意大利真实世界中食管癌、食管胃交界部癌及胃癌PD-L1病理评估工作流程的关键洞察与挑战分析

本研究针对PD-L1免疫组化(IHC)评估在食管癌、食管胃交界部癌及胃癌(GEC)真实临床实践中的异质性问题，通过对意大利28家病理中心的1936例病例进行多中心回顾性分析，揭示了PD-L1评分系统(CPS/TPS/TAP)与临床试验数据的一致性，同时发现机构间差异、组织块老化及抗体克隆(22C3/SP263)选择显著影响评估结果，为优化免疫检查点抑制剂(ICIs)患者筛选提供了关键质量改进依据。

　　

在当今肿瘤治疗领域，免疫检查点抑制剂（ICIs）的出现为晚期食管癌、食管胃交界部癌和胃癌（GEC）患者带来了新的希望。然而，这类药物的有效性高度依赖于生物标志物PD-L1的准确评估。临床实践中，PD-L1的免疫组化（IHC）检测并非在理想的标准化环境下进行，而是面临着诸多现实挑战：不同医疗机构使用的检测平台、抗体克隆、组织样本的预处理和储存条件千差万别，甚至负责评估的病理医生专业背景也不尽相同。这些因素是否会导致PD-L1评分结果的显著差异，进而影响患者的治疗决策和药物可及性？为了回答这个关乎临床实践质量的重要问题，一个由意大利胃肠道病理学家组（Italian Group of Gastrointestinal Pathologists）协调的“病理实验室生物标志物真实生活评估研究组（RELIABL Study Group）”开展了一项大规模的多中心回顾性研究，其成果发表在《ESMO Open》上。

为开展本研究，研究人员主要采用了多中心调查与回顾性数据分析相结合的技术方法。他们向意大利100家常规开展GEC的PD-L1检测的病理机构发放了标准化调查问卷，最终有28家中心参与，覆盖了全国范围。研究收集了2023年10月至2024年9月期间诊断的1936例GEC病例的完整病理学数据。核心技术方法包括：利用免疫组织化学（IHC）技术检测PD-L1蛋白表达；采用三种国际公认的评分系统进行量化评估，即联合阳性分数（CPS, Combined Positive Score）、肿瘤比例评分（TPS, Tumor Proportion Score）和新兴的肿瘤区域阳性评分（TAP, Tumor Area Positivity score）；并运用统计学方法深入分析了多种预分析变量（如机构检测量、使用的抗体克隆（22C3 vs SP263）、组织切片和蜡块的老化时间等）对最终评分结果的影响。

Introductory indices, demographic data, and preanalytical variables

通过对参与中心和病例基本特征的分析，研究描绘了意大利GEC PD-L1检测的现实图景。28家参与机构的中位年工作量达24,300例，绝大多数（96.3%）由生物医学科学家/技术人员完成IHC染色，但签署报告的病理医生通常仅一人（67.9%）。在1936例病例中，腺癌（ADCA）占绝大多数（1802例，93.1%），鳞状细胞癌（SCC）为131例（6.8%），这与西方人群的流行病学特征一致。56.3%的标本来自内镜活检，64.3%的原发肿瘤位于胃。预分析变量分析揭示，Ventana平台和SP263克隆是意大利最主流的检测组合（56.1%），但组织切片和蜡块的储存时间存在巨大差异，切片最长存放达359天，蜡块最长存放达84个月，这为后续分析埋下了伏笔。

PD-L1 assessment—adenocarcinoma cases

对腺癌（ADCA）的深入分析是本研究的核心。所有中心均报告了CPS评分，其阳性率（CPS ≥1）为76.1%，与临床试验数据（78%-85%）高度吻合。然而，不同机构间的结果异质性非常显著，CPS ≥1的阳性率波动于43.6%至100%之间。为探寻变异根源，研究人员进行了多变量分析，得出结论：PD-L1抗体克隆的选择和组织蜡块的老化是影响CPS评分的两个独立因素。具体而言，使用22C3克隆检测出的CPS值显著高于SP263克隆（OR 0.34）。更关键的是，随着组织蜡块储存时间的延长，PD-L1的评分会显著降低，尤其是在储存24-60个月的这个关键时间窗口内，其负面影响最为突出。此外，机构的PD-L1检测工作量也与评分相关，工作量较小的中心倾向于报告更高的阳性率。对于新兴的TAP评分，其阳性率（TAP ≥1%）为80.3%，但主要的影响因素与CPS不同，SP263克隆反而与更高的TAP值相关。

PD-L1 assessment—SCC cases

由于鳞状细胞癌（SCC）病例数相对较少（131例），其分析存在一定局限性。但初步数据显示，其PD-L1表达模式与ADCA存在明显差异。SCC的TPS阳性率（TPS ≥1%）高达72.2%，远高于ADCA的43.1%，这符合SCC肿瘤细胞本身更易表达PD-L1的生物学特性。与ADCA类似，克隆选择（22C3克隆关联更高CPS值）和组织块老化（4-8个月为关键窗口）同样是影响SCC的PD-L1评分的重要因素。

综上所述，这项意大利多中心真实世界研究首次全面评估了GEC中PD-L1检测的工作流程和病理学评估现状。其主要结论是，在宏观层面上，意大利临床实践中的PD-L1表达分布与关键临床试验的数据基本一致，证实了当前检测体系在患者初筛层面的总体有效性。然而，在微观层面，研究揭示了不容忽视的机构间异质性。这种变异主要源于预分析阶段的因素，特别是组织蜡块的长期储存（老化）和不同PD-L1抗体克隆（22C3与SP263）的检测性能差异。此外，机构的检测经验（工作量）也可能对评分产生影响。这些发现具有重要的临床意义和实践价值。它们强调了在常规病理工作中严格规范预分析流程、记录样本储存信息以及推进检测标准化和质量控制的极端重要性。确保PD-L1评估的可靠性和可重复性，是精准筛选免疫治疗获益人群、避免患者误治或丧失治疗机会的基石。随着 Claudin 18.2 靶向治疗和 FGFR 抑制剂等新疗法不断涌现，未来治疗策略将愈加复杂，对PD-L1等生物标志物检测准确性的要求也将愈发苛刻。本研究为此提供了宝贵的现实依据和改进方向。