靶向缺氧微环境：异靛蓝-三唑-苯磺酰胺杂合分子作为hCA IX/XII与c-met双重抑制剂在结直肠癌化疗增敏中的突破性研究

本研究创新性设计并合成了11种异靛蓝-三唑-苯磺酰胺杂合分子，首次揭示其可通过双重抑制碳酸酐酶（CA IX/XII）和c-Met激酶，显著增强结直肠癌缺氧微环境下的化疗敏感性。先导化合物5d在低氧条件下对HCT-116细胞系展现超10倍增效作用（IC50=1.57 μM），兼具良好药代动力学特性，为克服肿瘤缺氧耐药提供了新型双靶点治疗策略。

　　

化学合成

如方案1和2所示，我们合成了关键中间体羧酸酰肼3及基于苯磺酰胺骨架的希夫碱新型1,2,3-三唑衍生物（化合物5a-f和7a-e）。已知化合物4-叠氮苯磺酰胺（1）首先经重氮化后，在0°C下与NaN₃反应获得[23,24]。随后使叠氮物1与乙酰乙酸乙酯在新鲜制备的乙醇钠作用下发生反应...

人碳酸酐酶（I、IX和XII）抑制实验

通过停流CO₂水合酶分析法[27-30]，评估了两个合成系列（未烷基化异靛蓝5a-f和N-烷基化异靛蓝7a-e）对肿瘤相关跨膜亚型hCA IX/XII及人胞质亚型hCA I的抑制活性，以乙酰唑胺（AAZ）为标准抑制剂。根据表1和图3显示的体外抑制常数（K_I），我们深入分析了构效关系...

c-Met酶活性抑制

c-Met在HCT-116细胞中过表达。将HCT-116细胞按指示接种于96孔板，每组设三个复孔。培养24小时后，将化合物5d加入96孔板中...

ADMET预测研究

候选药物需同时具备显著生化活性和优良的ADMET特性（吸收、分布、代谢、排泄和毒性）才能成为可行治疗剂。近年来多个在线工具和软件被开发用于预测抗癌药物的ADMET特征[38,39]。其中最广泛应用的是ADMETlab 3.0——一个全面更新且商业化的网络工具...

结论

我们发现了一系列新型异靛蓝-三唑-苯磺酰胺杂合分子，可作为结直肠癌中两个缺氧相关靶点（c-Met和CA IX/XII）的双重抑制剂。其中最突出的先导化合物5d展现出强效的双重酶抑制活性，并对结直肠癌细胞系（HCT-116、HT-29和SW-620）具有选择性细胞毒性，其在缺氧环境下的效力显著增强。5d的抗癌潜力进一步通过其诱导细胞凋亡和G₂/M期阻滞的机制研究获得支持...