ADAM10表达与儿童免疫性血小板减少症缺乏关联：一项病例对照研究

《Egyptian Pediatric Association Gazette》：Lack of association between ADAM10 expression and immune thrombocytopenia in children: a case?control study

本研究针对ADAM10在儿童免疫性血小板减少症(ITP)发病机制中的作用尚不明确的问题，开展了ADAM10 mRNA表达与ITP关联性的病例对照研究。通过实时荧光定量PCR技术检测50例ITP患儿和30例健康对照，发现两组ADAM10 mRNA表达水平无显著差异(p=0.689)，且表达水平与疾病严重程度(p=0.174)和治疗反应(p=0.519)均无显著相关性。该阴性结果为进一步探索ITP免疫调控机制提供了重要参考。

　　

在儿童血液系统疾病中，免疫性血小板减少症(ITP)是一种常见的自身免疫性出血性疾病，其特征是血小板计数显著降低（低于100×10⁹/L），导致患者容易出现瘀伤、出血等临床表现。这种疾病的本质是免疫系统失调，机体产生了攻击自身血小板的抗体，同时伴有T细胞功能异常，包括辅助性T细胞(Th)亚群比例失衡、调节性T细胞(Treg)数量减少或功能缺陷等。尽管糖皮质激素等免疫抑制剂是ITP的一线治疗方案，但仍有部分患者治疗效果不佳或发展为慢性病程，因此深入探究ITP的免疫发病机制，寻找新的治疗靶点具有重要意义。

A Disintegrin and Metalloproteinase 10 (ADAM10) 是解整合素-金属蛋白酶家族的重要成员，作为一种跨膜蛋白酶，它在免疫调节中扮演着关键角色。ADAM10可通过水解切割（称为ectodomain shedding）多种细胞膜表面的蛋白分子，如细胞因子受体、黏附分子等，从而影响细胞信号传导。特别是在T淋巴细胞中，ADAM10参与调控其活化、增殖以及关键的Notch信号通路。已有研究表明，ADAM10的功能失调与多种自身免疫性疾病（如系统性红斑狼疮、多发性硬化症）以及炎症、过敏性疾病的发生发展有关。基于ADAM10在免疫调控中的核心地位，研究人员推测它可能也参与了ITP的病理过程，或许能成为治疗ITP，尤其是难治性ITP的一个潜在新靶点。然而，关于ADAM10在ITP，特别是在儿童ITP患者中的具体作用，此前的研究报道甚少且结论不一。为了填补这一空白，由Nouran Momen、Shahira K. A. Botros、Reham A. Khattab、Rasha A. Affi和Lamyaa H. Soliman组成的研究团队在《Egyptian Pediatric Association Gazette》上发表了一项病例对照研究，旨在探讨ADAM10 mRNA表达水平与儿童ITP发病及其严重程度是否存在关联。

本研究主要采用了病例对照研究设计，核心实验技术为实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)。研究队列包括从开罗大学招募的50名新诊断的ITP患儿（中位年龄5岁）和30名年龄、性别匹配的健康对照儿童（中位年龄4岁）。研究人员从所有受试者外周血中提取总RNA，逆转录合成cDNA后，使用特异性引物通过SYBR Green法进行Real-time PCR扩增，检测ADAM10 mRNA的表达水平。以β-actin作为内参基因，采用2^-ΔΔCT法计算ADAM10 mRNA的相对表达量。所有实验室分析人员对样本分组信息设盲，以确保结果的客观性。同时，详细记录了患者的临床资料，包括血小板计数、对标准糖皮质激素治疗（1-2 mg/kg/天，持续2-4周）的反应（根据ASH 2019指南分为完全缓解、有效和无应答），并分析了ADAM10表达与这些临床参数的相关性。统计学分析使用SPSS 25.0软件进行。

患者与对照组ADAM10 mRNA表达比较

研究结果显示，ITP患者组ADAM10 mRNA的相对表达中位值为1.48（范围：0.03-6.15），而健康对照组为1.89（范围：0.00-7.90）。经Mann-Whitney U检验，两组间的表达水平差异无统计学意义（p = 0.689）。效应量科恩d值计算约为0.006，进一步表明差异非常微小。这表明，在整体mRNA表达水平上，ADAM10可能与儿童ITP的发病无显著直接关联。

