利用罗氏Cobas乳酸检测稀释非线性辅助诊断乙二醇中毒

《Clinical Chemistry》：B-270 Dilutions of lactate using the Roche Cobas assay as an aid to detection of ethylene glycol poisoning

本研究针对乙二醇(EG)中毒时不同检测平台乳酸结果差异（即"乳酸间隙"）问题，创新性地探讨了罗氏Cobas乳酸检测中乙醇酸(GA)干扰的非线性特性作为诊断辅助指标的可行性。研究人员通过系列稀释实验发现，当GA浓度≥10 mmol/L时，稀释曲线呈现显著非线性，该特征可特异性提示GA存在，为EG中毒的实验室诊断提供了新思路。

　　

在临床急诊和毒理学领域，乙二醇(Ethylene Glycol, EG)中毒是一种危及生命的急症，其诊断和治疗时效性要求极高。EG本身毒性较低，但其在体内的代谢产物，尤其是乙醇酸(Glycolic Acid, GA)，才是导致严重代谢性酸中毒和器官损伤的元凶。然而，EG中毒的实验室诊断却面临着一个长期存在的挑战：不同检测平台对乳酸的测量结果会出现显著差异，这种现象被形象地称为"乳酸间隙"(Lactate Gap)。其根本原因在于，EG的代谢产物GA在不同方法的乳酸检测中会产生程度不一的干扰。这种干扰不仅可能导致乳酸水平的假性升高，混淆临床判断，更重要的是，它本身或许隐藏着诊断的关键线索。

传统的EG中毒诊断依赖于病史、阴离子间隙升高型代谢性酸中毒、渗透压间隙以及直接检测EG或GA。但直接检测并非所有医院都能快速开展，而阴离子间隙升高虽具提示性，却非EG中毒所特有。因此，寻找快速、特异且易于在常规生化实验室实现的辅助诊断指标显得尤为重要。罗氏Cobas系列分析仪是全球范围内广泛使用的临床生化检测平台，其乳酸检测采用乳酸氧化酶法。此前已有研究注意到，GA在该检测体系中的干扰并非简单的线性关系，这意味着干扰程度与样本稀释比例可能不成正比。Douglas Stickle和Christopher Mattiello的研究团队正是基于这一观察，提出了一个创新性的设想：能否将这种干扰的非线性特性，转化为诊断EG中毒的有力工具？他们的研究成果发表在知名期刊《Clinical Chemistry》上。

为验证这一设想，研究人员设计了一项精炼的实验。他们主要采用了系列稀释分析技术，使用罗氏Cobas c502分析仪作为检测平台。实验样本来源于添加了不同浓度GA（0、5、10、20 mmol/L）的混合人血浆（锂肝素抗凝），并使用生理盐水作为稀释液进行系列稀释（相对浓度分别为1、0.75、0.5、0.25）。所有实验均设置三次重复以确保结果的可靠性。

RESULTS

研究人员通过系列稀释实验得出了关键性的结果。对于未添加GA的对照血浆样本（其基础乳酸浓度[LAC]为4.3 mmol/L，已高于<2.2 mmol/L的参考区间），其稀释曲线呈现出良好的线性关系，这与该检测方法在线性范围内（<20 mmol/L）对所有乳酸样本的预期表现一致。然而，在添加了GA的样本中，情况发生了显著变化。当GA浓度达到10 mmol/L或20 mmol/L时，稀释曲线表现出明显的非线性特征。具体而言，研究人员选取稀释比例为1.0和0.75的两个数据点构成曲线段，计算其Y轴截距。对于GA浓度≥10 mmol/L的样本，该截距显著高于零（p<0.05），而在不存在干扰的理想稀释曲线中，任何线段段的Y轴截距都应为零。这一结果表明，在高浓度GA存在下，乳酸测量值随稀释度的变化不符合线性规律，从而证实了GA在罗氏Cobas乳酸检测中产生了非线性的正干扰。

CONCLUSIONS

该研究得出结论，利用罗氏Cobas乳酸检测进行生理盐水系列稀释时出现的非线性现象，是GA存在正干扰的特征性表现。在临床疑似EG中毒的背景下，如果患者存在阴离子间隙升高（提示GA可能存在），且罗氏乳酸检测结果显示乳酸升高，此时对样本进行低倍稀释（如1.0和0.75）并观察其非线性反应，可以特异性地提示GA的存在，尤其是当GA浓度不低于10 mmol/L时。这意味着，常规生化实验室可以利用现有的罗氏Cobas分析仪，通过一个简单的稀释步骤，快速获得一个高度提示EG中毒的辅助诊断信息，从而弥补直接检测手段不足的短板，为尽早启动特异性治疗（如乙醇脱氢酶抑制剂甲吡唑Fomepizole或透析）争取宝贵时间。

这项研究的讨论部分强调了其重要的临床转化价值。它并非开发了一种全新的检测项目，而是巧妙地利用了现有检测方法中的"干扰"特性，将其"变废为宝"，转化为诊断信息。这种方法学上的创新思维为临床毒理学诊断提供了新视角。当然，研究者也指出，该方法的应用存在一定的浓度阈值（GA≥10 mmol/L），且在极低或极高乳酸水平下的表现可能需要进一步评估。此外，不同批次的试剂或仪器状态是否会影响非线性判断的临界值，也是未来实际应用中需要考虑的因素。但无论如何，这项研究为快速识别危重的EG中毒患者提供了一种简便、经济且易于在常规实验室推广的辅助策略，具有显著的临床应用潜力。