免疫佐剂流感疫苗在1型糖尿病儿童中的连续两季免疫原性研究：抗体应答与持久性分析

本推荐评述一项针对1型糖尿病（T1D）儿童的前瞻性研究，探讨三价免疫佐剂亚单位流感疫苗（含Polyoxidonium佐剂）连续两季接种的免疫原性。结果显示，该疫苗可显著提升抗体水平（符合CPMP标准），且对B型流感株的抗体持久性最强（OR=7.2），为T1D患儿流感预防策略提供重要临床依据。

　　

引言

全球范围内儿童和青少年1型糖尿病（T1D）的发病率和患病率近几十年来显著上升，已成为重大公共卫生问题。感染性病原体，尤其是流感病毒，在糖尿病发病和代谢失代偿中的作用日益凸显。糖尿病患者因流感或肺炎住院的频率显著高于非糖尿病人群（OR=5.08），且重症率和入住ICU风险更高。世界卫生组织（WHO）建议脆弱人群流感疫苗接种覆盖率至少达到75%。流感疫苗接种对糖尿病患者尤为重要，可降低急性糖尿病并发症住院风险11%，减少流感季死亡风险17%。然而，部分研究认为糖尿病患者接种疫苗效果不足，可能与胰岛素抵抗引发的免疫反应异常及先天性/适应性免疫缺陷有关。因此，探索更有效的流感疫苗接种策略具有重要临床意义。

材料与方法

研究人群描述

本研究为前瞻性非随机对照试验，连续两个流行季（2014-2015和2015-2016）纳入146名T1D儿童，年龄中位数12.0（9.0-14.0）岁。其中81名接种流感疫苗（主要组），65名未接种（对照组）。所有患者糖尿病诊断符合WHO标准（空腹血糖≥7.0 mmol/L或糖化血红蛋白HbA1c≥6.5%）。基线特征显示，疫苗接种组HbA1c水平较高（8.9% vs 7.9%, p=0.006），且69%有既往接种史。

干预措施

接种疫苗为三价免疫佐剂亚单位流感疫苗Grippol Plus（俄罗斯Petrovax Pharm生产），每剂含5μg各株血凝素（A/H1N1、A/H3N2、B）及500μg水溶性佐剂Polyoxidonium（溴化氮氧化聚合物）。疫苗株符合WHO当季北半球推荐：2014-2015季为A/California/7/2009pdm09-like (H1N1)、A/Texas/50/2012-like (H3N2)、B/Massachusetts/2/2012-like；2015-2016季调整为A/Bolivia/559/2013 (H1N1)、A/Switzerland/9713293/2013 (H3N2)、B/Phuket/3073/2013。

抗体检测与方法

采用血凝抑制试验（HI）测定抗体水平，血清经受体破坏酶（RDE）预处理。血清保护定义为HI滴度≥1:40，血清阴性为滴度<1:40。免疫原性评价依据欧洲药品管理局（CPMP/BWP/214/96）标准：①血清保护率（SPR）>70%；②血清转化率（SCR）>40%；③几何平均滴度增长倍数（GMFR）>2.5。样本采集时间点为接种前、接种后1个月和12个月。

统计方法

采用稳健线性混合效应模型（RLMEM）分析抗体动态变化，计算几何平均滴度（GMT）及其95%置信区间。分类变量比较使用χ2检验或Fisher精确检验，连续变量使用Mann-Whitney检验。多重比较采用Benjamini-Hochberg校正。

结果

A/H1N1株抗体应答

接种后1个月，疫苗接种组对所有毒株抗体均显著上升。A/H1N1株GMT从基线26.7升至122.7（p<0.001），GMFR为4.7倍。12个月后抗体虽有所下降（GMT=59.8），但仍高于基线（p<0.001）和对照组（p=0.04）。初始血清阴性者中，1个月后SPR达68%，GMFR为7.4倍；12个月后抗体持久性呈现季节依赖性（2015-2016季较低）。

A/H3N2株抗体应答

接种后1个月，GMT从28.7升至91.0（GMFR=3.2），SPR达89%。但12个月后抗体衰减明显，GMT降至44.0，与对照组无显著差异（p=0.89）。初始血清阴性者中，1个月后SPR为80%，但12个月后抗体水平与对照组相当（2015-2016季）。

B型株抗体应答

B株抗体表现出最强持久性。接种后1个月GMT从11.9升至66.7（GMFR=3.6），12个月后仍维持在33.6（p<0.001），且显著高于对照组（OR=7.2）。初始血清阴性者12个月后SPR仍达66%，GMFR为2.6倍。

CPMP标准符合性

疫苗在所有毒株均满足CPMP标准：SPR（A/H1N1:80%、A/H3N2:89%、B:77%）、SCR（57%、49%、46%）和GMFR（4.7、3.2、3.6）均超标。初始血清阴性者指标也全部达标。

讨论

本研究首次在T1D儿童中证实免疫佐剂流感疫苗可诱导符合国际标准的免疫应答。与既往研究不同，佐剂疫苗可能通过抑制抗原特异性调节性T细胞（Treg）增强应答，而非佐剂疫苗则可能激活Treg导致应答减弱。抗体持久性呈现毒株特异性：B株抗体可持续12个月且不受季节影响，A/H1N1株具季节依赖性，A/H3N2株衰减最快。这种差异与当季流行毒株匹配度及病毒循环强度相关：2014-2015季以B株和A/H3N2流行为主，2015-2016季则以A/H1N1pdm09为主导。值得注意的是，尽管2015-2016季A/H3N2实际流行率低，但疫苗株（A/Switzerland）与流行株不匹配可能导致抗体应答不佳。

结论

三价免疫佐剂亚单位流感疫苗在T1D儿童中可诱导符合CPMP标准的免疫应答，且不受既往接种史影响。B株抗体表现出最优持久性，佐剂策略为T1D患儿提供可持续免疫保护。