GmAP2转录因子通过调控ABA信号与根系发育增强拟南芥对铝毒和低磷胁迫的双重耐受性

【字体: 时间:2025年10月06日 来源:Plant Cell Reports 4.5

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  酸性土壤中铝毒(Al3+)与低磷(LP)胁迫共同制约作物生长。本研究通过转基因技术发现大豆转录因子GmAP2能同时响应酸铝和低磷胁迫,调控AtALMT1/AtMATE等铝耐受基因及AtPHR1/AtPHT1;1等磷吸收基因表达,促进根系发育并激活ABA信号通路,显著提升拟南芥对双重胁迫的耐受性,为抗逆育种提供新靶点。

  
在全球酸性土壤分布区,铝毒和磷匮乏是制约作物生长的两大关键因素。当土壤pH值低于5.5时,铝元素以剧毒的Al3+形态存在,严重抑制植物根系发育;同时,酸性土壤中的铁铝氧化物极易与磷元素形成难溶性复合物,导致土壤有效磷含量急剧下降。面对这种协同胁迫,植物进化出复杂的调控机制,其中AP2/ERF(APETALA2/乙烯响应因子)转录因子家族被证实广泛参与逆境响应,但能否同时调控铝毒和低磷耐受性仍是未解之谜。
近期《Plant Cell Reports》发表的研究论文揭示,来自大豆的GmAP2基因具有双重抗逆功能。该基因编码一个核定位的AP2/ERF转录因子,其表达受酸铝胁迫、低磷胁迫和脱落酸(ABA)共同诱导。通过转基因技术,研究人员在拟南芥和大豆毛根系统中验证了GmAP2过表达能显著增强植物对铝毒和低磷的耐受性,其分子机制涉及有机酸转运蛋白调控、激素信号通路重编程和根系架构重塑等多重途径。
本研究采用多技术联用策略:通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析基因表达模式;利用激光共聚焦显微镜进行亚细胞定位;采用酵母双杂交系统验证转录自激活活性;通过农杆菌介导的拟南芥遗传转化和大豆毛根转化(品种华春6号和BX13)获得转基因材料;使用电感耦合等离子体发射光谱(ICP-AES)测定根尖铝离子含量;结合比色法测定丙二醛(MDA)和脯氨酸含量;借助血氧素染色可视化铝离子分布。
表达模式与蛋白特性分析
GmAP2组成型表达于大豆各组织,根中表达量最高。在50μM AlCl3(pH4.5)处理8小时后,表达量提升6倍;在5μM低磷处理14天后,表达量上调8.1倍。蛋白定位实验证实GmAP2定位于细胞核,酵母自激活试验表明其具有转录激活活性。
酸铝胁迫表型分析
在含100μM AlCl3的培养基中,转基因拟南芥的相对根伸长率比野生型提高50%以上,根尖铝离子积累量降低40%,地上部MDA含量下降而脯氨酸含量显著上升。血氧素染色显示转基因毛根铝积累减少。
低磷胁迫表型分析
在5μM低磷条件下,转基因植株主根长度比野生型延长36%,侧根数量增加74%,全株磷含量提升22%。毛根转化实验证实过表达GmAP2能显著促进磷吸收和生物量积累。
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分子机制解析
在酸铝胁迫下,GmAP2激活铝耐受基因AtALMT1、AtMATE、AtALS3和AtSTOP1的表达,同时调控ABA信号通路关键基因AtABI5、AtRD29A和AtRAP2.6的上调。在低磷胁迫下,磷吸收基因AtPHT1;1、AtPHO1和AtPHR1表达显著增强,并通过下调AtERF13和上调AtKCS16促进侧根发育。
研究
研究结论表明,GmAP2通过三重机制增强胁迫耐受性:1)调控有机酸转运蛋白基因表达减轻铝毒害;2)激活磷转运系统提升磷吸收效率;3)通过ABA信号通路和ERF家族基因网络协调根系发育。该研究首次揭示单个AP2/ERF转录因子同时调控铝毒和低磷耐受性的分子机制,为培育抗逆作物品种提供了理论依据和基因资源。值得一提的是,GmAP2与拟南芥AtERF71存在直系同源关系,后者已被证实通过调控细胞扩张促进根系生长,暗示该调控通路在进化上可能保守。
本研究由华南农业大学国家大豆改良中心广东分中心完成,采用多学科交叉方法系统解析了GmAP2的双重抗逆功能,为应对酸性土壤作物生产挑战提供了新颖解决方案。
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