便携式磁珠邻近延伸检测平台MagPEA-POCT:实现样本进-结果出的超灵敏多重蛋白标志物检测
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时间:2025年10月09日
来源:Biosensors and Bioelectronics 10.7
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本刊推荐:该研究开发了集成磁珠富集与邻近延伸检测(MagPEA)技术的便携式平台MagPEA-POCT,突破传统ELISA灵敏度局限(提升2个数量级),实现IL-6(62.3 fg/mL)、IL-8(168.0 fg/mL)和IFN-γ(231.9 fg/mL)的超灵敏多重检测。该系统通过磁流体操控实现全自动样本前处理,90分钟内完成血清直接检测,为感染性疾病监测和免疫分析提供了革命性的床旁诊断(POCT)解决方案。
抗体偶联过程使用羧基功能化磁珠Dynabeads MyOne(货号#65011)。磺基琥珀酰亚胺基-4-(N-马来酰亚甲基)环己烷-1-羧酸酯(sulfo-SMCC,货号#22322)用于交联反应,蛋白浓度测定采用Thermo Fisher Scientific(美国马萨诸塞州)的Pierce BCA蛋白检测试剂盒(货号#23225)。Zeba脱盐柱(7 kDa截留分子量,0.5 mL,货号#89883)以及两种40 kDa截留分子量的脱盐柱(货号#87766和#87767)均购自同一供应商。
为实现完全集成化、多重化且高灵敏度的床旁蛋白检测,我们开发了基于MagPEA的紧凑型POCT平台,将样本处理、靶标富集、信号放大和结果读取整合为单一流程(图1)。整个过程设计为最小化人工干预,兼容微量血清样本,特别适合偏远或资源有限地区。
本研究开发的MagPEA-POCT便携式多重蛋白检测平台,将磁珠富集与邻近延伸检测(PEA)及芯片实时qPCR检测相结合。该系统通过完整的"样本进-结果出"集成体系,实现血清样本中IL-6、IL-8和IFN-γ蛋白标志物的同步检测,专为感染性疾病床旁检测和免疫监测设计。使用便携分析仪时,检测限达到IL-6:62.3 fg/mL、IL-8:168.0 fg/mL和IFN-γ:231.9 fg/mL,较传统ELISA提升两个数量级,且具备多重检测能力。平台采用模块化设计,可适配不同生物标志物组合,为免疫分析、感染监测和急诊诊断提供强大量化工具。该技术通过自动化样本制备与高灵敏度分析的整合,显著推动了可及性床旁诊断的发展。
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