DGKα抑制剂Ritanserin增强Chiauranib对转化性滤泡淋巴瘤的抗肿瘤效应及其机制研究

本研究针对转化性滤泡淋巴瘤（t-FL）缺乏标准有效治疗的临床难题，通过开展DGKα抑制剂Ritanserin与多靶点激酶抑制剂Chiauranib的联合治疗研究，发现该方案能协同诱导细胞凋亡并抑制肿瘤生长。其机制涉及双重阻断PI3K/AKT/mTOR和RAF/MEK/ERK信号通路，并下调c-Myc、BCL-xL和MCL-1表达，为t-FL治疗提供了新的策略选择。

　　

在血液系统恶性肿瘤中，转化性滤泡淋巴瘤（transformed follicular lymphoma, t-FL）是一种具有高度异质性的侵袭性B细胞肿瘤，其临床预后极差且缺乏标准治疗方案。尽管滤泡淋巴瘤（FL）本身病程相对缓慢，但每年约有2-3%的病例会转化为更具侵袭性的t-FL，伴随染色体异常、反复突变和微环境参与等复杂病理生理改变。当前治疗手段包括传统化疗和Bruton酪氨酸激酶（BTK）抑制剂等，但效果有限且耐受性不佳，亟需开发新型治疗策略。

Chiauranib是一种新型口服多靶点激酶抑制剂，可抑制血管内皮生长因子受体（VEGFRs）、极光激酶B（Aurora B）、血小板衍生生长因子受体（PDGFR）和集落刺激因子-1受体（CSF-1R）。然而，第一代抗血管生成药物如舒尼替尼和索拉非尼因靶点过于广泛导致严重脱靶毒性，因此联合用药已成为提高疗效和安全性的重要方向。另一方面，二酰甘油激酶α（diacylglycerol kinase alpha, DGKα）作为脂质激酶家族成员，通过将二酰甘油（DAG）转化为磷脂酸（PA）参与多种肿瘤信号调控，其抑制剂Ritanserin在黑色素瘤和急性髓系白血病（AML）中已显示抗肿瘤潜力。

为探索联合治疗策略，厦门大学研究团队在《Annals of Hematology》发表了最新研究成果，系统评估了Ritanserin与Chiauranib联合应用在t-FL中的抗肿瘤效果及作用机制。研究采用细胞活力检测（CCK-8）、EdU增殖染色、流式细胞术凋亡分析、RNA测序（RNA-seq）、Western blotting和异种移植模型等关键技术方法，并使用了10例原发性B细胞淋巴瘤患者样本进行验证。

协同 cytotoxicity 效应

通过CCK-8实验发现，Chiauranib和Ritanserin单药处理可剂量依赖性地抑制t-FL细胞系（DOHH2、SU-DHL-4、Karpas422）活力，而联合处理显著增强增殖抑制效果。EdU染色进一步证实联合治疗能显著降低增殖细胞比例（图1）。

协同诱导细胞凋亡

Annexin V/PI染色显示联合处理显著提升凋亡细胞比例，联合指数（CI）分析证实协同效应（CI<1）。Western blotting检测发现联合组cleaved caspase-3和cleaved PARP表达上调，而抗凋亡蛋白MCL-1和BCL-xL下调（图2）。

体内抗肿瘤效果

在DOHH2细胞异种移植模型中，联合治疗组肿瘤体积和重量显著减小，小鼠生存率提高，且未出现明显毒性反应（图3）。组织学分析显示肿瘤组织核固缩增加，增殖标志物PCNA下调而凋亡标志物cleaved caspase-3上调（图4）。

分子机制深度解析

RNA-seq分析发现联合处理显著改变153个差异表达基因（DEGs），富集分析显示MYC、mTOR和氧化磷酸化通路被抑制，而TNFα和炎症反应通路激活（图5）。Western blotting证实联合治疗协同抑制DGKα、VEGFR2、CSF-1R和Aurora B蛋白表达，并双重阻断PI3K/AKT/mTOR和RAF/MEK/ERK信号通路关键磷酸化蛋白（p-AKT、p-ERK、p-RAF1），同时下调c-Myc表达（图6-7）。

原发性样本验证

在10例原发性B细胞淋巴瘤样本中，联合处理显著诱导细胞凋亡，并下调DGKα、p-AKT、p-ERK和c-Myc蛋白水平（图8），进一步证实联合方案的临床转化潜力。

本研究首次揭示Ritanserin通过抑制DGKα增强Chiauranib对t-FL的疗效，其核心机制在于双重阻断PI3K/AKT/mTOR和RAF/MEK/ERK信号通路，并靶向调控c-Myc、BCL-xL和MCL-1等耐药相关因子。该联合策略不仅克服了单药治疗的局限性，还为t-FL提供了具有临床转化潜力的新型治疗方案。值得注意的是，Ritanserin单药可上调Chiauranib靶蛋白表达，从而增强其抗肿瘤效应，这一发现为联合用药的时序安排提供了理论依据。未来研究需进一步探索该方案在更多淋巴瘤亚型及临床试验中的适用性。