预氧化银掺杂蛋氨酸稳定金纳米簇与分离阴阳极共反应物的电位分辨电化学发光多重免疫分析新策略

本文开发了一种基于预氧化银掺杂蛋氨酸稳定金纳米簇（Met-AuAgNCs）和AuNPs/GO/PDI纳米复合材料的电位分辨电化学发光（ECL）多重免疫分析（MIA）方法。通过Ag掺杂、共反应剂固定化和预氧化策略，ECL信号分别增强5.61倍、11.3倍和27.9倍（电位阶跃模式），并首次提出固定化共反应剂促进剂原位形成机制。该方法以CA125和CA19-9为模型分析物，检测限达0.029 mU mL-1和0.076 mU mL-1，为分离阴阳极共反应剂的ECL-MIA提供了新范式。

　　

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Reagents and apparatus

蛋氨酸（Methionine）、N,N-二乙基乙二胺（DEDA）、三乙醇胺（TEOA）、三甲基胺（TEA）和三丙胺（TPrA）购自国药集团化学试剂有限公司（上海）。CA19-9和CA125的靶抗原（Ag）、捕获抗体（Ab₁）和信号抗体（Ab₂）由北京科医生物技术有限公司提供。Met-AuAgNCs参照文献[49]方法并优化合成，AuNPs/GO/PDI纳米复合物则按文献[50]方法制备。

Synthesis and characterization of Met-AuAgNCs

Met-AuNCs是一种优异的近红外ECL发光体，发射峰位于835 nm附近[51]。研究表明，银掺杂（Ag-doping）可调控金纳米簇的最高占据和最低未占分子轨道能级，并影响电子激发态的弛豫动力学[52]。Fu团队通过调控Ag/Au摩尔比为1:2，制备了Met封端的Au-Ag双金属纳米簇，实现了近红外II区ECL发射红移。

Conclusions

本研究开发了一种电位分辨ECL-MIA方法，用于双生物标志物检测，为临床诊断和其他生物传感器应用中的多分析物检测提供了新机遇。通过三种策略增强Met-AuNCs的ECL强度：Ag掺杂（摩尔比Ag:Au=1:5.8）使ECL增强5.61倍；共反应剂DEDA偶联使ECL强度提升11.3倍；预氧化处理在循环伏安和电位阶跃模式下分别进一步增强10.6倍和27.9倍。