弗氏柠檬酸杆菌（Citrobacter freundii）对鱼类的致病性研究：通过罗氏鱼（Labeo rohita）的血清生物化学和基因表达分析进行深入探讨

《Aquaculture International》：Citrobacter freundii induced pathogenicity towards fish: an insight investigation through serum biochemistry and gene expression analysis in Labeo rohita

Citrobacter freundii作为常见淡水鱼病原体对水产养殖造成重大经济损失，本研究通过体外和体内实验揭示其毒力机制，发现该菌具有高度生物膜形成能力和多重抗生素耐药性（MAR指数0.25），通过检测溶氧酶、免疫球蛋白及热休克蛋白等生物标志物和TLR4、TNF-α等免疫相关基因表达，阐明感染后鱼类的免疫应答及应激反应。

　　

摘要

Citrobacter freundii是一种常见的淡水鱼类病原体，对全球水产养殖业造成了巨大的经济损失。本研究通过体外和体内实验方法研究了该菌的毒力特性（NCBI登录号：PP112336）。扫描电子显微镜观察显示，这种细菌呈细长杆状，具有很强的生物膜形成能力。生化特性分析结果与先前报道的C. freundii的生化特征高度一致。抗生素敏感性测试表明该菌具有多重耐药性（MAR指数：0.25）。溶血活性、生物膜形成能力、游动能力和细胞毒性研究均表明其具有高度致病性。接下来，通过将纯培养的C. freundii注射到健康的L. rohita鱼苗体内进行了体内毒力筛选。该菌的96小时LD₅₀值约为1.2×10⁴ CFU/鱼。随后，将LD₅₀值的1/100剂量（1.2×10² CFU/鱼）施用于鱼苗，以评估其对宿主的免疫调节作用。感染后，感染鱼体内的免疫相关标志物（如SOD、IgM和过氧化氢酶水平）显著下降，而皮质醇、HSP70和HSP90水平显著升高。对免疫相关基因（包括TLR4、TNF-α、HSP70、C3、NOD1和IL-1β）的mRNA表达分析显示，在感染期间，这些基因在鱼肝、肾和皮肤组织中的表达发生了显著变化。这些变化表明鱼类正在努力应对细菌入侵造成的免疫损伤。本研究为理解感染机制以及开发控制该感染的疗法提供了宝贵的见解。

图形摘要

Citrobacter freundii是一种常见的淡水鱼类病原体，对全球水产养殖业造成了巨大的经济损失。本研究通过体外和体内实验方法研究了该菌的毒力特性（NCBI登录号：PP112336）。扫描电子显微镜观察显示，这种细菌呈细长杆状，具有很强的生物膜形成能力。生化特性分析结果与先前报道的C. freundii的生化特征高度一致。抗生素敏感性测试表明该菌具有多重耐药性（MAR指数：0.25）。溶血活性、生物膜形成能力、游动能力和细胞毒性研究均表明其具有高度致病性。接下来，通过将纯培养的C. freundii注射到健康的L. rohita鱼苗体内进行了体内毒力筛选。该菌的96小时LD₅₀值约为1.2×10⁴ CFU/鱼。随后，将LD₅₀值的1/100剂量（1.2×10² CFU/鱼）施用于鱼苗，以评估其对宿主的免疫调节作用。感染后，感染鱼体内的免疫相关标志物（如SOD、IgM和过氧化氢酶水平）显著下降，而皮质醇、HSP70和HSP90水平显著升高。对免疫相关基因（包括TLR4、TNF-α、HSP70、C3、NOD1和IL-1β）的mRNA表达分析显示，在感染期间，这些基因在鱼肝、肾和皮肤组织中的表达发生了显著变化。这些变化表明鱼类正在努力应对细菌入侵造成的免疫损伤。本研究为理解感染机制以及开发控制该感染的疗法提供了宝贵的见解。

图形摘要