牛蛙（Aquarana catesbeianus）蝌蚪最佳日粮蛋白脂比：促进生长与变态的关键营养策略

本刊推荐：为解决牛蛙蝌蚪阶段缺乏专用饲料配方、营养需求不明的问题，研究人员开展了日粮蛋白质与脂质比例对蝌蚪生长性能、饲料利用、抗氧化能力及变态率影响的系统研究。结果表明，42%粗蛋白(DP)与11%粗脂(DL)的配比(42?P/11?L)在保障高存活率、最佳生长和肝脏健康的前提下，最有利于蝌蚪的生长发育和变态进程，为牛蛙蝌蚪人工饲料的精准配制提供了关键理论依据和实践指导。

　　

在全球水产市场中，牛蛙（Aquarana catesbeianus）因其高经济价值而备受关注。然而，在其养殖过程中，蝌蚪阶段的培育是一个关键环节，却长期面临着一个突出的问题：缺乏专门针对其营养需求的饲料。目前，养殖户大多依赖其他水产动物的商业饲料进行投喂，这些饲料无法满足蝌蚪特殊的生长发育需求，可能导致生长迟缓、变态（Metamorphosis）不同步甚至存活率下降。尽管已有一些研究分别探讨了牛蛙蝌蚪对蛋白质（约42.49%–46.50%）和脂质（约10.72%–11.08%）的单独需求，但蛋白质和脂质在日粮中的相互作用，特别是脂质对蛋白质的“节约效应”（Protein-sparing effect）及其对最佳蛋白需求量的影响，仍未得到量化。确定最佳的蛋白脂比，对于制定高效、低成本、低污染且能支持牛蛙蝌蚪健康发育的日粮配方至关重要。

为了解答这一问题，发表在《Aquaculture Reports》上的一项研究进行了一项为期11周的饲养试验。研究人员设计了9种实验日粮，设置了三个粗蛋白水平（DP: 37%, 42%, 47%）和三个粗脂水平（DL: 7%, 11%, 15%），系统评估了不同蛋白脂比对牛蛙蝌蚪生长性能、饲料利用、体成分、抗氧化能力、脂代谢以及变态率的综合影响。

本研究采用的关键技术方法主要包括：为期11周的养殖实验，使用30升水族箱，以6.5%体重的日粮投喂阶段25的牛蛙蝌蚪（样本来源自当地养殖场）；样本采集后，利用生化试剂盒检测了血清总胆固醇(T-CHO)、甘油三酯(TG)等指标以及肝脏抗氧化酶（SOD, CAT）活性；通过组织学技术（H&E和油红O染色）观察了肝脏脂质沉积情况；使用酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒分析了肝脏胰岛素样生长因子1(IGF-1)、生长激素受体(GHR)和血清甲状腺素(T4)的含量；并通过表观消化率(ADCs)和肠道消化酶（胰蛋白酶TPS、脂肪酶LPS）活性评估了饲料利用率。数据采用SPSS进行双因素方差分析(ANOVA)和Tukey事后检验。

3.1. 生长性能和饲料利用

结果表明，日粮蛋白(DP)和脂质(DL)水平及其交互作用(DP × DL)显著影响蝌蚪的末重(FBW)、增重率(WG)、特定生长率(SGR)、饲料转化率(FCR)、蛋白质效率比(PER)和存活率。随着DP从37%增至47%以及DL从7%增至15%，WG、SGR显著提升。42?P/11?L、42?P/15?L、47?P/7?L、47?P/11?L和47?P/15?L组表现出优异的生长性能。然而，42?P/15?L和47?P/15?L组的存活率最低，表明过高的脂质水平（15%）可能对蝌蚪健康产生负面影响。交互作用显著影响FCR和PER，证实了脂质对蛋白质的节约效应，即在适宜比例下，脂质可提供能量，减少蛋白质的分解供能，使其更多用于生长。

3.2. 体成分和形态参数

DP显著影响全体的粗蛋白和灰分含量，42%和47%蛋白组的体蛋白显著高于37%组。DL显著影响全体的粗脂和能量，11%和15%脂质组的体脂含量较高。随着DL从7%增至15%，腹脂率(AFP)和肥满度(CF)显著增加，表明脂质摄入促进了能量储备。

3.3. 肠道酶活性和营养物质表观消化率

DP和DL均显著影响肠道胰蛋白酶(TPS)、脂肪酶(LPS)和淀粉酶(AMS)活性。高蛋白组（42%和47%）的酶活性显著高于低蛋白组（37%）。DL的增加也提升了LPS活性，体现了酶活的底物依赖性。对于干物质和总能量的表观消化率(ADCs)，在47% DP和15% DL组达到最高。

3.4. 血清生化指标

血清T-CHO和TG浓度随DL增加而显著上升。血清甲状腺素(T4)含量随着DP和DL的增加而呈现上升趋势，在42?P/15?L、47?P/11?L和47?P/15?L组中显著高于低蛋白低脂组。

3.5. 肝脏生化指标和组织学检查

肝脏脂代谢相关酶活性受DP和DL显著影响。乙酰辅酶A羧化酶(ACC)和脂蛋白脂酶(LPL)活性在15% DL组最高，而肉碱棕榈酰转移酶-I(CPT-I)活性在高蛋白组更高。肝脏胰岛素样生长因子1(IGF-1)和生长激素受体(GHR)水平在高蛋白组（42%和47%）显著提升。组织学检查（H&E和油红O染色）清晰显示，随着日粮脂质水平从7%增至15%，肝细胞空泡化加剧，脂滴相对面积显著增加，表明肝脏脂质沉积加重。在抗氧化指标方面，交互作用显著影响超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性。42%蛋白组的总体抗氧化能力(T-AOC)最高，而15%脂质组的丙二醛(MDA)含量显著升高，表明过高脂质摄入会诱导氧化应激，损害肝脏健康。

3.6. 阶段40的变态

交互作用(DP × DL)显著影响蝌蚪在阶段40（以泄殖腔出现皮肤皱褶为特征）的变态率。42%和47%蛋白组（无论脂质水平）的变态率显著高于37%蛋白组。在11%和15%脂质水平之间，变态率无显著差异，表明11%的脂质水平已足以支持正常的变态进程。

本研究得出结论，日粮蛋白和脂质水平及其交互作用显著影响牛蛙蝌蚪的生长、饲料利用、健康状况和变态过程。虽然47?P/11?L日粮能支持良好的生长和变态，但42?P/11?L日粮在促进最佳增重、维持高存活率、保障肝脏抗氧化功能和支持高变态率方面表现出综合优势，同时避免了高脂（15%）带来的存活率下降和氧化损伤风险。因此，基于对存活率、生长和肝脏健康的全面评估，42?P/11?L被确定为牛蛙蝌蚪日粮中的最佳蛋白脂比。

该研究的重要意义在于首次系统地量化了蛋白与脂质在牛蛙蝌蚪日粮中的交互作用，明确了脂质对蛋白质的节约效应，为牛蛙蝌蚪阶段的人工配合饲料提供了精确的营养参数和关键配比指导。这不仅有助于提高牛蛙养殖的经济效益，减少饲料浪费和环境污染，也对其他两栖动物幼虫期的营养研究具有重要的借鉴意义。