新型双硒桥介孔二氧化硅纳米颗粒（SeMSNs）通过调控钙稳态-Sik1通路延缓多器官衰老并延长寿命

本综述系统阐述了新型双硒桥介孔二氧化硅纳米颗粒（SeMSNs）在抗衰老领域的突破性进展。研究通过多组学分析证实SeMSNs通过维持钙离子（Ca2+）稳态、上调硒蛋白（GPx1/SelK）表达、抑制NFATc2驱动的Sik1转录，显著降低衰老标志物p16/p21水平，在细胞和动物模型中均展现出优于传统硒制剂（SeMet）和双硫桥纳米颗粒（SMSNs）的多器官抗衰老功效，为纳米硒制剂临床转化提供全新策略。

　　

摘要

硒补充剂在治疗神经退行性疾病和心血管疾病等衰老相关疾病方面具有潜力，但其应用受到生物利用度低、治疗窗口窄和作用机制不明确的限制。本研究开发了氧化还原双响应性二硒键桥接介孔二氧化硅纳米颗粒（SeMSNs），能有效降低氧化应激并下调衰老标志物（p16、p21），在自然衰老的原代小鼠胚胎成纤维细胞（MEFs）和H₂O₂诱导的HEK-293T细胞中抑制衰老。与商业硒代蛋氨酸相比，SeMSNs表现出更持久的抗氧化效果（p < 0.05）和更低的细胞毒性（p < 0.01）。在老年小鼠中，SeMSNs延长寿命、减少衰弱并改善年龄相关状况，包括肌肉萎缩、肾功能障碍、认知衰退和肝脂肪变性，同时恢复代谢平衡。其效果优于传统的有机桥接介孔二氧化硅纳米颗粒（MSNs）和二硫键桥接MSNs（SMSNs）（p < 0.01）。机制上，SeMSNs上调硒蛋白（GPx1、SelK），抑制内质网（ER）应激介导的钙释放，维持钙稳态，并抑制NFATc2驱动的Sik1转录，减少p21/p16。临床数据证实硒水平与衰老生物标志物呈负相关（p < 0.0001）。SeMSNs还通过钙-NFATc2-Sik1信号通路恢复人类脂肪前体细胞的成脂分化能力。这些结果证明了SeMSNs相对于传统硒形式的优越性，为对抗多器官衰老和促进健康长寿提供了纳米治疗策略。

1 引言

衰老是一个多方面的生物过程，以生理功能逐渐恶化、稳态调节受损以及分子、细胞和组织损伤随时间积累为特征。关键特征包括基因组不稳定性、端粒缩短、表观遗传变化、内质网应激（ERS）、线粒体功能障碍和细胞衰老。到2070年代后半叶，全球≥65岁人口预计将超过22亿，历史上首次超过18岁以下人口数量。多病共存尤其在老年人中普遍，超过60%的老年人患有两种或以上慢性疾病，一半以上同时管理三种或以上疾病。在此背景下，理解衰老相关多病共存的分子机制并开发靶向干预措施对于实现抗衰老研究的三个主要目标至关重要：延长寿命、减缓衰老进程和增强健康寿命。该领域的进展将直接应对老龄化人口带来的医疗挑战，并为提高老年人生活质量提供科学基础。

在健康衰老策略中，营养补充剂通过调节衰老相关分子通路与优化的饮食和生活方式干预产生协同作用。值得注意的是，NMN通过提升NAD⁺水平激活SIRT1通路，发挥多器官抗衰老作用，显著增强线粒体功能，同时减少氧化应激和DNA损伤。同样，姜黄素通过涉及氧化应激调节、抗炎作用、端粒维持和sirtuin蛋白调节的多效机制延缓衰老和相关疾病。然而，实际应用面临重大挑战：白藜芦醇和姜黄素等生物活性化合物由于水溶性差和首过代谢，生物利用度有限，而过量补充维生素C/E等抗氧化剂可能破坏活性氧（ROS）信号稳态，可能诱导细胞毒性甚至增加出血风险。未来抗衰老补充剂的开发应侧重于：1）创新配方策略以增强生物利用度；2）优化给药方案以最小化毒性；3）长期临床研究以验证疗效。

