Kisspeptin-10通过诱导KISS1表达、抑制转移及促进凋亡在三阴性乳腺癌中展现多效性抗肿瘤作用

《Scientific Reports》：Exogenous kisspeptin-10 treatment shows pleiotropy via induction of KISS1 expression, metastasis suppression, and promotes apoptosis in triple-negative breast cancer

本研究针对缺乏有效靶向疗法的三阴性乳腺癌（TNBC），探讨了外源性Kisspeptin-10（Kp-10）的治疗潜力。研究人员通过体外和生物信息学分析发现，Kp-10能显著上调KISS1 mRNA表达、抑制细胞迁移、逆转上皮-间质转化（EMT）并激活CASP3、CASP8、CASP9、BAX等凋亡通路。代谢组学分析进一步揭示了其在凋亡、抗血管生成和氧化还原稳态方面的调节作用。该研究为TNBC提供了新的潜在治疗策略，具有重要意义。

　　

在乳腺癌的众多亚型中，三阴性乳腺癌（Triple-Negative Breast Cancer, TNBC）以其独特的"三阴性"特征——缺乏雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）和人表皮生长因子受体2（HER2）表达，成为临床治疗中最具挑战性的类型。这类患者无法从内分泌治疗或HER2靶向治疗中获益，只能依赖传统化疗，然而治疗效果往往不尽如人意，患者常面临早期复发、远处转移和生存期较短等问题。更令人担忧的是，TNBC在年轻女性和非洲裔女性中发病率较高，约占所有乳腺癌病例的15%-20%，其生物学侵袭性强，分子异质性高，涵盖了基底样、间质样、免疫调节型等多种内在亚型，每种都有不同的预后和治疗反应。

面对这一严峻挑战，科学家们将目光投向了肿瘤转移抑制机制。其中，由KISS1基因编码的kisspeptin蛋白引起了研究人员的极大兴趣。最初在黑色素瘤中被发现具有转移抑制功能，kisspeptin在生殖内分泌领域已有深入研究，但在癌症生物学中的作用却显得复杂而矛盾。特别是在TNBC中，KISS1表达与肿瘤侵袭性的关系尚不明确，这促使Hetvi Shah等人开展了一项创新性研究，系统探讨外源性Kisspeptin-10在TNBC治疗中的潜在价值。

研究人员采用整合生物学方法，结合体外实验和生物信息学分析，以MDA-MB-231和MDA-MB-468两种TNBC细胞系为模型，深入探索了Kisspeptin-10的抗肿瘤机制。他们发现，这种短肽分子能够通过多靶点、多通路的方式，有效调控TNBC的恶性表型，为开发新型TNBC治疗策略提供了重要理论依据。该研究成果发表在《Scientific Reports》期刊上，为TNBC治疗领域带来了新的希望。

在研究过程中，团队运用了MTT法检测细胞活力、划痕实验评估细胞迁移、qRT-PCR分析基因表达、Western blot验证蛋白水平变化、非靶向代谢组学分析代谢物变化，以及利用TCGA和GEO等公共数据库进行生物信息学验证等关键技术方法。

Kisspeptin-10调控转录网络、抑制增殖并在三阴性乳腺癌中显示预后相关性

研究人员首先确定了Kisspeptin-10在TNBC细胞中的半数抑制浓度（IC₅₀）为110.21 nM（MDA-MB-231）和88.35 nM（MDA-MB-468）。通过qPCR和Western blot分析发现，Kisspeptin-10处理能显著上调SP1、GATA2、CDX2等转录因子，同时下调ZEB1表达。更重要的是，KISS1及其受体KISS1R的mRNA水平也显著上调，表明存在正反馈调节机制。生物信息学分析进一步证实，这些转录因子在TNBC患者中具有预后价值，如GATA2高表达与较好生存率相关（HR=0.47）。

Kisspeptin-10调节MDA-MB-231细胞中应激、炎症和增殖相关信号及其在乳腺癌中的预后相关性

研究表明，Kisspeptin-10能剂量依赖性地下调CJUN表达，同时上调PKA、PKR（EIF2AK2）和PLCB1。这些信号分子的改变与细胞应激反应、炎症调节和增殖控制密切相关。生存分析显示，EIF2AK2高表达与较差预后相关（HR=1.13），提示其可能作为乳腺癌的预后生物标志物。

Kisspeptin-10减弱迁移、调节EMT和凋亡并影响TNBC中的预后标志物

划痕实验结果显示，Kisspeptin-10处理能显著抑制TNBC细胞的迁移能力，且呈剂量依赖性。在EMT标志物方面，Kisspeptin-10上调E-钙黏蛋白（E-cadherin），下调N-钙黏蛋白（N-cadherin）、CD44和波形蛋白（Vimentin），表明其能有效逆转上皮-间质转化（EMT）。同时，凋亡相关基因CASPASE 3、CASPASE 8、CASPASE 9和BAX表达上调，而BCL2表达下降，提示内外源性凋亡通路均被激活。

代谢组学分析揭示Kisspeptin-10介导的TNBC细胞代谢调节

非靶向代谢组学分析发现，Kisspeptin-10处理引起代谢物谱的显著改变。Gingerdiol/Norcapsaicin、Usambarensine等代谢物仅在处理组中出现，而DL-色氨酸（DL-Tryptophan）、尸胺（Cadaverine）等代谢物在所有组中均有表达但强度不同。通路富集分析显示，这些变化主要涉及血管生成、抗增殖、凋亡和氧化还原调节等通路。

三阴性乳腺癌的转录组景观揭示协调的基因失调和调控枢纽

通过对公共数据库GDS4069和GDS825的分析，研究人员鉴定了TNBC特异的基因表达特征。上调基因包括SPARC、GDF15等，与细胞外基质重塑和应激反应相关；下调基因如CDH1（E-cadherin）则表明上皮特性丧失。基因-调控网络分析发现SP1、ZEB1等转录因子处于调控网络的核心位置。

综合以上研究结果，可以得出明确结论：外源性Kisspeptin-10能够恢复KISS1表达，在TNBC细胞中发挥多方面的抗肿瘤作用。它不仅抑制细胞增殖和迁移，还能逆转EMT过程，激活凋亡通路，引起代谢重编程，最终使肿瘤细胞向侵袭性较低的表型转变。这些发现表明Kisspeptin-10具有重新激活TNBC中肿瘤抑制网络的潜力，虽然目前研究主要基于体外和生物信息学分析，但为开发针对这一难治性乳腺癌亚型的新疗法提供了有希望的方向。未来需要进一步开展体内实验和机制探索，以验证其临床应用的可行性，为TNBC患者带来新的治疗希望。