感染犬只最常见的种类，但它们也可能被 B. suis、B. melitensis 和 B. abortus 感染 [10]。
布鲁氏菌 是革兰氏阴性球杆菌（短杆状），边缘略微凸起，两端圆润。它们在普通培养基中不能发酵碳水化合物 [23]。布鲁氏菌属包含 12 个已确认的物种，每个物种具有特定的致病性、流行病学特征和宿主偏好 [21]。自 1939 年首次在埃及报告以来，布鲁氏菌病一直是一个全球性的公共卫生问题 [2]。B. melitensis 生物型 3 是地中海地区（尤其是埃及）影响牛最常见的类型 [13]。在埃及，高风险人群中布鲁氏菌病的发病率高达 8% [26]。
犬只感染布鲁氏菌病的方式包括摄入胎盘、流产胎儿、受污染的牛奶或吸入阴道分泌物 [5]。布鲁氏菌病可以从犬只传播给人类，尤其是通过接触受感染犬只的阴道分泌物 [10]。较少见的情况下，人类也可能通过接触受感染犬只的其他体液（如尿液和唾液）而感染 [17]。在埃及，关于犬布鲁氏菌病的研究较为有限；然而，Hamdy 等人 [9] 报告了在埃及达米埃塔和大开罗地区犬只中存在 B. canis 的情况。血清学检测在布鲁氏菌病的实验室诊断中至关重要。尽管有多种血清学检测方法，但由于敏感性和特异性存在差异，没有一种方法适用于所有流行病学研究 [20]。分子技术对于诊断和鉴定 布鲁氏菌 的生物型和种至关重要（López-Go?i 等，2008）。这些技术能够直接在临床样本中识别 布鲁氏菌。
本研究利用血清学和分子生物学方法确认了一个出现繁殖问题的犬收容所中 布鲁氏菌 的存在，并在种水平上鉴定出 布鲁氏菌 的种类。
研究区域和调查对象
本研究共涉及 30 只不同品种的警犬（表 1）。所有犬只为雄性，它们被共同饲养在收容所中，在工作期间没有与雌性犬只接触。这些犬只的年龄从 1 岁到 12 岁不等。所有犬只均未接种布鲁氏菌疫苗，且以生牛肉末为食。研究人员对犬只进行了全面检查并记录了临床发现。
血液样本采集
从每只犬只的颈静脉中无菌抽取了约 10 ml 的血液；
临床检查
临床检查显示，这些犬只出现了睾丸疼痛性肿大、附睾炎和前列腺炎。在 30 只犬只中，有 8 只出现了睾丸脓肿（图 1），伴有疼痛、跛行、局部淋巴结肿大和肌肉无力；另有 7 只犬只的睾丸大小异常（萎缩），表现为单侧或双侧睾丸萎缩。
血清学检测
对临床感染犬只的血清学检测显示，RBT 和 BAAPT 检测方法在 17 只犬只中检测到了
布鲁氏菌 抗体。
讨论
布鲁氏菌病在全球范围内广泛分布，大多数国家都将其列为法定报告疾病。布鲁氏菌 的主要感染靶细胞和组织包括雌性和雄性的生殖器官，以及巨噬细胞和滋养层细胞 [1]。在本研究中，30 只被检测的犬中有 8 只出现了睾丸脓肿，伴有疼痛、跛行、淋巴结肿大和肌肉无力；7 只犬只的睾丸萎缩，表现为单侧或双侧睾丸萎缩。所有观察到的症状都表明
结论
本文描述了一个发生在没有常规感染风险的犬收容所中的布鲁氏菌病爆发事件。通过血清学和分子生物学方法确诊了犬只感染了 B. melitensis 生物型 3。分子诊断对于直接从临床样本中快速鉴定 布鲁氏菌 的种类和生物型至关重要。在犬只中检测到 B. melitensis 生物型 3 具有公共卫生意义。研究的局限性在于样本量（30 只犬只）较小，难以得出有意义的结论。
伦理批准
本研究获得了贝尼苏夫大学机构动物护理和使用委员会（BSU-IACUC/024-040）的批准。