硒是一种具有多种生物活性的必需微量元素，在健康衰老中扮演关键角色。全球约10亿人受硒缺乏影响，这与神经系统疾病、心血管异常、恶性肿瘤和免疫功能障碍密切相关。大量证据支持硒通过多种机制发挥抗衰老作用：1）硒代蛋氨酸（SeMet）有效抑制Fe²⁺/H₂O₂或Aβ诱导的自由基生成，对以氧化应激为特征的阿尔茨海默病展示治疗潜力；2）硒补充提高血清GPx3水平，这是一种主要位于肾近曲小管基底膜的硒蛋白，通过调节线粒体质量控制通路减轻重金属诱导的肾衰老；3）我们最近的发现揭示硒补充通过保持氧化还原稳态和调节肌肉蛋白代谢显著减弱年龄相关肌肉萎缩。近期在晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者中的临床试验表明，口服硒纳米颗粒（SeNPs）作为膳食补充剂（200 μg day^?1）联合Bev+AP化疗显著增强治疗效果。SeNPs联合组显示显著肿瘤消退，疾病进展率从50%急剧下降至0%，部分缓解率增至83.3%，同时客观缓解率和疾病控制率显著改善。重要的是，该方案保持了优异的安全性，未引发促炎或免疫抑制细胞因子的波动。这些令人信服的发现不仅确立了SeNPs作为晚期NSCLC安全有效的辅助治疗，还为纳米硒制剂在肿瘤学中的临床转化提供了宝贵数据。尽管硒在减少氧化损伤、维持基因组稳定性和延迟端粒缩短方面有已证实的益处，但其狭窄的治疗窗口、有限的生物利用度以及在自然衰老过程中多器官保护的具体机制仍需进一步研究。

纳米递送载体已成为基因和药物递送的下一代平台，提供可调节的物理化学特性，如大小、组成和表面修饰。我们团队通过在分子水平将功能性二硒键纳入二氧化硅框架，开发了有机桥接介孔二氧化硅纳米颗粒（MSNs），解决了传统硅材料生物降解性差的关键挑战。该纳米载体表现出独特的双氧化还原响应特性，允许比传统抗氧化剂更精确地维持氧化还原稳态，与抗衰老研究中保持机体稳态的核心目标一致。基于这一突破，建立了一个综合研究框架：首先，本研究构建了自然衰老小鼠模型，以MSNs、二硫键桥接MSNs（SMSNs）、商业可得的SeMet作为对照，然后比较了二硒键桥接MSNs（SeMSNs）在延长寿命、延缓衰弱和多器官抗衰老方面的效果。接下来，通过多器官转录组测序识别关键通路和靶点，并进行深入的机制研究。最后，通过分析老年人血清硒水平与衰老生物标志物的相关性，并利用原代脂肪前体细胞（APCs）模型验证SeMSNs的临床效果，整合临床转化。这一系统方法为纳米硒在抗衰老研究中的应用提供了坚实的理论基础和临床证据。

2 结果

2.1 SeMSNs显著延缓细胞衰老

为评估SeMSNs的抗衰老治疗效果，本研究合成了MSNs和SMSNs作为对照，并按照研究组的方法合成了SeMSNs。粒径分析显示合成的MSNs、SMSNs和SeMSNs的尺寸分别为113.9 ± 2.14、105.8 ± 2.73和115.4 ± 2.03 nm。在H₂O₂刺激下，SMSNs和SeMSNs在第三天均表现出显著降解，响应信号刺激。细胞毒性测定结果表明，在60 μg mL^?1浓度下，各种类型的MSNs均未表现出显著细胞毒性。在细胞ROS检测中，SeMSNs与MSNs和SMSNs相比表现出显著的抗氧化效果。在10 μg mL^?1及以上浓度，SeMSNs能够将H₂O₂刺激诱导的细胞内ROS水平恢复至对照组水平。因此，我们选择10 μg mL^?1 SeMSNs浓度进行后续细胞实验。此外，使用经过连续传代模拟自然衰老的原代小鼠胚胎成纤维细胞（MEFs）评估了纳米囊泡对细胞衰老的影响。实施了两种处理方案：1）共培养方法，细胞持续维持在含10 μg mL^?1纳米囊泡的培养基中，以观察传代过程中的同步药物效果；2）传代后方案，细胞在正常培养基中扩增，并在铺板24小时后用10 μg mL^?1纳米囊泡处理，以检查延迟治疗效果。通过β-半乳糖苷酶染色和衰老标志物p16和p21分析评估细胞衰老。结果显示不同处理组存在明显模式：在两种方案中，经MSNs处理的MEFs在传代3时显示强烈的β-半乳糖苷酶阳性，而SMSNs组从传代5开始出现显著染色。值得注意的是，SeMSNs处理在整个实验期间有效抑制了β-半乳糖苷酶表达。这通过p16和p21表达分析得到进一步证实，显示SeMSNs处理的MEFs从传代1到传代6保持这些标志物的稳定水平，而对照组则观察到逐渐增加。除了自然衰老模型，还使用H₂O₂刺激的HEK-293T细胞建立了药物诱导衰老模型。与之前结果一致，SeMSNs有效抑制了H₂O₂诱导的β-半乳糖苷酶阳性细胞增加以及p16和p21表达的上调。不同类型MSNs的各种浓度对H₂O₂刺激的HEK-293T细胞中p16和p21表达的影响表明，MSNs对H₂O₂诱导的p16和p21上调没有显著影响。10 μg mL^?1 SMSNs处理轻微抑制p16和p21表达，而相同浓度的SeMSNs显著抑制它们的表达。我们的体外实验进一步证明，SeMSNs拥有优于SMSNs的ROS清除能力，效果高出两倍（p < 0.01）。在模拟肠液（SIF）中，SeMSNs在H₂O₂处理下显示时间依赖性释放曲线。总之，这些结果表明SeMSNs有效抑制细胞衰老，且效果优于SMSNs。

