循环肿瘤DNA甲基化标记物定量与转移性胰腺癌肿瘤体积的相关性研究

本期推荐：为解决转移性胰腺导管腺癌（mPDAC）中循环肿瘤DNA（ctDNA）检测率不足及与肿瘤负荷关系不明的问题，研究人员开展ctDNA甲基化标记（HOXD8/POU4F1）与三维肿瘤体积（TV）的相关性研究。结果显示ctDNA量与总TV（Spearman’s ρ=0.353）及肝转移TV（ρ=0.500）显著相关，肝转移TV阈值3.7 mL可预测ctDNA检出（敏感性85.1%）。该研究为mPDAC无创肿瘤负荷评估提供了新依据。

　　

胰腺癌是全球癌症相关死亡的主要原因之一，尤其胰腺导管腺癌（PDAC）因其高度恶性和早期转移特性，患者预后极差。尽管化疗方案如FOLFIRINOX和吉西他滨联合白蛋白紫杉醇带来了一定进展，但总体生存率仍不容乐观。在精准医疗时代，寻找能够预测预后、指导治疗并动态监测疗效的生物标志物成为迫切需求。目前临床使用的碳水化合物抗原19-9（CA 19-9）存在诸多局限，例如在胆道梗阻或其他癌症中也会升高，而在Lewis抗原阴性个体（占高加索人群5–10%）中根本无法检测到。

循环肿瘤DNA（ctDNA）作为肿瘤释放至血液中的肿瘤源性DNA片段，近年来展现出巨大的潜力。通过检测PDAC常见基因突变（如KRAS、TP53）或表观遗传学改变（如基因启动子甲基化），ctDNA不仅具有高度特异性，还表现出强烈的预后价值。然而，约三分之一转移性PDAC（mPDAC）患者检测不到ctDNA，其原因可能与肿瘤体积（TV）、肿瘤细胞稀疏的纤维化间质或其他生物学特性有关。

为此，Olivier Caliez团队在《Scientific Reports》发表了一项研究，探讨了基于甲基化标记（HOXD8和POU4F1）的ctDNA定量与三维重建肿瘤体积之间的相关性。该研究纳入71例初治mPDAC患者，采用液滴数字PCR（ddPCR）检测血浆ctDNA，并通过Syngo.via软件对基线CT影像进行半自动肿瘤体积测量。

关键技术方法包括：前瞻性收集129例mPDAC患者血浆样本，经严格筛选后最终纳入71例；使用EDTA管采集血样并离心提取血浆，通过QIAamp或Maxwell试剂盒提取循环游离DNA（ccfDNA）；经亚硫酸盐转化后，利用ddPCR检测HOXD8和POU4F1甲基化水平；使用Syngo.via影像分析系统对原发灶和转移灶进行三维体积测量。

研究结果

人群特征： ctDNA检出率为66.2%（47/71），检出组患者肿瘤分化程度更低（p=0.031）。中位总TV为69.6 mL，检出组TV显著高于未检出组（129.5 mL vs. 31.8 mL, p=0.002）。

肿瘤体积与转移部位：肝转移TV与ctDNA数量相关性最强（Spearman’s ρ=0.500, p<0.001），而原发灶TV无显著差异。无肝转移患者ctDNA检出率仅9.1%，提示肝转移是ctDNA释放的主要来源。

生物标志物相关性： CA 19-9与TV或ctDNA均无显著相关。ccfDNA总量与肝转移TV弱相关（ρ=0.266, p=0.028），但与总TV无关。

ctDNA检出阈值： ROC曲线分析显示，总TV≥90.1 mL可预测ctDNA检出（AUC=0.723），肝转移TV≥3.7 mL时敏感性达85.1%、特异性79.2%（AUC=0.887）。

治疗动态监测： 6例患者随访显示，4例ctDNA下降与TV减少一致，2例存在差异，可能反映ctDNA动态变化较影像学更敏感。

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结论与意义

该研究首次证实mPDAC中甲基化ctDNA与三维TV之间存在显著相关性，尤其与肝转移负荷密切相关。肝转移TV仅3.7 mL（约2厘米直径病灶）即可实现ctDNA高灵敏度检出，表明肝脏可能作为ctDNA释放的“放大器”，其原因或与该器官血供丰富、微环境特性及ctDNA过滤机制有关。

研究同时揭示，即使在高肿瘤负荷患者中仍存在ctDNA未检出情况，表明除体积外，肿瘤分化程度、生物学行为及微环境因素同样影响ctDNA释放。这一发现为后续探索ctDNA释放机制提供了方向。

在临床转化方面，该研究支持将ctDNA作为非侵入性肿瘤负荷替代标志物，尤其适用于无法反复活检或影像评估困难的患者。在临床试验中，ctDNA定量可辅助分层设计；在肝转移主导的mPDAC中，液体活检甚至可替代组织活检进行诊断与分子分型。

尽管三维TV测量目前仍耗时费力，但随着人工智能自动分割技术的发展，未来TV评估将更高效精准。结合ctDNA动态监测，二者有望形成互补，为mPDAC的疗效评估、预后判断及个体化治疗提供全新视角。