基于仿生ABTS脂质体的囊泡限域氧化还原介导实现稳定电子传递与双模式H2O2检测
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时间:2025年10月09日
来源:Biosensors and Bioelectronics 10.7
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本文创新性地提出仿生脂质体限域策略,通过将ABTS封装于磷脂囊泡构建稳定电子传递平台,成功解决氧化还原介质(Redox Mediators)易扩散降解的难题。该技术实现2.53 nM级超灵敏电化学检测与可视化比色双模式输出,在活细胞内H2O2监测中展现卓越生物相容性,为POCT(Point-of-Care Testing)生物传感器提供革新性解决方案。
通过仿生囊泡限域策略实现稳定的电子中继与双模式过氧化氢检测
实验采用磷脂酰胆碱(PC, >99%)、胆固醇(Chol, ≥95%)、2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS, ≥98%)、辣根过氧化物酶(HRP, ≥250 U/mg)及戊二醛溶液(25% w/w)等核心试剂,所有材料均遵循细胞实验级标准。磷酸盐缓冲液(PBS, 0.1 M, pH 7.4)用于模拟生理环境,Hela细胞购自国家级细胞资源库。
为验证囊泡限域电子传递概念,我们构建了将ABTS封装于磷脂脂质体内的仿生传感平台,并与辣根过氧化物酶(HRP)协同工作。该设计巧妙耦合了纳米限域介体稳定化与双模式信号生成机制,逐步推进从材料制备、物理化学表征到功能验证的研究进程。脂质双分子层不仅作为扩散屏障,更为ABTS提供了水合微环境,使其在保持氧化还原活性的同时避免泄漏降解。实验表明,该平台可实现HRP-电极界面的高效电子穿梭,电化学循环伏安测试历经500次循环仍无信号衰减,30天后活性保留超70%。同步开发的比色输出模块可在微摩尔范围内提供直观视觉响应,凸显了电化学中继与一次性比色产物的协同优势。
本研究通过脂质体封装技术成功构建了ABTS限域体系,从根本上解决了介体泄漏与降解问题。囊泡限域微环境在维持介体活性的同时实现了HRP-电极界面的持续氧化还原循环,形成稳定耐用的传感架构。该平台兼具超灵敏电化学检测(检测限低至2.53 nM)与可视化比色双输出模式,在活细胞H2O2监测中验证了其生物相容性与可靠性,为氧化应激监测、床旁诊断及氧化还原耦合生物传感提供了创新性解决方案。
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