2.2 SeMSNs延长老年小鼠寿命并改善衰老相关表型

使用自然衰老小鼠模型评估了MSNs、SMSNs和SeMSNs对寿命、衰弱指数和衰老表型的影响。硒的组织分布分析显示，施用SeMSNs 1小时后，硒在肝脏（p < 0.01）、肾脏（p < 0.01）和脾脏（p < 0.01）中高度富集。其在大脑（p < 0.05）、肺（p < 0.01）、骨骼肌（p < 0.05）和心脏（p < 0.01）中的水平也显著高于未给药组。口服给药在18月龄（约人类55岁）开始。治疗五个月后，在老年小鼠中观察到典型的衰老表型，包括稀疏暗淡的毛发和驼背。MSNs处理未见显著改善，而SMSNs给药部分缓解了这些衰老表现。相反，SeMSNs处理的小鼠保持浓密、有光泽的毛发，并未发展出驼背，展示了优越的抗衰老效果。衰弱指数评分显示，治疗一个月后，SeMSNs处理的老年小鼠表现出与成年对照小鼠相当的衰弱指数，显著低于SMSNs处理、MSNs处理和未处理的老年组。此外，SeMSNs给药显著延长寿命，所有处理小鼠存活超过24个月。身体成分分析显示SeMSNs特异性保存瘦体重（p < 0.01）并减弱年龄相关肥胖（p < 0.01），与未处理对照组和其他治疗组相比。代谢分析表明SeMSNs介导的葡萄糖稳态恢复，口服葡萄糖耐量试验（OGTT）曲线与年轻对照组相似（p < 0.01）。经过五个月SeMSNs补充后，老年小鼠的血硒水平有效维持在成年生理浓度（p < 0.01）。SeMSNs处理小鼠的空腹血糖（FBG）水平在整个干预期间保持稳定，而老年对照组高血糖进展（p < 0.01）。血清生物标志物证实了广泛的 rejuvenation，包括脂质谱正常化（甘油三酯：p < 0.01；胆固醇：p < 0.01）和增强的抗氧化能力（SOD：p < 0.01；GSH-Px：p < 0.01）。值得注意的是，SeMSNs独特地将循环硒恢复到年轻参考范围（p < 0.01 vs 老年对照），与减少的系统性炎症相关（TNF-α：p < 0.01；IL-1β：p < 0.01）。总体而言，SeMSNs治疗显著延长寿命并减弱衰老衰退，证明其效果优于SMSNs。

