近红外荧光与淋巴显像技术在犬猫前哨淋巴结定位中的头对头比较：一项提升肿瘤精准分期的临床研究

为解决犬猫实体恶性肿瘤前哨淋巴结(SLN)精准定位难题，研究人员开展淋巴显像(LPS)与吲哚菁绿近红外荧光(NIRF-ICG)技术的术中对比研究。结果表明：两种技术对前哨淋巴中心(SLC)的检出率相当(92% vs 93%)，但荧光技术能检出更多SLN(P=0.025)，且43.5%转移淋巴结仅通过荧光发现。该研究为缺乏核医学设施的动物医院提供了可靠的替代方案，对提升小动物肿瘤精准分期具有重要意义。

　　

在犬猫肿瘤学领域，精准的肿瘤分期是制定治疗方案和判断预后的关键。而前哨淋巴结(Sentinel Lymph Node, SLN)作为肿瘤淋巴转移的第一站，其状态直接影响临床分期准确性。目前人类医学中淋巴显像(Lymphoscintigraphy, LPS)被视为SLN检测的金标准，但该技术面临放射性暴露、特殊设施要求和法规限制等难题。在兽医领域，这些限制更为突出——仅有少数机构具备LPS检测条件，这导致大量患癌犬猫无法获得精准的淋巴分期。

更令人困扰的是，即使采用LPS技术，也无法保证100%的SLN检出率。近年来，近红外荧光成像(Near-Infrared Fluorescence, NIRF)与吲哚菁绿(Indocyanine Green, ICG)的搭配使用为这一领域带来了新希望。这种技术无需放射性物质，操作简便，但其在动物临床应用中的效能究竟如何？与LPS技术相比孰优孰劣？两种技术是互补还是替代关系？这些问题的答案对于资源有限的动物医院具有重大实践意义。

为解决这些疑问，米兰大学的研究团队开展了这项开创性的研究，成果发表在《BMC Veterinary Research》。研究人员创新性地在同一患者身上同时应用两种技术，直接比较LPS和NIRF-ICG在SLN定位和切除中的表现，为临床医生提供了基于证据的技术选择依据。

研究采用了多技术融合的方法路径：对54只动物（50只犬、4只猫）的60个肿瘤/疤痕进行了前瞻性研究。技术核心包括：(1)术前淋巴显像使用锝-99m(^99mTc)标记的纳米白蛋白进行平面成像；(2)术中配合手持式γ探头(Handheld Intraoperative Gamma Probe, HIGP)检测放射性信号；(3)吲哚菁绿近红外荧光成像使用SPY-Elite成像系统；(4)所有切除淋巴结均进行组织病理学检查确认转移状态。样本来源为米兰大学兽医教学医院2022年11月至2023年12月收治的自发性肿瘤病例。

结果

SLC定位阶段的技朮比较

研究人员共探索了80个前哨淋巴中心(Sentinel Lymphocentrum, SLC)，切除113个SLN。在映射阶段，NIRF-ICG的SLC检出率为93%，与LPS的92%相当(P=0.754)。两种技术共同使用时，对每个肿瘤都能检测到至少一个SLC和SLN。

特别值得注意的是，在5例出现"肿瘤透射效应"（即肿瘤与SLC位置过近导致信号重叠）的病例中，两种技术都观察到了这一现象。NIRF-ICG的优势在于能够实时显示淋巴管路径，在62%的病例中可直接经皮观察到淋巴网络和SLC，但在深层SLC（如髂内侧淋巴结）的检测上存在局限。

术中SLN检测的技术表现

在手术探索阶段，NIRF-ICG检出的荧光SLN数量显著多于放射性SLN（百分比比=1.09，P=0.025）。在113个切除的SLN中，96个(85%)同时具有荧光和放射性；13个(11.5%)仅有荧光；4个(3.5%)仅有放射性。

更重要的是，在42个转移性SLN中，两种技术显示了相当的检测能力：LPS识别出38个转移节点(90.5%)，NIRF-ICG识别出39个(92.9%)，其中有3个转移节点仅通过NIRF-ICG识别，4个仅通过LPS识别。

术后手术野检查的精确性

研究团队在切除每个SLN后都会检查手术野是否有残留节点。在26个发现残留SLN的手术野中，18个(69.2%)被两种技术同时识别，5个(19.2%)仅被NIRF-ICG识别，3个(11.6%)仅被HIGP识别。两种技术在残留节点检测方面无显著差异(P=0.733)。

外科医生的主观评价

一个有趣的发现是，外科医生在46.5%的病例中认为HIGP更有帮助，24.2%认为NIRF-ICG更有帮助，29.3%认为两者价值相当。这种偏好与SLC的解剖位置密切相关：NIRF-ICG在头颈部SLN切除中更受青睐，而HIGP在腋窝区域表现更佳。

技术局限性与应对策略

研究发现ICG泄漏发生在24.2%的手术中，这可能会造成手术野污染，影响荧光成像的解读。在这种情况下，HIGP通常能提供更可靠的指导。此外，动物的体重和体况评分(BCS)对NIRF-ICG的效果没有显著影响，这一点与人类医学中肥胖对荧光成像的干扰形成鲜明对比。

讨论与结论

这项研究首次在兽医领域提供了LPS和NIRF-ICG技术的直接比较数据，证实了NIRF-ICG作为LPS替代方案的可行性。研究结果表明，虽然两种技术原理不同，但在SLC定位和SLN检测方面表现相当。NIRF-ICG的主要优势在于能够识别更多的SLN，这可能有助于发现更多潜在转移节点，但并不会导致过度分期。

从临床实践角度，研究提供了重要的技术选择指导：在头颈部肿瘤的SLN活检中，NIRF-ICG可能更具优势；而在腋窝区域，HIGP可能更适用。这种解剖位置特异性的性能差异为外科医生根据肿瘤位置选择适当技术提供了依据。

研究的另一重要发现是NIRF-ICG不受动物体重和体况影响，这与人类医学中的经验不同，表明该技术可能特别适合兽医应用。然而，ICG泄漏问题也需要关注，特别是在淋巴管脆弱的病例中。

这项研究的临床意义在于：为无法开展LPS的动物医院提供了可靠的替代方案；证实两种技术联合使用可实现100%的SLC和SLN检出率；为不同解剖位置的肿瘤提供了技术选择参考。研究人员强调，虽然联合使用两种技术效果最佳，但对于资源有限的机构，单独使用NIRF-ICG也能获得令人满意的结果。

未来研究可进一步探索NIRF-ICG在体腔内部淋巴结（如胸腔内淋巴结）的应用，以及在不同类型肿瘤中的表现差异。同时，开发更先进的荧光成像设备和ICG制剂也有助于解决当前存在的技术限制。

总之，这项由Elisa Maria Gariboldi和Alessandra Ubiali共同主导的研究为小动物肿瘤外科提供了重要的技术选择证据，推动了精准肿瘤学在兽医领域的发展，最终将有助于提高患癌犬猫的诊疗水平和生存质量。