SKP2通过CDKN1B和RB磷酸化状态独立于RUNX1/ETO调控非t(8,21)急性髓系白血病亚型中TERT的表达

本研究针对非t(8,21)急性髓系白血病（AML）中端粒酶逆转录酶（TERT）的调控机制展开探索。研究人员通过直接抑制SKP2（S期激酶相关蛋白2），发现其下调可导致TERT表达降低、CDKN1B（p27）积累和RB低磷酸化，进而抑制细胞增殖并诱导衰老。该研究揭示了SKP2-CDKN1B-RB/E2F1轴在TERT调控中的核心作用，为AML靶向治疗提供了新思路。

　　

在急性髓系白血病（AML）的研究中，t(8;21)染色体易位导致的RUNX1/ETO融合基因已被证实可通过稳定SKP2（S-phase kinase-associated protein 2，S期激酶相关蛋白2）调控端粒酶逆转录酶（TERT）的表达，从而维持白血病细胞的自我更新能力。然而，在缺乏该易位的AML亚型中，TERT的调控机制尚不明确。这类白血病仍具有高TERT表达和端粒酶活性，推动疾病进展，因此阐明其分子机制具有重要临床意义。

为回答这一问题，研究人员在非t(8;21) AML细胞系（THP-1和HL-60）中直接敲低SKP2，并评估其对TERT表达、细胞表型及下游信号通路的影响。研究发现，SKP2抑制可导致TERT在转录和蛋白水平上的下调，端粒酶活性降低，同时伴随G1期细胞周期阻滞和细胞衰老增加。机制上，SKP2敲低引起CDKN1B（p27）积累和RB（Retinoblastoma protein，视网膜母细胞瘤蛋白）低磷酸化，但E2F1水平不变。尽管c-Myc蛋白水平上升且FOXO3a下降，但染色质免疫沉淀显示c-Myc在TERT启动子上的结合未发生改变，表明TERT抑制独立于FOXO3/c-Myc轴。公共数据集分析进一步显示，SKP2和TERT在多种AML亚型中普遍高表达。该研究首次揭示了在非t(8;21) AML中，SKP2通过CDKN1B-RB/E2F1通路直接调控TERT，独立于RUNX1/ETO，为靶向SKP2治疗AML提供了理论依据。本研究发表于《Scientific Reports》。

研究采用的主要技术包括：针对SKP2的siRNA基因敲低、蛋白质印迹（Western Blot）和定量PCR检测基因表达、端粒酶活性检测（TRAP法）、β-半乳糖苷酶染色分析细胞衰老、流式细胞术进行细胞周期分析、染色质免疫沉淀（ChIP）评估转录因子结合，以及利用BEAT AML和TCGA等公共数据库进行生物信息学验证。

SKP2 knockdown in AML subtypes lacking T(8,21) translocation results in TERT suppression and TERT loss related phenotypic changes

在THP-1和HL-60细胞中，SKP2敲低显著降低TERT mRNA和蛋白水平，端粒酶活性下降，同时细胞衰老增加和G1期阻滞，表明SKP直接调控TERT并影响细胞命运。

SKP2 knockdown resulted in accumulation Of CDKN1B and increased amounts of underphosphorylated RB

SKP2抑制导致CDKN1B（p27）蛋白积累，同时低磷酸化RB增加，而E2F1水平不变，提示RB/E2F1复合物稳定化，可能通过限制E2F1游离抑制TERT转录。

SKP2 mediated TERT expression is independent of the FOXO3/CMYC axis

尽管SKP2敲低后c-Myc蛋白上调、FOXO3a下调，但ChIP-qPCR显示c-Myc在TERT启动子上的占据未变，TERT仍被抑制，证明SKP2对TERT的调控不依赖FOXO3/c-Myc通路。

In-Silico data analysis in AML datasets show that SKP2 and TERT are generally up-regulated in AML

对BEAT AML和TCGA数据集的分析显示，SKP2在白血病中普遍高表达，尤其在t(8;21)亚型；TERT在TCGA数据中也升高，但在t(8;21)中低于其他某些亚型，支持SKP2-TERT轴在AML中的广泛相关性。

研究结论表明，在非t(8;21) AML中，SKP2通过调控CDKN1B积累和RB低磷酸化直接抑制TERT，独立于RUNX1/ETO和c-Myc。这不仅揭示了SKP2在维持白血病自我更新中的核心地位，还为临床靶向治疗提供了新策略，如使用SKP2抑制剂联合化疗可能改善AML疗效。