2.3 SeMSNs减轻老年小鼠多器官衰老并恢复功能

进一步评估了MSNs、SMSNs和SeMSNs对器官水平衰老的影响，重点关注肌肉、肾脏、大脑和肝脏组织，这些是关键器官，常受年龄相关病理影响，如少肌症、慢性肾病、神经退行性疾病和肝脂肪变性。我们的结果表明，SeMSNs在减轻这些器官的衰老相关退化方面表现出显著优于SMSNs的效果，而MSNs单独使用无治疗效果。在骨骼肌中，SeMSNs处理保留肌纤维结构（p < 0.01 vs 老年对照），并显著减少53BP1⁺ DNA损伤焦点，防止快缩纤维（II型）的年龄相关萎缩并维持正常的快/慢纤维比率。这些结构改善与保留的生理功能相关，包括增强的握力（p < 0.01）和运动耐力（跑步时间：p < 0.01），同时将凋亡（TUNEL）和炎症（CD11c⁺）减少至年轻水平。在肾脏中，SeMSNs防止肾小球退化，稳定肾功能（尿输出、肌酐清除率和血尿素氮：均p < 0.01），并将衰老相关标志物如53BP1⁺ DNA损伤、TUNEL⁺凋亡和CD11c⁺炎症减少（均p < 0.01）至与年轻对照相当的水平。在大脑中，SeMSNs保留海马神经元结构，并显著减少DNA损伤（53BP1：p < 0.01）、凋亡（TUNEL：p < 0.01）和神经炎症（CD11c⁺：p < 0.01）至年轻水平。认知测试显示SeMSNs处理小鼠表现与年轻对照相似，在莫里斯水迷宫（MWM）测试中展示改进的逃避潜伏期和平台定位准确性，并显著优于其他老年组。肝组织免疫荧光分析显示SeMSNs有效抑制DNA损伤、凋亡和炎症反应。此外，肝脏染色表明SeMSNs显著抑制肝脏中的脂质积累。其他组织（包括心脏、肝脏、脾脏和肺）的苏木精和伊红（H&E）染色显示SeMSNs处理无毒性损伤。我们还比较了SeMSNs和SeMet对上述器官的抗衰老效果。结果表明SeMSNs在改善老年小鼠握力（p < 0.01）、运动耐力（p < 0.01）、尿输出（p < 0.01）和肌酐清除率（p < 0.01）水平，以及降低血尿素氮（p < 0.01）和MWM中的逃避潜伏期并增强平台定位准确性（p < 0.01）方面显著优于SeMet。这些结果共同突出了SeMSNs在抵抗多器官衰老中的重要作用。

2.4 SeMSNs通过抑制Sik1调节多器官衰老进程

为研究SeMSNs对抗多器官衰老的保守通路，对脑、肾和骨骼肌组织进行了RNA-seq，随后整合差异表达基因（DEGs）以识别介导这些效应的关键分子。转录组分析将盐诱导激酶1（Sik1）确定为SeMSNs在老年小鼠脑、肾和骨骼肌组织中一致调节的唯一DEG（|Log₂FC| > 1 且 FDR < 0.05）。Western blot验证证实老年脑（1.5倍，p < 0.05）、肾（2.8倍，p < 0.01）和骨骼肌（1.8倍，p < 0.01）中Sik1蛋白表达增加，而SeMSNs处理降低了这一表达。先前研究表明Sik1通过上调或稳定衰老标志物p21和p16的表达促进细胞衰老。我们的结果进一步证实了这一点，脑、肾和骨骼肌组织以及多种细胞中p21和p16的表达模式与Sik1相似，均被SeMSNs处理显著抑制。在H₂O₂处理的人皮肤成纤维细胞（HSFs）中，Sik1表达被SeMSNs特异性下调，而非SMSNs。为评估SeMSNs是否通过Sik1调节发挥抗衰老效果，进行了Sik1敲除和过表达实验。Sik1敲除显著降低p16和p21表达，而Sik1过表达完全废除SeMSNs对H₂O₂诱导的p16/p21上调的抑制效果。HSFs和小鼠组织样本的定量实时PCR（qPCR）分析进一步验证了SeMSNs对CDKN1A（人）/Cdkn1a（小鼠）、CDKN2A/Cdkn2a和Sik1转录的抑制效果。这些发现确立Sik1作为SeMSNs发挥抗衰老活性的关键分子介质。

