基于化学发光免疫分析新平台的先兆子痫抗体原型开发与性能评估

《Clinical Chemistry》：B-017 Prototyping Preeclampsia antibodies for chemiluminescence assays

本研究针对先兆子痫早期诊断难题，开发了sFlt-1/PIGF检测的新型抗体对。通过BIO-FLASH化学发光平台验证，结果显示与参比方法相关性达0.9以上，热稳定性偏差<15%，且无交叉反应，为新型免疫检测技术开发提供了关键材料验证方案。

　　

在全球范围内，先兆子痫（preeclampsia）是导致孕产妇死亡的主要原因之一，据世界卫生组织（WHO）统计，该疾病约占孕产妇死亡病例的10%-15%。这种妊娠期特有并发症以高血压和器官功能受损为特征，严重威胁母婴健康。目前临床诊断主要依赖可溶性fms样酪氨酸激酶1（soluble Fms-like tyrosine kinase 1, sFlt-1）和胎盘生长因子（Placental Growth Factor, PIGF）的检测，其中sFlt-1水平升高和PIGF水平降低与先兆子痫的病理过程密切相关。当胎盘灌注不足或缺氧时，sFlt-1表达显著上调，而PIGF在先兆子痫患者中的浓度明显低于正常妊娠或妊娠期高血压（妊娠期间出现高血压但无器官损伤迹象）患者。

尽管现有检测方法已应用于临床，但开发更精准、稳定的新型检测平台仍是当前研究的重点。基于化学发光原理的免疫分析技术因其高灵敏度和自动化优势，成为下一代诊断工具的重要发展方向。在这一背景下，David Casagolda及其团队开展了一项创新性研究，旨在为新型化学发光免疫分析法开发高性能的先兆子痫检测抗体。该研究聚焦于抗体原型的功能性能评估，为后续试剂盒开发奠定基础。相关成果发表于临床化学领域权威期刊《Clinical Chemistry》。

研究人员采用BIO-FLASH全自动化学发光分析平台，对新开发的sFlt-1和PIGF抗体对进行系统性原型验证。研究方法包括将生物材料包被至磁性颗粒，使用异鲁米诺标记的相应蛋白及化学发光底物进行检测。通过热稳定性实验评估包被颗粒的性能稳定性，建立标准曲线分析检测范围，并利用至少40例临床样本与商业参比方法进行相关性验证，同时进行交叉反应性研究。

研究结果显示，蛋白包被微球的热稳定性表现优异，与参比相比性能偏差小于15%。标准曲线检测范围覆盖先兆子痫诊断相关浓度：PIGF为3-8,792 pg/mL，sFlt-1为100-85,000 pg/mL。临床样本验证表明，新开发抗体与商业参比方法对sFlt-1和PIGF的检测相关性系数均超过0.9。交叉反应研究证实，这些抗体具有良好的特异性，未检测到交叉反应标记物。

热稳定性评估

通过对比实验发现，新开发的抗体包被磁性颗粒在热稳定性测试中表现优异，与参考标准相比性能偏差控制在15%以内，表明该生物材料具有满足实际应用要求的稳定性。

剂量曲线响应

研究人员建立了标准化的检测流程，获得的剂量曲线在预设的检测范围内（PIGF：3-8,792 pg/mL；sFlt-1：100-85,000 pg/mL）呈现良好的响应特性，覆盖了先兆子痫诊断相关的临床浓度区间。

临床样本验证

通过至少40例个体临床样本与商业参比试剂的对比分析，证实新开发抗体对sFlt-1和PIGF的检测结果与参考方法高度一致，相关系数超过0.9，显示出优异的临床符合性。

交叉反应研究

针对可能干扰检测准确性的因素进行的交叉反应测试表明，新开发抗体具有高度特异性，未发现与非目标标记物的交叉反应，保证了检测结果的可靠性。

本研究通过系统的原型验证表明，新开发的先兆子痫抗体适用于化学发光免疫分析平台，在热稳定性、检测灵敏度、临床相关性和特异性等方面均满足要求。这种原型开发策略能够有效降低新型免疫检测技术开发过程中的风险，为筛选优质原材料提供了科学依据。该研究方法将生物材料开发周期缩短至3-6个月，显著加速了先兆子痫诊断试剂的研发进程。研究成果对改善妊娠期高血压疾病的早期诊断具有重要临床意义，为开发更精准、可靠的先兆子痫检测工具奠定了坚实基础。