ADAM10表达与疾病严重程度的相关性

为了评估ADAM10表达是否与ITP病情严重程度相关，研究人员根据入院时血小板计数将患者分为两组：血小板计数低于30×10⁹/L的严重血小板减少组（31例，62%）和血小板计数高于30×10⁹/L的较轻组（19例，38%）。分析发现，严重组ADAM10 mRNA表达平均水平为20.88，较轻组为22.19，两组间无显著差异（p = 0.174）。此外，Spearman相关性分析也显示，ADAM10 mRNA表达水平与患者年龄（p = 0.643）或血小板计数值（p = 0.656）均无显著相关性。这些结果提示，ADAM10的表达量可能不随儿童ITP的疾病严重程度而变化。

ADAM10表达与治疗反应的关系

研究人员进一步探讨了ADAM10表达水平是否能够预测患者对糖皮质激素治疗的反应。在接受标准激素治疗的患者中，24例（48%）达到完全缓解(CR)，15例（30%）为有效(R)，11例（22%）为无应答(NR)。比较这三组患者的ADAM10 mRNA表达水平发现，无应答组的表达中位值最高（2.14，范围：0.37-5.05），完全缓解组为1.63（范围：0.22-5.78），有效组为1.26（范围：0.03-6.15）。然而，Kruskal-Wallis H检验显示，三组间的差异未达到统计学显著性（p = 0.519）。虽然无应答组表现出表达升高的趋势，但在本研究的样本量下，尚不能认为ADAM10 mRNA表达水平是预测儿童ITP激素治疗反应的可靠指标。

其他分析

研究还分析了ADAM10表达与性别的关系，结果显示不同性别患者之间的表达水平无显著差异（p = 0.985），排除了性别因素对结果的潜在影响。

本研究的主要结论是，在研究的埃及儿童ITP群体中，未发现外周血ADAM10 mRNA表达水平与ITP的患病风险、疾病严重程度或对糖皮质激素的初始治疗反应存在统计学上显著的关联。这一阴性结果与之前某些在成人ITP患者中的研究结论不同。例如，Qiao等人的研究发现成人ITP患者ADAM10 mRNA表达显著降低，并且在疾病缓解期表达水平有所恢复。作者对此差异进行讨论，认为可能的原因包括：研究人群的种族和遗传背景不同、样本量的限制，以及儿童ITP与成人ITP在疾病本质上的潜在差异。儿童ITP通常起病急、自发缓解率高，可能涉及一过性的免疫紊乱，而成人ITP更易慢性化，其免疫失调机制可能更为持久和复杂，ADAM10在其中扮演的角色也可能有所不同。

尽管本研究在mRNA水平上未发现阳性关联，但作者在讨论中指出了研究的局限性以及未来可能的研究方向。首先，ADAM10的生物学功能受到转录后修饰、蛋白翻译及酶活性调控等多层次机制的精细调节。mRNA水平未能检测到差异，并不完全排除ADAM10蛋白水平或其酶活性在ITP病理过程中发生变化的可能性。其次，ADAM家族其他成员，如ADAM17（TNF-α转换酶），可能与ADAM10存在功能互补或协同作用。已有研究表明ADAM17在免疫和血小板生成中发挥作用，其在儿童ITP中的表达也有报道下调。因此，未来研究需要同时检测ADAM10和ADAM17的蛋白表达及活性，并扩大样本量，特别是纳入更多慢性ITP患儿，才能更全面地评估ADAM10/ADAM17轴在ITP中的作用。

总之，这项研究首次在埃及儿童ITP人群中探讨了ADAM10 mRNA的表达情况，虽然得出了阴性结果，但其科学价值在于为ITP免疫机制研究领域提供了重要的数据参考，提示ADAM10在儿童ITP发病中的角色可能不如在其他自身免疫病中那样突出，或因其功能复杂性而难以通过简单的mRNA检测揭示。该研究强调了在不同人群、不同年龄组以及分子水平（如蛋白和功能水平）上进行深入研究的必要性，为后续探索ITP的精确免疫调控网络和潜在治疗靶点奠定了基础。