环状RNA circMETTL9通过下调ILF3调控TBI后神经炎症的机制与治疗意义

本研究聚焦创伤性脑损伤（TBI）后神经炎症调控机制，发现circMETTL9通过直接结合ILF3蛋白并促其降解，激活p38 MAPK通路，进而促进星形胶质细胞释放CCL2、CCL3、CXCL1等趋化因子，加剧神经炎症和神经功能障碍。过表达ILF3可显著改善TBI后神经功能并减少神经元凋亡，表明ILF3是潜在的TBI治疗靶点。该研究为TBI后神经炎症的分子机制提供了新见解，发表于《Experimental Neurology》。

　　

创伤性脑损伤（Traumatic Brain Injury, TBI）是导致长期神经功能障碍和残疾的主要原因之一，其病理过程涉及复杂的分子和细胞反应。神经炎症作为TBI后继发损伤的核心环节，虽在清除损伤碎片和启动修复中具有一定作用，但过度或持续的炎症反应会加剧脑组织损伤，导致神经元死亡和功能丧失。尽管近年来对TBI机制的研究不断深入，调控神经炎症的关键分子及其作用通路仍不完全清楚，缺乏有效的治疗靶点。

在此背景下，环状RNA（circular RNA, circRNA）作为一类具有稳定环状结构的非编码RNA，近年被发现在多种疾病中发挥重要调控作用。本研究团队在先前研究中已鉴定出circMETTL9（circMETTL9）在TBA后神经炎症中的调节功能，并预测白细胞介素增强子结合因子3（interleukin enhancer binding factor 3, ILF3）可能是其相互作用蛋白。然而，ILF3在TBI后的具体功能、其与circMETTL9的调控关系以及所涉及的下游信号通路，仍有待阐明。

为此，研究人员在《Experimental Neurology》上发表了一项研究，系统探讨了circMETTL9–ILF3轴在TBI后神经炎症中的作用及机制。研究发现，在TBI后损伤脑皮层及星形胶质细胞中，ILF3的表达显著下降；而过表达ILF3能够改善神经功能评分、减少神经元凋亡，表明ILF3具有神经保护作用。机制上，circMETTL9直接结合ILF3并促使ILF3蛋白水平降低，进而激活p38 MAPK信号通路，促进星形胶质细胞中趋化因子CCL2、CCL3、CXCL1和CXCL3的表达，最终加剧神经炎症反应。

该研究不仅揭示了circMETTL9/ILF3/p38 MAPK通路在TBI后神经炎症中的关键作用，也为开发针对ILF3的干预策略提供了理论依据。

本研究综合运用了多项关键技术方法。包括：建立TBI小鼠模型以模拟临床损伤过程；使用星形胶质细胞培养体系进行体外机制验证；通过RNA免疫共沉淀（RIP）和RNA pull-down技术验证circMETTL9与ILF3的直接结合；采用蛋白质印迹（Western blot）和定量PCR（qPCR）检测蛋白与基因表达；通过免疫荧光染色观察细胞类型与蛋白定位；最后通过行为学测试评估神经功能恢复情况。

ILF3在TBI后表达下降且具有神经保护作用

研究首先检测了TBI后小鼠脑皮层中ILF3的表达变化，发现其在蛋白和mRNA水平均显著降低。体外实验进一步证实，在星形胶质细胞中ILF3表达也明显下调。通过构建ILF3过表达载体，研究人员在TBI模型中恢复ILF3表达，结果发现这不仅能改善神经功能缺损，还减少了皮层区域的神经元凋亡，表明ILF3对TBI诱导的神经损伤具有保护作用。

circMETTL9直接结合ILF3并促进其降解

为阐明ILF3下调的机制，研究团队验证了circMETTL9与ILF3的相互作用。RNA pull-down和RIP实验均证实，circMETTL9可直接与ILF3蛋白结合。进一步机制探索表明，circMETTL9通过促进ILF3蛋白的降解而非影响其转录水平，导致ILF3表达减少。这一发现揭示了circMETTL9在转录后水平调控ILF3蛋白稳定性的新机制。

ILF3下调通过激活p38 MAPK通路促进趋化因子表达

研究人员接下来探讨了ILF3下调的下游效应。结果表明，ILF3缺失可激活p38 MAPK信号通路，并显著上调星形胶质细胞中多种趋化因子（包括CCL2、CCL3、CXCL1和CXCL3）的表达。而抑制p38 MAPK活性则能够逆转这些效应，说明ILF3是通过调控p38 MAPK通路影响神经炎症因子释放。

circMETTL9/ILF3轴在TBI后神经炎症中的整体作用

最后，研究在体内外模型中同时干预circMETTL9和ILF3，结果一致显示：circMETTL9通过下调ILF3、激活p38 MAPK通路，促进趋化因子的释放，从而加剧神经炎症和神经功能障碍。阻断该通路则能有效减轻炎症反应并改善神经功能结局。

本研究系统阐释了circMETTL9–ILF3–p38 MAPK信号轴在TBI后神经炎症中的关键作用。circMETTL9通过直接结合ILF3并促其降解，激活p38 MAPK通路，进而诱导星形胶质细胞释放多种趋化因子，最终导致神经炎症加剧和神经功能缺损。这些发现不仅深化了对TBI后分子机制的理解，也凸显了ILF3作为一个潜在治疗靶点的重要性。研究为开发针对circRNA或蛋白互作的干预策略提供了新方向，对缓解TBI后继发损伤、改善患者神经功能预后具有重要的临床意义。