意大利养殖与野生鲑鱼中PRV-3病毒的高流行率及其流行病学特征研究

本研究针对意大利东北部鲑鱼养殖业中Piscine orthoreovirus genotype 3（PRV-3）的流行状况展开系统调查。通过大范围采样和分子检测技术，研究人员发现PRV-3在养殖和野生鲑鱼中广泛存在（阳性率37.1%），但未引发临床疾病。该研究首次报道PRV-3在意大利马苏大麻哈鱼中的感染，并通过系统发育分析证实病毒属于3b亚型。研究强调了鱼类贸易在病毒传播中的关键作用，为制定无症状感染防控策略提供了重要依据。

　　

鱼类养殖业是全球食品安全和经济发展的重要支柱，而鲑鱼类（如虹鳟、褐鳟等）更是其中价值极高的物种。然而，鱼类病毒性疾病的暴发常导致严重的经济损失。Piscine orthoreovirus（PRV，鱼类正呼肠孤病毒）是近年来备受关注的病原体，其中PRV-3基因型与鲑鱼心血管疾病相关，尤其是可导致心脏和骨骼肌炎症（HSMI-like disease）。尽管PRV-3在欧洲多国已有报道，但其在意大利的流行情况、分布特征以及对养殖业的具体影响尚不明确。更复杂的是，该病毒在野生和养殖鱼类中均可能潜伏存在，且与多种其他病原共感染，使得疫情判断和防控变得困难。

为解决这一问题，来自意大利动物预防实验研究所（Istituto Zooprofilatrico Sperimentale delle Venezie）的研究团队开展了一项系统性的监测研究，旨在评估PRV-3在意大利东北部主要鲑鱼产区的流行率、遗传特征及相关风险因素。该研究近期发表于《Aquaculture Reports》。

研究人员主要依托2023年9月至2024年5月间在威尼托、特伦蒂诺-上阿迪杰和弗留利-威尼斯朱利亚这三个大区采集的样本，包括养殖和野生鱼类的器官混合池（心、脾、肾）、卵巢液及幼鱼样本。技术方法上，研究采用了经过优化的泛PRV实时逆转录PCR（pan-PRV rRT-PCR）进行病毒筛查，并通过PRV-3特异性终点RT-PCR和Sanger测序对阳性样本进行基因分型与系统发育分析。此外，利用地理信息系统（GIS）对病毒分布进行可视化，并结合统计学方法（如Fisher精确检验）分析病毒检出与物种、区域及生物安全等级等因素的关联。

3.1. 检测方法的优化与验证

研究人员通过与欧盟参考实验室提供的阳性对照（PTC-56, -61, -68）进行比较，验证了pan-PRV rRT-PCR方法的可靠性，Cq值与预期高度一致。该方法的检测限（LoD）达到10^?4稀释度，且对其他非目标病毒（如IHNV、VHSV）及宿主组织均无交叉反应，显示出良好的分析敏感性与特异性。

3.2. PRV-3的流行率与分布

在所有测试的267份样本中，PRV-3总阳性率为37.1%，其中养殖鱼类阳性率（38.7%）略高于野生鱼类（27.0%）。按物种分析，褐鳟（Salmo trutta）阳性率最高（49.1%），其次为虹鳟（Oncorhynchus mykiss，38.7%）和大理石鳟（Salmo marmoratus，24.3%），而北极红点鲑（Salvelinus alpinus）和茴鱼（Thymallus thymallus）未检出病毒。地理分布上，特伦蒂诺-上阿迪杰大区的阳性农场占比最高（42.6%），但不同区域间无显著差异。

3.3. 遗传与系统发育特征

从8份阳性样本中成功获得了S1基因片段（774 bp）的序列。Blast比对显示这些序列与丹麦PRV-3参考毒株（DK/PRV-315）高度同源（99.54%–100%）。系统发育分析表明，所有意大利毒株均属于PRV-3b亚群，与先前欧洲报道的毒株聚为一支，提示病毒可能已在当地形成稳定传播链。

3.4. 风险因素分析

对32个农场的生物安全等级、水源类型及疫病状态等因素进行分析，未发现任何变量与PRV-3感染存在显著关联。值得注意的是，所有阳性农场均未使用循环水养殖系统（RAS），而先前研究提示RAS可能是PRV相关疾病暴发的风险因素之一。

3.5. 讨论与结论

本研究首次证实PRV-3在意大利东北部鲑鱼养殖区广泛存在，且感染不伴随临床症状。褐鳟可能是该病毒的自然宿主，而病毒通过活鱼贸易传播的可能性远高于环境扩散。遗传分析表明PRV-3毒株在过去数年保持稳定，属于3b亚型，与欧洲主流毒株一致。尽管病毒检出率高，但未发现其与心脏病理或死亡事件的直接关联，推测当前养殖条件（如水温、管理模式）可能抑制了病毒致病性。

该研究为理解PRV-3的流行病学提供了关键数据，强调在无临床症状背景下仍需持续监测，以防止病毒在应激条件下引发疾病。此外，研究结果对制定鱼类贸易检疫政策和养殖生物安全规范具有重要参考价值。