抗MDA5抗体阳性皮肌炎合并快速进展性间质性肺病的外周免疫单细胞图谱：抗病毒反应与免疫失调新机制

本研究针对高死亡率的抗MDA5抗体阳性皮肌炎（MDA5+ DM）合并快速进展性间质性肺病（RPILD）的发病机制尚不明确的问题，通过单细胞RNA测序技术揭示了患者外周免疫细胞的动态变化。研究发现RPILD患者存在显著的抗病毒反应特征（如IRF7、DDX60等干扰素刺激基因上调），同时抗原呈递、T/B细胞激活等免疫通路显著受损，MHC-II信号几乎耗竭。该研究为阐明MDA5+ DM的免疫病理机制提供了关键证据，并为开发靶向治疗策略提供了新方向。

　　

在自身免疫性疾病的研究版图中，抗MDA5抗体阳性皮肌炎（MDA5⁺ DM）始终笼罩着一层致命的阴影——高达40%的死亡率主要归因于其合并的快速进展性间质性肺病（RPILD）。尽管研究表明该病与病毒感染和I型干扰素（IFN）通路激活密切相关，但驱动疾病恶化的具体免疫机制仍不明朗。传统的免疫抑制疗法对RPILD患者效果有限，迫切需要通过新技术揭示其免疫微环境的动态变化，从而寻找更有效的治疗靶点。

为了深入解析RPILD的免疫病理机制，研究团队采用了单细胞RNA测序（scRNA-seq）技术，对4例MDA5⁺ DM合并RPILD患者、3例非RPILD的间质性肺病（ILD）患者及3例健康对照（HCs）的外周血单个核细胞（PBMCs）进行了高精度分析。通过差异表达分析、基因集富集分析（GSEA）、基因集变异分析（GSVA）以及细胞通讯网络解析等多维度计算方法，系统描绘了免疫细胞的组成、功能状态及细胞间相互作用的变化。

研究首先揭示了免疫细胞的分布重塑。与健康对照相比，RPILD患者中CD14⁺单核细胞比例显著上升，而自然杀伤（NK）细胞、CD4⁺ T细胞和CD8⁺ T细胞比例下降。尤其值得注意的是，一类双阴性T细胞（DNT细胞，CD3⁺CD4^-CD8^-）在RPILD组明显扩增，提示其可能与疾病进展相关。

天然免疫细胞的抗病毒特征与功能失调

固有免疫细胞在RPILD组表现出强烈的抗病毒反应特征。CD14⁺单核细胞、CD16⁺单核细胞中干扰素刺激基因（ISGs）如ISG15、IFIT3、IFI27、IFI44L等显著上调，且RIG-I通路关键基因（如IRF7、DDX60）激活明显。然而，这种抗病毒优势并未带来免疫保护，反而伴随多种功能缺陷：抗原呈递相关分子（MHC-I、MHC-II及CD74）表达下调，核糖体生物合成（如NCL、NPM1基因）和mRNA剪接（如HNRNPL、HNRNPA1）相关通路均受到抑制。这些发现提示病毒可能通过劫持宿主细胞的翻译和剪接机制实现免疫逃逸。

T细胞功能抑制与异常扩增

在适应性免疫方面，T细胞亚群呈现功能整体抑制状态。CD8⁺细胞毒性T细胞虽表现出最强的ISG上调特征，但其激活信号（如T细胞受体通路基因）显著减弱。DNT细胞中核糖体生成和mRNA剪接缺陷最为严重，且细胞激活相关基因表达最低。同时，CD4⁺初始T细胞中几乎检测不到MHC-II信号通路的配体-受体交互，说明CD4⁺ T细胞的启动机制严重受损。

B细胞与浆细胞的信号通路受损

B细胞和浆细胞在RPILD组中也显示类似变化：抗原呈递功能下降，B细胞受体信号通路（如CD79A、CD79B、SYK等基因）表达减弱，核糖体生物合成受限。值得注意的是，B细胞中抗病毒反应（IFI44、MX1等基因高表达）与功能抑制并存，提示细胞处于一种“激活但无能”的矛盾状态。

细胞通讯网络的整体瓦解

细胞间相互作用分析进一步揭示了RPILD免疫微环境的崩溃。MHC-I和MHC-II信号几乎完全消失，CD22-PTPRC、LCK-CD8等T细胞激活关键配对作用显著减弱。相反，EGF和NRG信号通路在DNT细胞和树突状细胞中特异性激活，提示病毒可能通过EGFR信号通路介导免疫细胞功能紊乱。

本研究通过高分辨率单细胞技术揭示了MDA5⁺ DM合并RPILD患者外周免疫系统的双重特征：一方面表现为RIG-I通路介导的强烈抗病毒反应，另一方面出现抗原呈递、T/B细胞激活、mRNA剪接及翻译 initiation等多重免疫功能受损。其中MHC-II信号的缺失、DNT细胞的异常扩增以及EGFR通路的激活可能是导致疾病快速进展的关键因素。这些发现不仅为解释RPILD的高死亡率提供了机制依据，也为未来针对IFN通路、MHC-II重建或DNT细胞调控的治疗策略提供了理论支持。该研究发表于《Arthritis Research & Therapy》，为自身免疫性疾病与病毒感染交互机制的研究树立了新的里程碑。