大口黑鲈早期发育中味蕾形态与味觉基因表达动态及其对转食驯化的响应

本研究发现大口黑鲈（Largemouth Bass）早期发育过程中存在两种味蕾类型（I型与II型），首次通过钙结合蛋白（calretinin）免疫荧光标记揭示其5-7日龄为味蕾发生关键期。研究证实转食驯化（trans-feeding）显著影响鳃部味蕾数量，并发现味觉基因（T1R1/T1R3/T2R/ASCI2等）在由内源性向外源性营养转换期显著上调，为优化鱼类苗种开口饵料策略提供了分子与形态学依据。

　　

Highlight

动物伦理

实验在四川农业大学动物关怀咨询委员会（编号2021202068）监督下完成，所有实验动物及管理均获中国动物护理委员会批准（编号2020-AFFRI-CAAS-001），实验遵循ARRIVE指南。

实验鱼群

购买鱼巢进行孵化，仔鱼依次经历破膜（受精后3天）、开口（受精后7天）及转食驯化阶段。

大口黑鲈味蕾的组织学结构

在60日龄大口黑鲈舌根（图1a,b）和舌中部（图1c,d）的冠状切片中，可观察到洋葱状味蕾（TB）及被复层扁平上皮细胞（SSE）包围的细长味觉受体细胞（TRC）。水平横截面未呈现洋葱状味蕾结构，但显示味蕾存在"??"标志。其余黏液细胞（GCs）、复层扁平上皮和固有层（LP）均清晰可见。

大口黑鲈味蕾被calretinin阳性标记，5-7日为味蕾发生关键期

研究证实大口黑鲈味蕾呈典型洋葱形（Hansen等,2002）。钙结合蛋白在脊椎动物感觉细胞中起关键作用，在硬骨鱼和软骨鱼类的机械感受与化学感受细胞中均有检测（Antonino等,2007）。例如钙结合蛋白calretinin已被证明可标记通道猫鱼（Ictalurus punctatus）和斑马鱼（Danio rerio）的味蕾。

结论

本研究通过calretinin标记技术推进了对大口黑鲈组织形态计量学的基础认知，分析了早期个体发育中味蕾发育模式及转食驯化影响。结果表明随着鱼类发育，味蕾数量和分布范围均增加，5-7日龄为关键扩张期。此期间多种味觉相关基因表达水平也发生显著变化。转食驯化显著改变了鳃部味蕾数量及味觉基因表达模式，这些发现为大口黑鲈养殖中精准投喂策略制定提供了重要理论依据。