基于OFFGEL?分离与LC-MS/MS技术的十二指肠贾第虫免疫原性蛋白质组学研究及其临床转化价值

本文系统阐述了采用OFFGEL?电泳联合LC-MS/MS技术对十二指肠贾第虫（Giardia duodenalis）免疫原性蛋白的创新性研究。通过优化体外囊泡形成（encystation）培养体系，成功鉴定出包括变异表面蛋白（VSP）、贾第素（giardins）、热休克蛋白（Hsp70/Hsp90）和囊壁蛋白（CWP）在内的关键抗原靶点，为贾第虫病（giardiasis）的精准诊断（如非侵入性生物标志物开发）和新型治疗策略（如疫苗设计）提供了重要理论依据和技术支撑。

　　

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In vitro Cultivation of Giardia duodenalis Trophozoites and Cysts

贾第虫滋养体源自美国国立卫生研究院生物防御与新兴感染研究资源库（NR-9237株），采用添加1%抗生素-抗真菌剂（含链霉素、两性霉素B和青霉素）的TYI-S-33改良培养基，于37°C培养72小时至汇合。体外成囊实验将70μL滋养体接种于含猪胆汁（0.25mg/mL）和乳酸半钙盐（5mM）的成囊培养基（pH7.8）中，37°C厌氧培养48小时，通过血细胞计数板定量囊泡产量。

Morphological Observation of Giardia duodenalis Cysts

本研究对贾第虫滋养体与囊泡的形态特征进行了系统验证。参照Davids与Gillin（2011）的描述，1型贾第虫囊泡呈椭圆形、折光亮感，且囊壁内细胞体分布均匀。在相差显微镜下，成熟囊泡呈现典型的光折射壁结构，而滋养体则表现为特征性的梨形形态与鞭毛运动。

Discussion

成囊过程中，滋养体从梨形向球形转变，并被囊壁包裹。我们观察到囊泡簇的形成，这与既往研究报道的体外培养中丝状表面接触融合现象一致（体内未见该现象）。后续研究将致力于模拟上肠道环境，优化体外成囊条件，以提升具有生物活性的囊泡产量。

Conclusion

本研究通过整合创新性蛋白质分离技术与免疫蛋白质组学方法，全面解析了贾第虫的免疫原性蛋白谱。鉴定出的多个高潜力免疫原性候选靶点，经实验验证后有望为揭示贾第虫病发病机制、推动精准诊断技术和新型治疗策略开发提供关键突破点。