子宫内膜样子宫内膜癌中microRNA表达谱的诊断与预后潜力：聚焦PTEN、KRAS和β-Catenin调控机制

本研究针对子宫内膜样子宫内膜癌(EEC)的诊断与预后评估难题，通过分析28种microRNA的表达谱，揭示了其与PTEN、KRAS、β-Catenin等关键基因的调控关系。研究发现16种miRNA（如miR-21、miR-200家族）在癌组织中显著上调，12种miRNA（如miR-125b、miR-129-2）下调，且表达变化与肿瘤分级显著相关。该研究为EEC的分子分型提供了新型生物标志物，对术前诊断和个体化治疗具有重要临床意义。

　　

子宫内膜癌(Endometrial Cancer, EC)作为女性生殖系统最常见的恶性肿瘤，其发病率随着人口老龄化和肥胖率上升而持续增长。其中子宫内膜样子宫内膜癌(Endometrioid-type Endometrial Cancer, EEC)是最主要的组织学亚型。虽然EEC通常预后较好，但临床治疗仍面临重大挑战：手术范围的选择（特别是淋巴结清扫必要性）、术后复发风险预测以及个体化治疗策略制定都缺乏可靠的分子标志物支撑。现有组织病理学诊断存在主观性高、预测精度有限的问题，尤其对于希望保留生育功能的低级别EEC患者，更需要精准的分子评估工具。

在此背景下，microRNA(miRNA)——一类长度仅19-23个核苷酸的非编码RNA——展现出巨大潜力。这些微小分子通过靶向mRNA降解或翻译抑制调控约30%的人类基因，在癌症发生发展中扮演着关键角色。更引人注目的是，miRNA在体液中的稳定性使其成为理想的非侵入性生物标志物。EEC的分子特征通常涉及PTEN抑癌基因失活、KRAS原癌基因突变、β-Catenin信号通路异常以及错配修复缺陷(Mismatch Repair Deficiency, dMMR)等现象，但这些分子改变与miRNA调控网络之间的相互作用尚未明确。

为了解决这一科学难题，土耳其加齐大学的研究团队在《Scientific Reports》上发表了突破性研究。他们通过对47例EEC患者和50例良性病变对照组的组织样本进行系统分析，探索了28种精心筛选的miRNA的表达模式。这些miRNA的选择基于其在EEC相关致癌通路（如PI3K/AKT、RAS/MAPK、Wnt/β-Catenin）中的已知作用，以及与PTEN、KRAS、β-Catenin等关键基因的调控关系。

研究采用多项关键技术：首先收集术中冰冻切片样本建立生物样本库；通过qPCR(Quantitative Real-time Polymerase Chain Reaction)精确量化miRNA和mRNA表达水平；利用免疫组化检测PTEN蛋白和错配修复蛋白（MLH1、MSH2、MSH6、PMS2）表达；采用Pfaffl算法进行相对定量分析；最后通过统计学方法验证表达差异与临床病理参数的相关性。

研究结果

miRNA表达水平

研究发现28种miRNA在EEC与正常子宫内膜(Normal Endometrium, NE)间存在显著差异表达。其中16种miRNA呈现上调趋势，包括miR-let-7a、miR-18a-3p、miR-21、miR-30b、miR-96、miR-130a、miR-141、miR-181b、miR-182、miR-183、miR-200a、miR-200b、miR-200c、miR-203、miR-205和miR-429。相反，12种miRNA表达下调，包括miR-let-7c、miR-let-7e、miR-30c、miR-101、miR-125b、miR-126、miR-129-2、miR-217、miR-324-3p、miR-518b、miR-543和miR-596。

肿瘤分级相关的miRNA变化

随着肿瘤分级升高，16种miRNA的表达呈现渐进式增加趋势(p<0.05)。与此同时，12种miRNA在从正常子宫内膜向EEC转变过程中表达相对降低(p<0.05)。这种分级特异性表达模式表明miRNA可作为肿瘤恶性程度评估的分子标尺。

PTEN、KRAS和β-Catenin的mRNA水平

EEC组织中PTEN、KRAS和β-Catenin的mRNA表达均显著低于正常组织(p<0.05)。在分级分析中，PTEN mRNA在2级和3级肿瘤中持续下调(p<0.05)，而KRAS和β-Catenin mRNA在3级肿瘤中才出现显著降低(p<0.05)。

MMR和PTEN蛋白表达

47例EEC中，28%存在错配修复缺陷(dMMR)，66%显示PTEN表达缺失，13%同时存在两种缺陷。dMMR病例中92%表现为PMS2/MLH1缺失，仅8%为MSH2/MSH6缺失。值得注意的是，肿瘤分级与分子特征呈现明确关联：3级肿瘤中80%同时存在dMMR和PTEN缺失，而1级肿瘤中这一比例仅为13%。

研究结论与意义

该研究首次系统揭示了EEC中miRNA表达谱与肿瘤分级、关键信号通路基因之间的调控网络。研究发现16种上调和12种下调的miRNA构成了EEC的特异性分子特征，其中miR-21、miR-200家族、miR-205等已知癌基因的过表达与PTEN抑制密切相关，而miR-125b、miR-129-2等肿瘤抑制miRNA的失活则促进了致癌通路激活。

从临床转化角度，这项研究具有三重意义：首先，miRNA表达谱可作为术前诊断工具，通过子宫内膜活检样本预测肿瘤行为，指导手术范围决策；其次，特异性miRNA标志物有助于识别高风险患者，优化辅助治疗方案选择；最后，对于希望保留生育功能的低级别EEC患者，miRNA分析可提供更精准的分子评估，避免过度治疗。

研究还揭示了分子特征与病理分级的内在联系：高级别肿瘤更频繁地同时携带dMMR和PTEN缺失，这种"双重打击"现象可能解释其更具侵袭性的临床行为。而miR-203、miR-129-2等与DNA修复机制相关的miRNA表达异常，为理解MSI(Microsatellite Instability)表型的分子基础提供了新视角。

尽管研究存在样本量有限的约束，但无疑为EEC的精准医疗开辟了新路径。未来研究可探索基于血液或体液的miRNA检测方法，实现更便捷的疾病筛查和监测。同时，针对关键miRNA（如miR-205或miR-200家族）的靶向干预策略，可能成为EEC治疗的新方向。

这项研究不仅深化了我们对EEC分子发病机制的理解，更重要的是提供了一套可临床应用的分子工具，有望改变当前依赖组织病理学的单一诊断模式，推动子宫内膜癌向精准医疗时代迈进。