基于电化学发光免疫分析法的利生奇珠单抗(RSK)治疗药物监测与抗药抗体检测新方法的建立与性能验证

《Clinical Chemistry》：B-273 Therapeutic Drug Monitoring (TDM) Assays to Quantify Risankizumab Drug and Anti-Risankizumab Antibodies in Individuals Treated with IL23 Inhibitor Risankizumab for Chronic Autoimmune Diseases

本研究针对接受IL-23抑制剂利生奇珠单抗(Risankizumab, RSK)治疗慢性自身免疫性疾病患者，亟需有效的治疗药物监测(TDM)工具以优化疗效的临床需求。研究人员开发并验证了两种新型电化学发光免疫分析法，分别用于定量检测游离RSK药物浓度和抗RSK抗体(ADA)。结果表明，两种 assay 均表现出优异的分析性能，包括宽动态范围、高准确度与精密度，以及良好的药物耐受性。该研究为RSK的个体化治疗和免疫原性评估提供了可靠的技术支撑，有望改善患者预后。

　　

在慢性自身免疫性疾病的治疗领域，生物制剂的出现革新了传统的治疗模式。其中，靶向白细胞介素23（IL-23）的抑制剂，如利生奇珠单抗（Risankizumab, RSK，商品名Skyrizi^?），已成为治疗克罗恩病（CD）、溃疡性结肠炎（UC）、斑块状银屑病（PsO）和银屑病关节炎（PsA）的重要武器。RSK是一种人源化单克隆抗体，通过特异性结合IL-23的p19亚基，阻断其与受体的相互作用，从而抑制下游的促炎细胞因子释放，发挥治疗作用。然而，如同许多生物制剂一样，在临床应用中面临着两大挑战：一是不同患者体内的药物暴露水平存在巨大个体差异，可能影响疗效；二是部分患者会产生抗药抗体（Anti-Drug Antibodies, ADA），这些ADA可能中和药物活性，导致治疗反应不佳或失效。传统的经验性给药模式难以精准应对这些挑战，因此，能够准确量化血液中药物浓度和ADA水平的治疗药物监测（Therapeutic Drug Monitoring, TDM）技术，对于实现个体化治疗、优化疗效、管理失效案例乃至控制医疗成本，显得至关重要。

为了应对这一临床需求，研究人员开展了一项方法学研究，旨在开发并验证两种新型的电化学发光免疫分析法（Electrochemiluminescence Immunoassays），分别用于定量检测患者血清中的游离RSK药物浓度和抗RSK抗体。这项研究发表在国际知名期刊《Clinical Chemistry》上。

本研究主要采用了实验室自建的电化学发光免疫分析技术。研究人员严格遵循美国食品药品监督管理局（FDA）关于治疗性蛋白免疫原性测试和生物分析方法验证的指导原则，对RSK药物检测法和抗RSK抗体（ADA）检测法进行了全面验证。

RESULTS

RSK药物检测法的分析性能

研究人员建立的方法专门用于检测游离的、具有药效学活性的RSK药物。该方法的分析测量范围（Analytical Measurement Range, AMR）为0.75 μg/mL至60 μg/mL。通过样本稀释，最大可量化浓度可达4,800 μg/mL（最大稀释倍数为80倍）。该方法的定量下限（Lower Limit of Quantitation, LLOQ）为0.75 μg/mL。值得注意的是，文献报道的UC和CD患者在接受不同剂量RSK治疗后的稳态谷浓度大约在4-9 μg/mL之间，这表明该方法具有足够的灵敏度来监测临床相关浓度。在AMR范围内，该方法的准确度（以偏差表示）在±7.5%以内，精密度（以变异系数CV表示）≤9.8%。特异性测试表明，该方法与用于治疗相似疾病的其他生物制剂或其他抗IL-23抑制剂药物无交叉反应，确保了检测结果的特异性。

抗RSK抗体（ADA）检测法的分析性能

该ADA检测法旨在检测针对RSK的总结合抗体（包括IgM和IgG）。其AMR为25 ng/mL至5,000 ng/mL，通过100倍稀释，最大可报告浓度可达500,000 ng/mL。方法的LLOQ为25 ng/mL。在AMR内，方法的偏差在±14.0%以内，精密度（CV）≤14.5%。药物耐受性是ADA检测的关键性能指标。实验证实，即使在高达120 μg/mL的RSK药物存在下，样本回收率仍能保持在80-120%的理想范围内，表明该方法具有良好的药物耐受性，能够有效检测出与药物结合的ADA。同样，该ADA检测法与其他生物制剂的ADA无交叉反应。为确保检测到的信号确实来源于RSK特异性抗体，所有ADA阳性样本都需经过一步确认试验，即通过加入高浓度RSK观察信号是否被抑制来确认抗体的特异性。

结论与意义

本研究成功开发并验证了两种性能稳健的TDM检测方法，分别用于精确量化RSK药物和抗RSK抗体。RSK药物检测法能够实现准确的药物浓度定量，这在诱导期后和维持治疗阶段对于剂量优化至关重要，有助于确保患者达到有效的治疗浓度窗口。而这项药物特异性强、耐受性高、分辨率出色的抗RSK抗体检测法，则能够在出现治疗无效或疗效丧失迹象时，提供准确的免疫原性评估。综上所述，这两种TDM检测方法通过对RSK药物暴露和免疫原性的精确监测，旨在优化RSK的临床使用，延长其治疗有效期，最终推动慢性自身免疫性疾病治疗的个体化与精准化进程。