胆汁酸-组氨酸十肽偶联物作为脂质纳米粒递送siRNA的潜力添加剂：提升基因沉默活性与体内安全性

为解决重复给药siRNA疗法中离子化脂质体内蓄积引发的安全性问题，研究人员开展了一项关于胆汁酸-组氨酸十肽（H10）偶联物作为新型生物相容性添加剂的研究。该研究成功将LH偶联物整合入低比例离子化脂质LNP（LiLNP-LH），证明其具有优于传统高比例脂质LNP（HiLNP）的基因沉默效果、肝脏靶向性和炎症因子释放降低特性，为安全高效的siRNA递送系统开发提供新策略。

　　

在生物医学领域，小干扰RNA（siRNA）疗法展现出巨大的治疗潜力，但其临床应用仍面临诸多挑战。其中，脂质纳米粒（LNP）作为siRNA的主要递送载体，通常依赖高比例的离子化脂质（ionizable lipids）来实现高效包载和细胞内释放。然而，这些离子化脂质在重复给药过程中可能于体内蓄积，引发安全性问题，如炎症反应和器官毒性，严重制约了siRNA疗法的长期应用。因此，开发新型生物相容性材料以降低离子化脂质比例，同时维持甚至增强siRNA的递送效率和安全性，成为当前研究的重要方向。

在这一背景下，研究人员将目光投向天然生物分子——胆汁酸和组氨酸十肽（H10）。胆汁酸具有良好的生物相容性和膜渗透增强特性，而组氨酸十肽则因其缓冲能力有助于内涵体逃逸（endosomal escape），两者结合可能协同提升LNP的性能。本研究旨在探讨胆汁酸-组氨酸十肽偶联物作为LNP添加剂的可行性，以减少离子化脂质的使用比例，同时优化siRNA的递送效果和体内安全性。

本研究发表于《Biochimie》，主要采用以下关键技术方法：首先合成 lithocholic acid (LCA)-H10 偶联物（LH conjugate），并通过质谱和核磁共振进行表征；随后制备含LH偶联物的低比例离子化脂质LNP（LiLNP-LH）及对照组LNP，利用动态光散射（DLS）和透射电镜（TEM）分析粒径和形态；通过体外基因沉默实验评估siRNA递送效率；使用小鼠模型进行体内分布和炎症因子释放检测；统计学分析采用t检验和ANOVA。

研究结果如下：

一、LH偶联物的合成与表征

研究人员成功合成LH偶联物，并通过质谱和核磁共振验证其结构，为后续LNP制备奠定基础。

二、LiLNP-LH的制备与理化性质

LiLNP-LH表现出与对照组相似的粒径和形态，表明LH偶联物的加入未显著影响LNP的基本物理特性，有利于后续生物学评价。

三、体外基因沉默活性

尽管离子化脂质比例较低，LiLNP-LH展现出比不含LH的LiLNP更优异的基因沉默效果，提示LH偶联物可能通过增强细胞内siRNA释放或稳定性来提升功能。

四、体内分布与肝脏积累

静脉注射后，LiLNP-LH在小鼠肝脏中的积累显著高于传统高比例离子化脂质LNP（HiLNP），表明LH偶联物可能促进肝靶向性，这对于肝脏相关疾病的siRNA治疗具有重要意义。

五、炎症反应评估

与HiLNP相比，LiLNP-LH处理组炎症因子释放显著降低，证明降低离子化脂质比例并结合LH偶联物可有效改善LNP的体内安全性。

研究结论与讨论部分强调，本研究通过引入LH偶联物作为添加剂，成功降低了LNP中离子化脂质的比例，同时实现了高效的siRNA递送和良好的体内安全性。LiLNP-LH在基因沉默活性、肝脏靶向性和炎症控制方面均优于传统HiLNP，为siRNA疗法的临床转化提供了新思路。此外，该策略可能适用于其他核酸类药物递送，具有广泛的应用前景。然而，研究仍存在局限性，如长期毒性和机制深入探讨不足，未来需进一步优化配方并开展临床前评估。