EYA1通过LSD2介导的H3K4me2去甲基化激活HIF-1β促进结直肠癌肿瘤血管生成

本研究针对结直肠癌(CRC)中肿瘤血管生成的调控机制，通过探讨EYA1基因通过LSD2介导的组蛋白修饰激活HIF-1β通路的分子机制，揭示了EYA1-LSD2-HIF-1β轴在促进VEGFA表达和血管生成中的关键作用，为CRC抗血管生成治疗提供了新的潜在靶点和策略。

　　

在肿瘤生物学研究领域，结直肠癌始终是全球范围内发病率和死亡率位居前列的恶性肿瘤。随着精准医疗时代的到来，深入了解其发生发展的分子机制已成为当前研究的重点和难点。肿瘤血管生成作为肿瘤进展过程中的关键环节，为肿瘤细胞的快速增殖和远处转移提供了必要的营养和氧气支持。尽管抗血管生成药物如贝伐珠单抗已在临床实践中广泛应用，但耐药性问题依然突出，这促使科研人员不断探索新的血管生成调控机制。

以往的研究表明，缺氧诱导因子HIF-1/VEGF通路是调控血管生成的核心信号网络，而HIF-1β作为该通路中不受氧浓度调节的稳定亚基，其具体调控机制尚不明确。同时，Eya1基因作为转录共激活因子，在多种肿瘤中均被发现表达异常，并与肿瘤进展密切相关。然而，Eya1在结直肠癌血管生成中的作用及其背后的分子机制仍有待阐明。组蛋白修饰作为表观遗传调控的重要方式，LSD2介导的H3K4me2去甲基化是否参与Eya1调控的血管生成过程，成为本研究关注的焦点。

该研究发表于《Journal of Cancer Research and Clinical Oncology》，通过多种分子生物学实验方法系统地揭示了Eya1通过招募转录共刺激因子Dach1调控LSD2表达，进而影响HIF-1β转录活性和VEGFA分泌，最终促进血管生成的分子通路。研究不仅深化了对结直肠癌血管生成机制的理解，也为开发针对Eya1-LSD2-HIF-1β轴的靶向治疗策略提供了理论依据。

本研究主要采用了临床组织样本分析（包括13对CRC组织及癌旁组织）、细胞系模型（包括LoVo、HT29、SW620、SW480和CaCO2细胞）、基因过表达与沉默（通过慢病毒载体系统）、蛋白质互作分析（Co-IP和ChIP）、启动子活性检测（荧光素酶报告基因实验）、血管生成功能实验（内皮细胞成管实验）以及组蛋白修饰状态检测（Western blot和qPCR）等关键技术方法。

Eya1和LSD2在结直肠癌中表达上调且密切相关

通过qPCR、Western blot和免疫组化技术对13对结直肠癌组织及配对癌旁组织进行分析，发现Eya1和LSD2在mRNA和蛋白水平上均显著上调，且二者表达呈正相关（r = 0.5912，P = 0.0015）。在五种结直肠癌细胞系中进一步验证了这一趋势，表明Eya1与LSD2在结直肠癌中可能存在协同作用。

Eya1通过LSD2调控CRC细胞的血管生成

在HT-29和SW480细胞中过表达Eya1可显著提高VEGFA的表达，并促进人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的增殖和成管能力；而当LSD2被沉默时，该效应被显著抑制。相反，沉默Eya1则降低VEGFA水平，而重新过表达LSD2可部分恢复血管生成表型，说明LSD2是Eya1调控血管生成的关键介质。

Eya1通过Dach1调控LSD2的表达

Co-IP和ChIP实验证实Eya1与共刺激因子Dach1直接结合，并可共同作用于LSD2启动子区域。荧光素酶报告基因实验显示，过表达Eya1显著增强LSD2启动子活性，而沉默Dach1则抑制该活性，表明Eya1依赖Dach1调控LSD2的转录。

LSD2通过H3K4me2去甲基化转录增强HIF-1β表达

研究发现LSD2可结合至HIF-1β启动子区域，并通过去甲基化H3K4me2修饰增强其转录活性。在LSD2过表达的细胞中，HIF-1β表达显著上升，而启动子突变则废除该效应，表明LSD2以H3K4me2依赖的方式调控HIF-1β。

Eya1通过HIF-1β调控CRC血管生成

最后，功能实验表明，沉默HIF-1β可完全逆转Eya1过表达引起的VEGFA上调和血管生成表型。无论在常氧还是缺氧条件下，HIF-1β均为Eya1-LSD2通路下游的关键效应分子，直接调控VEGFA的表达和血管生成过程。

本研究首次系统地揭示了Eya1在结直肠癌中通过招募Dach1调控LSD2表达，进而介导H3K4me2去甲基化修饰，增强HIF-1β的转录活性和VEGFA分泌，最终促进肿瘤血管生成的分子机制。该通路独立于经典的Akt信号途径，拓展了对Eya1功能多样性的认识，并为克服抗VEGF药物耐药提供了新的思路。针对Eya1-LSD2-HIF-1β轴的抑制剂研发可能成为结直肠癌治疗的新方向。