印度圈养滑獭（Lutrogale perspicillata）播散性结核病病例诊断与分子鉴定研究

《The Journal of Basic and Applied Zoology》：Miliary tuberculosis in a captive smooth-coated otter (Lutrogale perspicillata) in South Asia (India)

本研究报告一例亚洲滑獭（Lutrogale perspicillata）感染结核分枝杆菌复合群（MTC）导致的播散性结核病。研究人员通过尸体剖检、组织病理学、免疫组织化学（IHC）及聚合酶链反应（PCR）等多种技术，首次在印度地区圈养滑獭中确诊由牛分枝杆菌（Mycobacterium bovis）引起的全身性结核感染，凸显了动物园动物结核病监测在“一体健康”框架下的重要性。

　　

在野生动物保护与动物园管理中，结核病一直是一个潜伏的威胁。虽然结核分枝杆菌复合群（Mycobacterium tuberculosis complex, MTC）感染在牛群中较为常见，但在某些野生动物，尤其是像滑獭（Lutrogale perspicillata）这类淡水獭类中，却极为罕见。滑獭作为生活在南亚和东南亚的濒危物种，已被世界自然保护联盟（IUCN）列为“易危”级别，主要受到栖息地破坏、湿地污染和非法野生动物贸易的威胁。然而，除了这些外部威胁，疾病尤其是人兽共患病的传播，同样对圈养个体的生存构成挑战。以往的研究表明，结核病在獭类中的报道很少，且多由牛分枝杆菌（Mycobacterium bovis）或结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis）引起，但相关病例多集中在其他地区，南亚尤其是印度地区的记录几乎空白。因此，对圈养滑獭中结核病的系统诊断与病原鉴定，不仅有助于了解该病在野生动物中的流行病学，也为动物园的疾病防控提供了重要依据。

在此背景下，Geeta Devi Leishangthem等研究人员在《The Journal of Basic and Applied Zoology》上发表了一篇病例报告，详细描述了一例发生在印度动物园的滑獭播散性结核病。该研究通过多种诊断技术，首次在该物种中证实了由牛分枝杆菌引起的全身性感染，突出了在“一体健康”（One Health）框架下加强动物园动物结核病监测的必要性。

为明确诊断，研究人员运用了几项关键技术。首先，对一具10岁雄性滑獭尸体进行了系统剖检，记录大体病变；其次，取肺、淋巴结和肝脏组织制作印片和组织切片，进行改良抗酸染色（Ziehl-Neelsen staining）和组织病理学检查（H&E染色）；同时，采用免疫组织化学（IHC）方法以兔多克隆牛分枝杆菌抗体检测病原；最后，通过聚合酶链反应（PCR）扩增MTC特异的IS6110基因，测序确认病原归属。所有样本来源于动物园死亡个体，无需额外伦理审批。

Results

大体病变

剖检发现，獭体消瘦，肋骨明显，皮下脂肪减少。肺部表面散布大量大小不一（1~10毫米）的白色结核结节，肠系膜淋巴结也有类似增大、干酪样坏死灶。腹腔内有积液，肝脏右前叶腹侧可见局灶性黄色干酪样区域。

组织病理学与特殊染色

肺组织显示支气管周围和血管周围单核细胞浸润，伴充血，但未形成典型结核性肉芽肿；间质区有单核细胞浸润和轻度纤维蛋白沉积。肝脏表现为血管周围和实质内巨噬细胞等单核细胞浸润，并见坏死。改良抗酸染色在肺、肝和淋巴结印片及组织切片中均检出抗酸杆菌。

分子检测与免疫组化

从肺和淋巴结提取的DNA经IS6110 PCR扩增出245 bp条带，证实为MTC感染。免疫组化分析显示，肺组织中单核细胞和间质区域存在牛分枝杆菌抗原阳性信号。

结论与讨论

本病例通过大体观察、细胞学、组织病理、IHC和PCR等多种方法，确诊为牛分枝杆菌引起的播散性结核病。与以往报道的獭类结核病例相比，该滑獭的病变以播散性粟粒状结节为特征，而非典型肉芽肿，提示可能为急性血行播散。肺部为主要靶器官，表明呼吸道是初始感染途径。分子检测确认病原属MTC，且与印度当地牛群中流行的牛分枝杆菌亚型一致，提示感染可能来源于牲畜或共同野生动物宿主。尽管目前滑獭作为结核病传播源的作用尚不明确，但本例凸显了圈养野生动物结核病监测的缺口。在“一体健康”视角下，控制动物园动物结核病不仅关乎物种保护，也对公共卫生安全具有重要意义。因此，作者呼吁加强对滑獭等濒危动物的结核病系统监测，并提升动物园的疾病管理能力。

总之，这项研究为首例印度圈养滑獭结核病提供了详实的诊断证据，拓宽了对MTC宿主范围的认识，也为野生动物疾病防控提供了实践参考。