醋制降低十枣汤中毒性草药肠道毒性并保持其治疗恶性腹水疗效的药效机制研究

本研究针对十枣汤(SZT)中毒性草药生甘遂(KR)和生京大戟(EPR)的临床应用限制问题，通过醋制法降低其毒性并保留疗效。研究人员采用UPLC-TQ-MS/MS分析成分变化，在Walker-256细胞诱导的恶性腹水(MAE)大鼠模型中比较醋制十枣汤(VSZT)与SZT的肠道毒性和疗效，并整合代谢组学、16S rRNA测序和Western blotting技术探讨作用机制。结果表明VSZT在保持利尿排水疗效的同时显著降低肠道毒性，其作用机制与调节肠道菌群、恢复色氨酸和酪氨酸代谢紊乱，以及调控cAMP-PKA-CREB-AQP3和VEGFA-VEGFR2-SRC-VE-cadherin通路密切相关。该研究为VSZT的临床安全应用提供了科学依据。

　　

恶性腹水(MAE)是晚期恶性肿瘤患者常见的并发症，严重影响生活质量和生存期。当前治疗方法存在副作用大、费用高且只能暂时缓解症状等问题。传统中药十枣汤(SZT)作为经典排水消肿方剂，虽对恶性胸腹水有疗效，但因含有甘遂(KR)、京大戟(EPR)等毒性草药，其临床应用受到限制。根据《中国药典》记载，醋制可降低KR和EPR的毒性，但醋制后十枣汤(VSZT)在恶性腹水治疗中的毒效变化及其作用机制尚不明确。

为探究这一问题，徐金娣等研究人员在《Chinese Medicine》发表了最新研究成果，通过综合运用液质联用技术、体内药效学评价、代谢组学、16S rRNA测序和Western blotting等多种技术方法，系统比较了SZT与VSZT的成分差异、肠道毒性和治疗效果，并深入揭示了VSZT的作用机制。

研究人员采用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLC-TQ-MS/MS)技术对SZT和VSZT中的14种主要成分进行定量分析；通过Walker-256细胞腹腔注射诱导大鼠恶性腹水模型，设置正常对照组、模型组、阳性药组(硫酸镁)、SZT低高剂量组和VSZT低高剂量组，连续给药7天；收集尿液、粪便、腹水、血清和组织样本，进行肠道屏障功能、组织病理学、氧化损伤、肠道推进率等评价；采用非靶向代谢组学技术分析血清和尿液代谢物变化；通过16S rRNA测序分析肠道菌群组成和功能；采用Western blotting检测相关蛋白表达水平。

研究结果显示，VSZT中含有更多低毒性成分如3-O-(2'E,4'Z-癸二烯酰基)-20-O-乙酰基巨大戟醇(4)和大戟醇(14)，而高毒性成分如kansuinin C(6)、kansuinin A(8)、kansuinin E(9)、kansuiphorin C(10)等含量显著降低。在恶性腹水大鼠模型中，VSZT表现出比SZT更低的肠道毒性，具体表现为肠道屏障功能相关蛋白ZO-1和occludin表达增加，血清LPS和DAO水平降低，氧化损伤指标SOD和GSH活性升高，LDH水平下降。

在

在治疗效果方面，VSZT与SZT表现出相当的排水消肿功效。两者均能显著减少腹水量，促进排尿和排便，增加粪便含水量和肠道推进率，降低腹水中炎症细胞因子VEGF、TNF-α、IL-6和IFN-γ水平。组织病理学分析显示，VSZT能改善肠系膜血管充血、水肿和外渗情况。

代谢

代谢组学分析发现，VSZT能部分恢复恶性腹水引起的血清和尿液内源性代谢紊乱。血清中44种差异代谢物和尿液中46种差异代谢物在VSZT治疗后得到显著逆转，涉及色氨酸代谢、酪氨酸代谢、亚油酸代谢、花生四烯酸代谢等重要通路。

16S rRNA测序结果表明，VSZT能改善恶性腹水引起的肠道菌群失调，提高乳酸杆菌(Lactobacillus)的相对丰度，降低脱硫弧菌(Desulfovibrio)和Intestinimonas的相对丰度，并部分恢复短链脂肪酸(SCFAs)含量。

机制

机制研究表明，VSZT通过增加乳酸杆菌丰度，调节色氨酸代谢途径，增加L-色氨酸、色氨醇和吲哚丙烯酸水平，降低5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)水平，进而下调结肠中cAMP、PKA、p-CREB/CREB和AQP3的表达，促进水分排泄。

同时

同时，VSZT通过调节酪氨酸代谢途径，增加多巴胺水平，下调肠系膜组织中p-VEGFR2/VEGFR2、p-SRC/SRC和p-VE-cadherin/VE-cadherin的蛋白比值，降低血管通透性，减少腹水形成。

相关性分析显示，色氨酸代谢产物与乳酸杆菌呈正相关，与AQP3呈负相关；多巴胺与乳酸杆菌呈正相关，与VEGFA和VEGFR2呈负相关。

该研究首次系统证实了醋制十枣汤(VSZT)在保持治疗效果的同时显著降低肠道毒性的优势，并深入揭示了其通过调节肠道菌群-代谢物-信号通路网络治疗恶性腹水的多重机制。研究发现VSZT通过增加乳酸杆菌丰度，恢复色氨酸和酪氨酸代谢紊乱，影响cAMP-PKA-CREB-AQP3和VEGFA-VEGFR2-SRC-VE-cadherin信号通路，从而促进水分排泄和降低血管通透性。

这一研究成果不仅为十枣汤的临床安全应用提供了科学依据，也为中药炮制减毒存效的现代机制研究提供了范例，更为恶性腹水的治疗提供了新的思路和策略。该研究整合多组学技术深入探究中药复方的作用机制，展现了传统中药现代化研究的广阔前景，对推动中医药国际化发展具有重要意义。