2.5 SeMSNs通过维持老年小鼠钙稳态抑制NFATc2驱动的Sik1表达

为阐明SeMSNs在衰老器官中抑制Sik1表达的机制，对老年和SeMSNs处理组脑、肾和骨骼肌组织中的DEGs进行了通路富集分析。值得注意的是，钙信号通路在所有三种组织中一致被识别为前10富集通路之一。通过基因集富集分析（GSEA）和qPCR的进一步分析揭示了SeMSNs处理后关键钙稳态调节剂的协同抑制。内质网（ER）是主要的细胞内钙库，其钙稳态受到未折叠蛋白反应（UPR）的严格调节。分析关键UPR组分，蛋白激酶RNA样ER激酶（Perk）、肌醇需求酶1（Ire1）和激活转录因子6（Atf6），显示老年脑、肾和骨骼肌组织中UPR信号显著激活。SeMSNs处理有效抑制这些老年组织中的UPR过度激活，将UPR活性恢复至与正常成年样本相当的水平。在25种已知硒蛋白中，谷胱甘肽过氧化物酶1（GPx1）和硒蛋白K（SelK）通过清除ER腔中的ROS减轻氧化应激诱导的UPR激活。本研究证明GPx1和SelK在老年脑、肾和骨骼肌组织中显著下调，而SeMSNs补充有效恢复了它们的表达水平。此外，与SeMet相比，SeMSNs对GPx1和SelK的激活持续时间更长，且细胞毒性更低。

为确定SeMSNs是否通过维持钙稳态调节Sik1表达，进行了系统研究。SeMSNs在转录水平显著抑制Sik1表达。随后，使用JASPAR数据库预测了潜在的Sik1转录因子（严格 cutoff score > 8），并与硒蛋白组和钙信号通路基因进行整合分析。值得注意的是，转录因子活化T细胞核因子2（NFATc2）被识别为核心钙信号通路和预测的Sik1转录因子中常见的钙离子响应调节剂。这些结果表明SeMSNs可能通过钙信号-NFATc2轴间接影响Sik1表达，而非直接通过硒蛋白调节Sik1。研究进一步证明NFATc2直接调节Sik1基因的转录表达。染色质免疫沉淀（ChIP） assays 证实NFATc2特异性结合Sik1启动子区域（43 427 031 至 43 429 131 bp）。双荧光素酶报告基因 assays 显示NFATc2过表达显著增强Sik1启动子活性（约5.8倍，p < 0.01），而NFATc2结合位点突变完全废除这一激活。这些发现不仅阐明了NFATc2作为Sik1转录因子的角色，还证明其作为Sik1表达的正调节剂的功能。在HSFs中，SeMSNs将细胞内钙浓度维持在生理水平（与对照无显著差异，p > 0.05），而SMSNs无此效果。SeMSNs处理抑制NFATc2核转位，免疫荧光显示H₂O₂刺激增加NFATc2核定位2.3倍（p < 0.01），而SeMSNs处理仅导致1.2倍增加（p < 0.05 vs 对照）。共免疫沉淀 assays 证实SeMSNs减少NFATc2与蛋白磷酸酶2A（PP2A）的相互作用，从而减少NFATc2去磷酸化。SeMSNs还显著上调抗氧化硒蛋白并将ER应激标志物恢复至近正常水平。救援实验进一步证实SeMSNs通过调节细胞内钙稳态抑制细胞衰老。使用钙调神经磷酸酶抑制剂环孢素A（CSA）处理显著改善H₂O₂刺激的HSF细胞中Sik1、p21和p16的异常表达。当与NFATc2过表达共同给药时，SeMSNs的抗衰老保护效果被显著抵消。这些结果验证了“SeMSNs-钙稳态-NFATc2-Sik1”轴在调节细胞衰老中的关键作用。

2.6 硒补充介导Sik1参与具有临床相关性的抗衰老调节

基于我们在细胞和动物水平上SeMSNs抗衰老效果的发现，本研究进一步评估了：1）人群研究中血硒水平与人类衰老的相关性；2）SeMSNs在对抗人类组织衰老方面的临床潜力，使用分离的人类APCs。在血硒水平的临床相关性分析中，研究招募了30名健康老年参与者和30名年龄匹配的健康年轻对照。临床数据显示老年参与者血清硒水平显著低于年轻对照（p < 0.01）。血清硒浓度与骨骼肌指数（r = 0.6699, p < 0.0001）和握力（r = 0.8066, p < 0.0001）呈强正相关，表明硒在衰老过程中维持肌肉功能的作用。此外，血清硒水平与肝功能标志物（AST：r = ?0.9050, p < 0.0001；ALT：r = ?0.8850, p < 0.0001）呈显著负相关，表明硒可能通过减弱肝细胞损伤对肝脏发挥抗衰老作用。此外，发现血清硒水平与肌酐（r = ?0.8331, p < 0.0001）呈显著负相关，表明硒在衰老中具有肾脏保护作用。血清硒水平还与多种代谢和炎症标志物呈显著负相关，包括甘油三酯（TG：r = ?0.5198, p < 0.0001）、总胆固醇（TC：r = ?0.6300, p < 0.0001）、C反应蛋白（CRP：r = ?0.6599, p < 0.0001）和FBG（r = ?0.7470, p < 0.0001）。这些结果表明硒可能通过同时调节代谢稳态和炎症反应发挥广泛的抗衰老效果。

