MLN4924通过增强自噬和调控代谢表型抑制巨噬细胞泡沫化：动脉粥样硬化治疗新机制

本研究针对动脉粥样硬化（AS）治疗中他汀类药物局限性及泡沫细胞形成机制问题，开展了MLN4924（NEDD8活化酶抑制剂）调控巨噬细胞泡沫化作用的主题研究。结果表明：MLN4924通过抑制清道夫受体（CD36/SR-A1等）表达、促进胆固醇外流转运体（ABCA1/ABCG1）表达，并增强自噬流抑制细胞衰老，最终阻断泡沫细胞形成。其机制涉及抑制AKT/GSK-3β通路和重塑代谢表型，为AS治疗提供了新靶点。

　　

心血管疾病至今仍是全球健康的头号杀手，而动脉粥样硬化（Atherosclerosis, AS）正是其背后的主要病理基础。尽管他汀类药物能有效降低低密度脂蛋白（LDL）胆固醇，但仍无法避免约70%的动脉粥样硬化事件的发生，且伴随肌肉毒性、肝损伤及糖尿病风险等副作用。因此，开发新型抗AS药物迫在眉睫。

在动脉粥样硬化斑块微环境中，巨噬细胞通过清道夫受体（如CD36和SR-A1）大量内吞氧化低密度脂蛋白（ox-LDL），转变为充满脂质的泡沫细胞，这一过程是AS早期发展的关键标志。同时，细胞自噬功能障碍和细胞衰老也被证实加速疾病进展。MLN4924作为一种新型NEDD8活化酶（NAE）小分子抑制剂，已在肿瘤治疗中显示潜力，近年研究发现其还具有抗炎、促进自噬及抑制细胞衰老的作用，但其在AS中的作用尚未明确。为此，邢磊、布宇等研究人员在《Lipids in Health and Disease》上发表论文，系统探究了MLN4924是否可通过调控自噬和代谢表型抑制巨噬细胞泡沫化，从而为AS治疗提供新思路。

研究主要采用以下关键技术方法：使用人单核细胞系THP-1诱导分化的巨噬细胞，通过CCK-8法检测细胞活性，油红O染色和Dil-ox-LDL吞噬实验评估泡沫细胞形成和脂质摄取；细胞衰老通过β-半乳糖苷酶染色检测；采用免疫荧光、Western blot和RT-qPCR分析自噬和关键基因蛋白表达；利用RNA测序（RNA-seq）和非靶向代谢组学（LC-MS技术）分别解析转录组和代谢组变化；并通过通路抑制剂（氯喹、巴佛洛霉素A1、SC-79）进行机制验证。

MLN4924抑制泡沫细胞形成

研究人员发现，MLN4924在浓度不超过1μM时对巨噬细胞活力无显著影响，但可显著减少ox-LDL诱导的脂质积聚和泡沫细胞形成。

MLN4924抑制巨噬细胞对ox-LDL的摄取

研究显示，MLN4924处理显著抑制巨噬细胞对Dil-ox-LDL的摄取，下调清道夫受体CD36、SR-A1、SR-B1和LOX-1的mRNA和蛋白表达，同时促进胆固醇外流蛋白ABCA1和ABCG1的表达。此外，MLN4924还抑制了ox-LDL诱导的PPARγ上调，后者是多种清道夫受体的转录因子。

MLN4924缓解巨噬细胞衰老并降低SASP相关因子表达

细胞衰老在AS发展中起重要作用。β-半乳糖苷酶染色结果表明，MLN4924有效抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞衰老。MLN4924还降低衰老相关分泌表型（SASP）因子IL-6、MCP-1、IL-1α和TNF-α的mRNA水平，并抑制磷酸化p53（p-p53）及p21蛋白表达，从而延缓细胞衰老进程。

MLN4924增强巨噬细胞自噬

自噬激活是MLN4924作用的核心机制。研究发现，MLN4924促进自噬标志蛋白LC3II的积累并降低p62蛋白表达。使用自噬抑制剂氯喹（CQ）或巴佛洛霉素A1（BafA1）处理后，MLN4924对SASP因子表达、细胞衰老及泡沫细胞形成的抑制效应被显著逆转，证实其作用依赖于自噬流的增强。

RNA-seq揭示MLN4924调控巨噬细胞转录组

通过RNA测序分析，共发现3042个差异表达基因（DEGs），其中1576个上调（如ABCA1、APOA1），1466个下调（如CD36、PPARγ、p53）。GO和KEGG富集分析表明，这些基因显著富集于细胞分化、凋亡、脂质代谢过程和炎症反应，以及PI3K-AKT、MAPK等信号通路。Western blot验证MLN4924抑制AKT（在T308和S473位点）和GSK-3β的磷酸化。使用AKT激活剂SC-79可逆转MLN4924对PPARγ、CD36和SR-A1的抑制作用，表明MLN4924通过抑制AKT信号通路发挥调控作用。而MAPK通路中的p38磷酸化水平未受显著影响。

MLN4924调控巨噬细胞的代谢表型

非靶向代谢组学分析显示，MLN4924处理引起巨噬细胞代谢物谱显著改变，正负离子模式下分别鉴定出1474和1458个差异代谢物。PCA和PLS-DA分析表明组间分离明显，提示MLN4924可重塑细胞代谢状态，这可能与其调控脂质代谢和炎症过程相关。

研究结论与讨论

本研究首次证实MLN4924通过增强自噬、抑制AKT/GSK-3β通路激活、下调清道夫受体表达和细胞衰老，显著抑制巨噬细胞泡沫化。多组学整合分析（转录组与代谢组）进一步揭示其调控代谢表型与基因表达的协同机制。这些发现不仅深化了对AS发病机制的理解，也为MLN4924作为潜在抗AS药物提供了临床前证据。尤其值得关注的是，MLN4924已进入多种肿瘤的临床试验，其安全性数据积累可能加速其在心血管领域的应用转化。未来研究可进一步探索MLN4924在动物模型及临床样本中的抗AS效果，为心血管疾病治疗开辟新的药物干预策略。