山楂叶纯化多糖的结构表征、体外抗氧化及降脂活性研究

本研究首次系统分离并表征了山楂叶中的三种酸性多糖（HLP-1/2/3），通过HPGPC、IC、甲基化分析及NMR等技术解析其精细结构。重点揭示低分子量多糖HLP-1（10.19 kDa）通过抑制SREBP-1c通路显著改善脂代谢（降低TG/TC/LDL-c，提升HDL-c），并建立结构-活性关系（SAR），为开发植物多糖类NAFLD治疗剂提供理论依据。

　　

Highlight

材料与试剂

山楂叶采集自中国河北省保定市。HepG2细胞株购自中国科学院细胞库（上海）。TG（甘油三酯）、TC（总胆固醇）、LDL-c（低密度脂蛋白胆固醇）和HDL-c（高密度脂蛋白胆固醇）检测试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。BCA蛋白浓度检测试剂盒与油红O染色试剂盒由上海碧云天生物技术有限公司提供。

HLPs的化学成分与分子量

从山楂叶粗提物中纯化得到三种多糖HLP-1、HLP-2和HLP-3（图1A）。洗脱曲线和HPGPC图谱均显示单一尖锐峰，证实各组分的均一性。通过葡聚糖标准曲线回归方程（logM_w = ?1.615t + 21.980, R² = 0.9991）计算得到HLP-1、HLP-2和HLP-3的相对分子量（M_w）分别为10.19 kDa、400.38 kDa和435.52 kDa。

讨论

山楂（Crataegus pinnatifida）是药食同源植物，其果实多糖研究已较深入，但叶多糖的结构特征与构效关系（SAR）仍属空白。本研究分离的三种HLPs中，HLP-1被确定为关键活性成分。结构分析表明HLP-1为低甲氧基（DM, 31.27%）酸性多糖，其独特单糖残基（如木糖Xylp）和复杂分支结构赋予其优越的生物活性。分子量最小的HLP-1表现出最强的抗氧化能力和脂质调节作用，其机制与抑制SREBP-1c通路密切相关，这为开发新型植物源降脂剂提供了结构基础。

结论

本研究系统阐明了山楂叶三种多糖（HLP-1至HLP-3）的精细结构、构象特性及降脂机制。HLP-1具有独特残基（如Xylp），由10个单糖残基构成复杂分支结构和稳定构象；HLP-2残基较少，呈现典型果胶特征；HLP-3则含有潜在RG-I型单元，表面致密且热稳定性最佳。研究首次建立了HLPs结构与降脂活性的关联，为山楂叶高值化利用及代谢疾病治疗提供了新视角。