抗体-DNA纳米结构偶联物抑制CT26细胞效应并阻断肿瘤微环境PD-1上调的创新机制研究

本综述系统阐述了抗体-DNA纳米结构偶联物（ADNCs）作为新一代靶向治疗平台的突破性优势。通过DNA可编程结构实现高载药量（DAR=18）且避免抗体聚集，在CT26模型中同步激活caspase-3介导的凋亡（apoptosis）与RIP3介导的坏死性凋亡（necroptosis）双重死亡通路，显著抑制肿瘤生长并规避PD-1介导的T细胞耗竭，为克服肿瘤异质性提供了新策略。

　　

Section snippets

Synthesis of antibody DNA nanostructured conjugates

详细合成流程参照既往研究[6]。通过热退火四种单链DNA寡核苷酸（含叠氮基团的T1-N₃、T2、T3及T4-GEM）制备DNA纳米结构（TDN-N₃）。西妥昔单抗（cetuximab, CTM）与DBCO-NHS酯偶联形成CTM-DBCO，随后通过点击化学反应与TDN-N₃结合生成抗体-DNA纳米结构偶联物（ADNCs）。

Synthesis of CTG and assessment of its targeted anti-tumor efficacy on CT26 cells

前期研究通过磷酰胺化学法将吉西他滨（gemcitabine）整合至DNA链（T4-GEM），并组装成载药纳米结构（TDN）。与西妥昔单抗偶联后形成吉西他滨负载型偶联物（CTG）。非变性电泳与粒径分析显示CTG为单一组分（约25 nm），且能特异性靶向高表达EGFR的CT26细胞。体外实验证实CTG通过激活caspase-3诱导凋亡，同时触发RIP3介导的坏死性凋亡，双重机制显著增强抗肿瘤效果。

Discussion

CTG的卓越抗肿瘤效果源于两大核心机制：其一，西妥昔单抗赋予肿瘤靶向能力，使吉西他滨富集于瘤灶而非骨髓/肝脏；其二，DNA纳米结构保护药物免于胞外降解，并通过网格蛋白介导的内吞（clathrin-mediated endocytosis）高效入胞。转录组测序显示CTG能重塑肿瘤免疫微环境，促进CD8⁺ T细胞浸润且不引起PD-1上调，有效规避T细胞耗竭。在三种患者来源异种移植（PDX）模型中均保持强劲抑瘤效果，证实其跨越肿瘤异质性的潜力。

Conclusions

抗体-DNA纳米结构偶联物（ADNCs）成功突破传统ADC药物的载药量限制与聚集难题，通过协同激活凋亡与坏死性凋亡双重通路，并调控免疫微环境（避免PD-1上调），为精准肿瘤治疗提供兼具高效性与安全性的新型平台。