咖啡酸与纳米咖啡酸颗粒抗念珠菌病的体外效力研究：新型抗真菌策略的探索

本推荐评述聚焦于咖啡酸（CA）及其纳米制剂（Nano-CA）在抗念珠菌感染中的体外药效学研究。研究通过构建尼奥索姆（niosome）纳米载药系统，优化了粒径（271.83 nm）、PDI（0.21）及包封率（EE% 42.34%），并依据CLSI M27-A3/S4标准测定最小抑菌浓度（MIC）。结果显示，纳米化显著提升CA的抗真菌活性（MIC范围4-128 μg/mL），其效力虽低于传统药物氟康唑（Fluconazole）和制霉菌素（Nystatin），但因其天然来源与低副作用特性，为耐药念珠菌感染提供了潜在替代疗法。本研究为开发新型抗真菌纳米药物奠定基础。

　　

ABSTRACT

本研究针对最常见的口腔真菌感染——念珠菌病，探究咖啡酸（CA）及其纳米制剂（纳米咖啡酸）的抗真菌效果。通过乙醇注射法制备含咖啡酸的尼奥索姆囊泡（caffeosome），并系统评估其理化特性与抗真菌活性。

背景与目的

念珠菌属真菌常驻于人体黏膜，在免疫低下人群中可引发机会性感染。现有抗真菌药物如唑类衍生物和制霉菌素存在耐药性及副作用问题，天然植物活性成分成为研究热点。咖啡酸作为一种广泛存在于植物的酚酸，具有抗氧化、抗炎及抗菌特性，但其抗真菌机制及应用潜力尚待深入探索。本研究旨在通过纳米技术提升咖啡酸的递送效率与抗真菌效能。

材料与方法

研究采用Span 60、Tween 60和胆固醇（Chol.）为载体材料，通过动态光散射（DLS）测定纳米颗粒粒径与分散指数（PDI），Zetasizer Nano ZS测定Zeta电位，紫外分光光度法测定包封率（EE%）。以20株临床分离念珠菌（包括15株白色念珠菌、3株克鲁斯念珠菌和2株光滑念珠菌）为对象，依据CLSI M27-A3/S4标准进行肉汤微量稀释法药敏试验，测定最小抑菌浓度（MIC₅₀/MIC₉₀），并采用Mann-Whitney与Kruskal-Wallis检验进行统计分析。

结果

最优制剂（Caffeosome 5）配方含100 mg Tween 60、100 mg Span 60与200 mg胆固醇，其粒径为271.83±3.11 nm，PDI为0.21±0.02，Zeta电位为-5.58±0.47 mV，EE%达42.34±4.34%。胆固醇含量增加显著提升粒径、Zeta电位绝对值与包封率（P<0.05）。扫描电镜显示纳米颗粒呈半球形且分布均匀，ATR-FTIR光谱证实咖啡酸与辅料间无化学相互作用。体外释放研究表明，纳米制剂24小时释放率达93.71%，显著高于游离咖啡酸（66.12%）。抗真菌药敏试验显示，纳米咖啡酸MIC值范围（4-128 μg/mL）低于游离咖啡酸（64-128 μg/mL），但高于氟康唑（0.063-1 μg/mL）与制霉菌素（0.032-1 μg/mL）。按抑菌效力排序为：制霉菌素 > 氟康唑 > 载体 > 纳米咖啡酸 > 咖啡酸。

讨论

纳米化通过提升药物溶解性与细胞膜渗透性增强咖啡酸的抗真菌活性。胆固醇的添加优化了囊泡稳定性与药物负载能力，其机制可能与改变膜流动性及疏水相互作用相关。咖啡酸及其衍生物（如CAPE）的抗真菌作用涉及多途径：铁离子螯合抑制真菌代谢、诱导活性氧（ROS）生成引发氧化应激、破坏细胞膜完整性、以及调控凋亡相关基因（如caspase通路）。研究观察到菌种间敏感性差异，白色念珠菌对咖啡酸敏感性较低（MIC多≥128 μg/mL），而热带念珠菌与光滑念珠菌部分菌株表现较低MIC值，提示抗真菌机制存在种属特异性。与传统药物相比，纳米咖啡酸虽效力较低，但其天然来源与低毒性特性为耐药真菌感染提供了互补治疗策略。

结论

本研究成功构建了负载咖啡酸的尼奥索姆纳米系统，证实纳米化可显著提升咖啡酸的释放效率与抗真菌活性。尽管其效力仍低于常规抗真菌药物，但为开发基于天然产物的抗真菌纳米制剂提供了实验依据。后续需开展体内研究进一步验证其临床适用性与作用机制。

作者贡献与致谢

研究由马赞德兰医科大学（Mazandaran University of Medical Sciences）团队完成，伦理批准号IR.MAZUMS.REC.1401.418。数据均来源于论文内部。