蓝莓提取物通过调控增殖与凋亡增强非霍奇金淋巴瘤放射敏感性的机制研究

本研究针对非霍奇金淋巴瘤放疗抵抗及毒性问题，探讨蓝莓提取物（BE）联合放疗对Raji细胞的放射增敏作用。通过MTT法、流式细胞术、细胞周期及基因表达分析发现，BE能显著抑制细胞增殖、诱导凋亡、上调BAX/XPA表达并下调BCL-2表达，表明其可作为天然放射增敏剂，为淋巴瘤治疗提供新策略。

　　

非霍奇金淋巴瘤（Non-Hodgkin Lymphoma, NHL）作为血液系统恶性肿瘤的重要组成部分，约占所有淋巴瘤病例的90%，2020年全球癌症统计数据显示其发病率位居第11位，相关死亡率占癌症总死亡率的2.6%。目前临床主要采用放疗、化疗、靶向治疗及免疫疗法等综合手段，其中放疗因其成本效益优势被广泛应用。然而，肿瘤细胞对放射线的抵抗性以及放疗对正常组织的毒性作用，严重限制了其疗效。因此，开发能够增强放疗敏感性且对健康细胞无害的放射增敏剂成为当前研究的热点。

近年来，天然植物提取物因其安全性高、毒性低且易于获取的特点受到广泛关注。蓝莓作为一种富含多酚类化合物（如花青素、槲皮素、儿茶素等）的水果，已被证明具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤活性。研究表明，蓝莓提取物（Blueberry Extract, BE）可通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制多种癌细胞（如肺癌、乳腺癌、肝癌）的增殖并诱导凋亡，且对正常细胞影响较小。然而，其在淋巴瘤特别是具有高度侵袭性的Burkitt淋巴瘤模型中的作用尚不明确。为此，本研究以Raji细胞（人Burkitt淋巴瘤细胞系）为模型，探讨BE单独及联合放疗对细胞增殖、凋亡、细胞周期及相关基因表达的影响，旨在为NHL的治疗提供新的思路和实验依据。

本研究由伊朗赞詹医科大学等机构的研究团队完成，论文发表于《DARU Journal of Pharmaceutical Sciences》。研究主要采用以下关键技术方法：1. 细胞培养与处理：使用Raji细胞系（ATCC? CCL-86?），培养基为含10%胎牛血清的RPMI-1640，预处理BE（0–1000 μg/mL）1小时后进行单次2 Gy剂量照射；2. 细胞活力检测：通过MTT法测定IC₅₀及细胞存活率；3. 凋亡与细胞周期分析：采用 Annexin-V-FITC/PI 双染流式细胞术检测凋亡率，PI染色法分析细胞周期分布；4. 基因表达分析：通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测BAX、BCL-2及XPA基因mRNA表达水平，以β-actin为内参基因。

研究结果

协同抑制细胞存活

MTT实验显示，BE单独处理可时间-剂量依赖性地降低Raji细胞存活率（P<0.0001），联合放疗后IC₅₀值进一步降低（除72小时组外），表明BE具有放射增敏作用。

诱导细胞凋亡

流式细胞术结果显示，BE（600–800 μg/mL）处理24/48小时后，凋亡率显著上升（最高达70.71%），联合放疗后凋亡率进一步升高至81.12%（P<0.0001），证实BE可增强放疗诱导的凋亡。

细胞周期阻滞于Sub-G1期

BE单独或联合放疗均导致Sub-G1期细胞比例显著增加（最高79.73%），同时G0/G1、S及G2/M期细胞比例下降，表明BE通过阻滞细胞周期促进死亡。

调控凋亡及DNA修复相关基因

qRT-PCR分析发现：

• •
  BAX（促凋亡基因）表达上调，BCL-2（抗凋亡基因）表达下调，BCL-2/BAX比率降低；
• •
  XPA（DNA修复基因）表达在联合放疗组显著上升，XPA/BAX比率下降，提示BE在增强放疗致DNA损伤的同时促进凋亡。

结论与讨论

本研究证实蓝莓提取物可通过调控凋亡相关基因（BAX/BCL-2）及DNA修复基因（XPA）增强Raji细胞对放疗的敏感性，其机制涉及线粒体凋亡通路激活及细胞周期阻滞。BE作为一种天然放射增敏剂，不仅可提高放疗疗效，还能减少对正常细胞的毒性，为非霍奇金淋巴瘤的治疗提供了新的辅助策略。未来需进一步探索BE的活性成分（如花青素）及其作用机制，推动其向临床应用转化。