脂肪组织染色结果显示，老年患者皮下脂肪组织中β-半乳糖苷酶（男性：12.1倍；女性：12.0倍；p < 0.01）和Sik1（男性：2.6倍；女性：2.0倍；p < 0.01）的表达显著高于年轻患者。从老年男性和女性患者分离的皮下脂肪来源的APCs表现出显著降低的成脂分化能力。然而，SeMSNs处理恢复了它们的成脂潜力。此外，SeMSNs处理显著上调老年APCs中GPx1和SelK的表达，并有效将ER应激标志物（Perk、Ire1、Atf6）和钙信号蛋白（NFATc2）水平恢复至生理水平。重要的是，SeMSNs处理显著下调衰老相关因子Sik1和细胞衰老标志物（p53、p21、p16），表明了一种多效抗衰老机制。该信号通路的调节作用对于源自两性的APC细胞均显著。这些发现确立了临床硒的抗衰老特性，并在机制上将“SeMSNs-钙-NFATc2-Sik1”通路与人类脂肪组织衰老联系起来。

3 讨论

衰老是年龄相关疾病的重要风险因素，突出了开发针对衰老机制的营养补充剂以延长寿命和改善老年人健康的重要性。研究表明，60岁以上个体的血硒水平显著低于年轻成人，70岁后下降更明显。我们之前的工作证明自合成的SeMSNs是一种有效的缓释硒补充剂，在等效剂量下治疗少肌症比商业可得的SeMet具有优越的安全性和有效性。在本研究中，SeMSNs被进一步应用于抗衰老研究，揭示：1）SeMSNs显著延长寿命并改善脑、骨骼肌、肾、肝、脂肪组织和皮肤中与衰老相关的功能衰退；2）SeMSNs恢复多个老年组织中的细胞内Ca²⁺稳态；3）SeMSNs上调硒蛋白（SelK和GPx1），减轻ROS积累和ER应激诱导的Ca²⁺释放。该过程抑制NFATc2介导的Sik1转录，从而减少衰老标志物p16和p21的积累。

大量临床研究已建立硒与长寿之间的关联，尽管这种关系不是线性的。硒缺乏与各种衰老相关疾病密切相关，包括神经退行性疾病、心血管疾病、免疫功能障碍和皮肤衰老。流行病学数据显示血硒水平与缺血性心脏病死亡率呈负相关。马里兰州的一项研究发现老年女性血清硒水平与握力显著相关，而低血清硒和类胡萝卜素水平被显示增加老年女性死亡风险。我们的临床样本证实了血清硒水平与衰老之间的负相关。然而，由于硒的治疗窗口狭窄，这种关系是非线性的。我们之前的研究证明，在等效剂量下，SeMSNs提供更稳定的硒补充，在治疗少肌症方面比商业SeMet具有优越的安全性和药理特性。它们体内缓慢降解确保持续的硒释放，实现关键硒蛋白（GPx1和SelK）的稳定激活，突出了增强的生物效能和转化潜力。

年龄是众多衰老相关疾病的共同病理基础。然而，精确的致病机制和共享的调节靶点仍不完全清楚。我们的发现，证明SeMSNs改善多器官衰老表型，得到了多器官转录组测序分析的支持，该分析首次突出了硒补充在钙稳态中的系统调节作用。失调的钙稳态已成为衰老的标志：作为关键的第二信使，Ca²⁺受到ER的严格调节以维持静息浓度（50–100 nm）。然而，衰老导致钙调节系统功能衰退，特征为静息Ca²⁺水平升高和刺激 evoked 钙瞬变幅度减小。这种失调与多系统衰老相关病理密切相关：海