基于银-氧化石墨烯-全氟磺酸纳米复合材料的超灵敏电化学免疫传感器用于培氟沙星检测

本文开发了一种基于Ag-GO-Nf纳米复合材料的无标记电化学免疫传感器，用于快速检测培氟沙星(PEF)。该传感器展现出宽线性范围(0.50–100 ng/mL)、超低检测限(0.27 ng/mL)和高特异性，在加标猪肉和牛奶样品中回收率达97.0–100.4%，为食品安全检测提供了强有力的技术支撑。

　　

^{材料与试剂}

培氟沙星(PEF)购自北京索莱宝科技有限公司；抗PEF单克隆抗体(mAbs)通过BALB/c小鼠免疫、细胞融合、杂交瘤细胞系筛选和克隆培养在实验室制备；牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)、弗氏完全佐剂(FCA)、弗氏不完全佐剂(FIA)、硝酸银(AgNO₃)购自国药集团化学试剂有限公司；磷酸盐缓冲盐水(PBS, 0.1 mol/L, 含0.1 mol/L KCl, pH 7.4)用于实验体系。

^{抗PEF单克隆抗体的表征与结果}

通过间接ELISA(iELISA)和间接竞争ELISA(icELISA)对成功制备的抗PEF单克隆抗体进行检测。结果显示抗PEF效价可达1:1.024×10⁶，灵敏度为6.72 ng/mL。对单克隆抗体亲和力进行评价，结果为9.36×10⁸ L/mol，表明抗PEF具有高亲和力。综上，研究结果表明抗PEF单克隆抗体具有高特异性、高灵敏度等特点。

^结论

本研究成功开发了一种基于Ag-GO-Nf纳米复合材料的无标记电化学免疫传感器，在最佳条件下，该免疫传感器对PEF的检测线性范围为0.5-100 ng/mL，检测限(LOD)为0.27 ng/mL（信噪比S/N = 3）。该检测限显著低于欧盟委员会法规(EU) No 37/2010规定的最大残留限量(MRL)。