靶向中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）的DNase 1治疗减轻大血管闭塞所致下游微血管血栓炎症并改善卒中预后的实验研究

本研究聚焦急性缺血性卒中（AIS）后下游微血管血栓炎症（DMT）的机制与干预策略，探讨了DNase 1降解中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）对脑缺血损伤的保护作用。研究人员通过大鼠模型中脑动脉闭塞（tMCAO）实验，发现早期DNase 1治疗可显著减小梗死体积、改善神经功能，并减轻血脑屏障破坏与脑水肿。该研究为NETs作为卒中治疗新靶点提供了实验依据，对提升再通治疗临床效益具有重要启示。

　　

脑卒中，尤其是急性缺血性卒中（AIS），是全球范围内导致死亡和长期残疾的主要原因之一。尽管血管内再通治疗（如取栓术）能够恢复大血管的血流，但许多患者仍然预后不佳，部分原因在于下游微血管系统中发生的血栓炎症反应（thromboinflammation）。这一过程涉及中性粒细胞的过度活化、血小板聚集、凝血途径的激活以及血脑屏障（BBB）的破坏，最终导致脑组织进一步损伤和出血性转化等并发症。近年来，中性粒细胞胞外诱捕网（neutrophil extracellular traps，NETs）——由DNA、组蛋白和颗粒蛋白组成的网状结构——被发现在血栓炎症中扮演关键角色。它们不仅能促进血栓形成，还会加剧炎症反应和组织损伤。因此，靶向清除NETs是否能够减轻卒中后的微血管病变，成为一个值得深入研究的重要问题。

在此背景下，由Lucas Di Meglio、Mialitiana Solo Nomenjanahary、Laurine Bedoucha、Sébastien Dupont、Fatima Zemali、Véronique Ollivier、Clément Journe、Martine Jandrot-Perrus、Thomas Rambaud、Mikael Mazighi、Benoit Ho-Tin-Noe和Jean-Philippe Desilles组成的研究团队开展了一项实验研究，旨在探讨脱氧核糖核酸酶1（DNase 1）——一种可切割细胞外DNA的酶——在卒中模型中对下游微血管血栓炎症（DMT）的治疗潜力。该研究最终发表在《Research and Practice in Thrombosis and Haemostasis》上。

研究人员主要采用了以下关键技术方法：使用大鼠短暂性大脑中动脉闭塞（tMCAO）模型模拟临床卒中，在闭塞后30分钟通过静脉（20%）和腹腔（80%）途径注射DNase 1或对照溶剂；通过磁共振成像（MRI）定量梗死体积，采用神经行为学评分评估功能缺损；利用免疫组织化学和分子生物学技术（如脑组织匀浆生物标志物检测）分析微血管中NETs相关成分（如瓜氨酸化组蛋白H3^citH3）、凝血激活指标（如凝血酶-抗凝血酶复合物TAT）以及血脑屏障完整性（如脑内IgG渗出）。

研究结果

背景

研究背景表明，中性粒细胞激活与NETs形成参与AIS中的DMT和BBB破坏，但直接靶向NETs的治疗策略在卒中模型中的效果尚未明确。

方法

18只大鼠接受120分钟tMCAO手术，并在闭塞后30分钟随机接受DNase 1（3 mg/kg）或溶剂治疗。主要结局指标包括24小时后的梗死体积（MRI评估）、神经功能缺损及出血性转化发生率。脑DMT通过脑匀浆中血小板、凝血和中性粒细胞活化生物标志物的量化进行评估。

结果

DNase 1治疗显著降低了梗死体积（p=0.024）并改善了24小时神经功能结局（p=0.031）。免疫染色显示，纤维蛋白（原）和citH3与细胞外DNA在闭塞微血管中共定位。与溶剂组相比，DNase 1组大鼠脑中的TAT复合物和纤维蛋白原沉积显著减少（p=0.027和p=0.036）。血脑屏障破坏（通过脑IgG测量评估）和脑水肿也显著减轻（p=0.015和p=0.031）。

结论

NETs在AIS期间促进DMT，早期DNase 1治疗可减轻血栓炎症反应和脑损伤，为提高大血管再通治疗的临床效益提供了新策略。

研究结论部分强调，NETs是卒中后微血管血栓炎症的关键介质，使用DNase 1清除NETs可显著减轻脑缺血损伤、改善神经功能并保护血脑屏障。这一发现不仅深化了对卒中病理机制的理解，也为开发辅助再通治疗的靶向疗法提供了实验依据。未来研究可进一步探索DNase 1与现有抗血栓或抗炎治疗的协同效应，以及其在临床转化中的潜在应用价值。