SUMO化抑制剂TAK-981联合多柔比星通过I型干扰素依赖性NK细胞激活增强三阴性乳腺癌免疫杀伤并减轻心脏毒性

本研究针对三阴性乳腺癌(TNBC)治疗中化疗耐药与免疫抑制的难题，探索了SUMO化抑制剂TAK-981与化疗药物多柔比星(DOX)的协同治疗机制。研究发现TAK-981通过激活I型干扰素(IFN-I)通路增强自然杀伤(NK)细胞毒性，并显著缓解DOX所致心肌损伤，为TNBC的 chemoimmunotherapy 提供了创新性双效策略。

　　

三阴性乳腺癌作为乳腺癌中最具侵袭性的亚型，因其缺乏雌激素受体、孕激素受体和人表皮生长因子受体2的表达，导致内分泌治疗和靶向治疗效果有限。化疗仍是其主要治疗手段，但多柔比星等化疗药物在临床应用中存在两大瓶颈：一是易产生耐药性且免疫调控机制不明确，二是伴随严重的心脏毒性反应，显著影响患者生存质量。免疫疗法的兴起为TNBC治疗带来了新希望，特别是具有免疫原性特征的TNBC亚型可能对免疫激活策略更敏感。然而，单药免疫治疗效果有限，如何将化疗药物的细胞毒性与免疫调节作用有机结合，同时规避其器官毒性，成为当前研究的焦点。

TAK-981作为一种新型SUMO化酶级联反应的选择性小分子抑制剂，通过上调I型干扰素通路激活天然免疫和适应性免疫细胞，但目前尚无其在乳腺癌治疗中的相关研究。本研究通过临床前模型揭示了TAK-981与多柔比星联合治疗的协同机制，发现了NK细胞激活和心脏保护的双重获益，为靶向治疗策略提供了新见解。

研究采用的主要技术方法包括：1) 使用TCGA和KM plotter数据库进行生物信息学分析；2) 通过体外细胞培养模型（MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞系）进行药物协同实验；3) 利用人外周血单核细胞(PBMC)分离和NK细胞体外扩增技术；4) 采用Western blot、qPCR、流式细胞术等分子生物学方法检测信号通路激活状态；5) 建立BALB/c-nu小鼠移植瘤模型进行体内药效评价；6) 通过心脏超声、组织切片染色和多组学分析（蛋白质组学与代谢组学）评估心脏毒性。

研究结果方面：

TNBC displays an antitumorigenic environment

通过免疫组化分析发现，TNBC肿瘤组织中CD56⁺ NK细胞浸润显著高于激素受体阳性(HR⁺)和HER2阳性乳腺癌，但NK细胞功能增强仍是亟待解决的关键问题。

TAK-981-mediated potentiation of NK cells display potent TNBC slaying

TAK-981处理显著增强PBMC活性和NK细胞毒性，表现为CD107a和颗粒酶B表达上调，IFN-γ分泌增加。体外杀伤实验显示TAK-981显著降低MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞的克隆形成能力，且该作用依赖于IFN-I通路激活。

The synergistic immunological effect of TAK-981 combined with DOX on TNBC

比较多柔比星、紫杉醇和顺铂的免疫激活效果，发现DOX在IC₅₀浓度下最能刺激IFNβ表达。通过三种不同给药方案验证，发现方案1（NK细胞先用TAK-981预处理，再与DOX处理的TNBC细胞共培养）协同效果最佳（ZIP评分：MDA-MB-231为24.112；MDA-MB-468为36.9）。联合治疗显著诱导肿瘤细胞凋亡并抑制增殖。

Modulation of the NKG2D-NKG2D ligand axis by a combination drug regimen

机制研究发现TAK-981下调SUMO1荧光强度，同时上调NK细胞表面激活受体NKG2D表达，但不影响抑制性受体NKG2A。通过数据库分析发现ULBP1和ULBP2低表达与TNBC患者更好生存相关。联合处理显著下调肿瘤细胞ULBP1和ULBP2表达，尤其是ULBP2的下调最为明显。

The combination of TAK-981 and DOX stimulates NK activation through the IFN I/JAK1/STAT1/NF-κB pathway

Western blot分析表明联合治疗上调IFNAR表达，增强JAK1和STAT1磷酸化，影响下游NF-κB炎症通路。使用抗IFNAR1抗体阻断后，联合治疗的协同效应被消除，证实该过程依赖IFNAR1信号完整性。体内实验显示联合治疗显著抑制肿瘤生长，增加NK细胞浸润，且该效应可被IFNAR1阻断剂逆转。

TAK-981 ameliorates DOX-induced cardiotoxicity through protein digestion and absorption

心脏组织学分析显示TAK-981缓解DOX所致心肌细胞损伤和纤维化。心脏超声表明联合治疗组左心室射血分数(LVEF)得到改善。多组学联合分析发现Col1a2（胶原蛋白II型α2链）是蛋白消化吸收通路中的关键介质，TAK-981可能通过调控Col1a2表达减轻DOX心脏毒性。

研究结论与讨论部分指出，TAK-981通过双重免疫调节作用增强NK细胞毒性并上调其表面激活受体NKG2D表达。与DOX联用可放大IFN-I信号通路，激活IFN-I/JAK1/STAT1信号轴，产生强大免疫细胞毒效应。该策略不仅体内抑制肿瘤生长，同时减轻DOX所致心肌损伤，解决了传统化疗的关键局限性。蛋白质组和代谢组分析揭示TAK-981可能通过调控Col1a2介导的蛋白消化吸收通路缓解心脏毒性，为联合治疗提供了理论依据。

本研究也存在一定局限性：由于NK细胞获取和技术挑战，在MDA-MB-468模型中的验证不够充分；体内实验采用免疫缺陷的BALB/c-nu小鼠，无法评估T细胞免疫的贡献；未来需要在免疫健全模型和更多细胞系中验证治疗的普适性。

总之，该研究建立了TNBC治疗的新范式，强调了TAK-981与化疗联用实现抗肿瘤免疫和器官保护双重获益的转化潜力，可能重新定义临床管理侵袭性TNBC的策略并降低治疗相关并发症风险。论文发表于《Cellular Oncology》期刊，为改善TNBC治疗疗效和安全性提供了新方向。