基于HPLC–MS/MS技术的埃索美拉唑镁中潜在基因毒性杂质精准检测新方法及其方法学验证

本研究针对埃索美拉唑镁(EMO)制备过程中六种结构相似的潜在基因毒性杂质(PGIs)难以分离检测的难题，开发了基于ESI正离子MRM模式的HPLC–MS/MS方法，在ODS-SP C18色谱柱上实现精准定量，方法经验证符合预设立项标准，为质子泵抑制剂的质量控制提供了关键技术支撑。

　　

埃索美拉唑镁（Esomeprazole Magnesium, EMO）作为奥美拉唑的S-对映异构体，属于第二代质子泵抑制剂，在抑制胃酸分泌方面展现出比奥美拉唑更强的功效。为确保其药物研发质量，需建立有效的质量控制方法。EMO制备起始物料中可能残留六种潜在基因毒性杂质（Potential Genotoxic Impurities, PGIs），分别命名为RC16、RC17、RC18、RC20、RC21和RC23。这些杂质化学结构相似，均含苯环或吡啶环，取代基仅存在微小差异，导致它们在色谱柱中保留行为相近，高效液相色谱（HPLC）分析时易出现峰重叠，难以准确定量。

为提升质量控制水平，本研究开发了一种高灵敏度、高特异性的液相色谱-串联质谱（HPLC–MS/MS）检测方法。该方法采用电喷雾离子源（Electrospray Ionization, ESI）正离子模式下的多反应监测（Multiple Reaction Monitoring, MRM）技术，成功实现了EMO原料中六种痕量PGIs的同步测定。在40°C条件下，采用Inertsil ODS-SP C₁₈色谱柱（4.6?×?150 mm, 5 μm），以0.5 mL·min^?1流速进行平衡洗脱，水相（含0.5%甲酸）为流动相A，甲醇为流动相B，实现了六种杂质的良好分离。该方法在线性范围、检测限（Limit of Detection, LOD）、定量限（Limit of Quantification, LOQ）、精密度、准确度和耐用性等方面均经过系统验证，所有参数均符合预定验收标准。