芹菜素及其衍生物通过调控TLR4/MD-2信号轴抑制一氧化氮生成：体外与计算机模拟的协同探索

本研究通过体外实验与计算机模拟相结合，揭示了天然黄酮类化合物芹菜素（APG）及其衍生物（APG-7）通过靶向TLR4/MD-2复合物界面，显著抑制一氧化氮（NO）和超氧阴离子（O2•?）等活性氮/氧物种的生成。APG虽表现出更强的抗氧化活性（NO抑制率98%），但其细胞毒性较高（IC50=4.5 μg/mL），而APG-7安全性更优（IC50≈25 μg/mL）。该研究为开发靶向TLR4通路的天然抗炎药物提供了重要理论依据。

　　

Highlight部分

化合物的收集与样品制备（1 mg/mL储备溶液）

为探究其免疫调节特性，我们选择了芹菜素（APG）及其衍生物芹菜素-7-O-β-D-(6″-对香豆酰)-吡喃葡萄糖苷（APG-7）。APG购自美国BenchChem公司，而APG-7则来自卡拉奇大学Dr. Panjwani分子医学与药物研究中心的内部化合物库。APG-7的表征数据已在此前的研究中发表。通过将1 mg化合物溶于50 μL DMSO中并经超声处理确保完全溶解，我们制备了浓度为1 mg/mL的储备溶液。

化合物对超氧阴离子（O₂^•?）生成的影响

在小鼠巨噬细胞中，佛波酯（PMA）通过激活吞噬细胞NADPH氧化酶，启动蛋白激酶C（PKC）通路，进而诱导超氧阴离子的产生。在浓度为25 μg/mL的条件下，我们采用NBT法检测了化合物对超氧阴离子生成的抑制效果。结果显示，APG对超氧阴离子的抑制率高达48.2%，而APG-7的抑制效果相对较弱，仅为29.06%（见表1）。

化合物对次氯酸（HOCl）及一氧化氮（NO）生成的影响

（此部分内容原文未提供详细描述）

讨论

本研究深入探讨了芹菜素及其衍生物在吞噬过程中对自由基生成的调控作用。我们通过不同的免疫激活剂（PMA和LPS）刺激巨噬细胞，并在多个关键节点评估了化合物的效应，以确定其靶向的酶及抑制自由基产生的机制。例如，PMA通过激活PKC通路进而激活巨噬细胞中的NADPH氧化酶，最终导致超氧阴离子的产生。APG-7...

结论

通过对多种免疫学检测方法（包括细胞分光光度法、化学发光法和荧光显微镜技术）的综合分析，我们评估了天然化合物APG及其衍生物APG-7的治疗潜力。APG对超氧阴离子的生成表现出中等程度的抑制，而APG-7的抑制活性较弱。在针对髓过氧化物酶依赖性次氯酸阴离子生成途径的实验中，APG显示出中等抑制效果，而APG-7...

（注：原文中“Effects of compounds on HOCl production”及“Discussion”部分后续内容描述较为简略，因此翻译时对部分语句进行了整合与概括，以确保行文流畅且符合学术规范。）