脓毒症通过诱导CD4+T细胞耗竭抑制实验性1型糖尿病的发生发展

本综述揭示了脓毒症（Sepsis）诱导的免疫麻痹状态对1型糖尿病（T1D）发病的抑制作用。通过盲肠结扎穿孔术（CLP）建立脓毒症模型，研究发现脓毒症恢复期小鼠在多重低剂量链脲佐菌素（MLDS）诱导下，胰腺淋巴结中CD4+T细胞数量显著减少且呈现耗竭表型（PD-1+/CTLA-4+），同时调节性T细胞（Treg）功能增强，最终抑制胰岛自身免疫攻击。该发现为通过免疫重编程治疗自身免疫疾病提供了新思路。

　　

引言：脓毒症与自身免疫疾病虽同属免疫失调疾病，但其相互影响机制尚未明确。本研究通过盲肠结扎穿孔术（CLP）诱导小鼠脓毒症模型，探讨其对多重低剂量链脲佐菌素（MLDS）诱导的1型糖尿病（T1D）发展的影响。T1D以胰腺β细胞自身免疫破坏为特征，而脓毒症引发的免疫麻痹可能通过改变T细胞功能状态调控自身免疫进程。

材料与方法：研究采用8-12周龄C57BL/6雄性小鼠，通过CLP手术建立多微生物脓毒症模型，术后12天（急性期恢复后）采用MLDS方案（连续5天腹腔注射38mg/kg链脲佐菌素）诱导T1D。通过血糖监测、葡萄糖耐量试验、组织病理学分析（H&E及胰岛素/胰高血糖素免疫组化染色）及流式细胞术（检测胰腺淋巴结和脾脏中T细胞亚群、细胞因子及耗竭标记物）等多维度评估脓毒症对T1D的调控作用。

结果：

CLP对血糖调节的瞬时影响：CLP术后早期出现低血糖（第1-3天），伴随血清IL-6和TNF水平显著升高，胰腺组织可见急性炎症和腺泡坏死。至第12天恢复期，血糖水平、细胞因子浓度及胰腺组织结构均恢复正常，葡萄糖耐量试验显示CLP组与假手术组（SHM）无差异。

脓毒症预防T1D发生：MLDS处理后，SHM+STZ组在第14天出现持续高血糖，胰岛结构破坏伴大量炎性浸润（评级2级胰岛炎），胰岛素阳性细胞减少而胰高血糖素阳性细胞增加。相反，CLP+STZ组全程保持正常血糖，胰岛结构完整（评级0-1级），胰岛素阳性细胞比例显著高于对照组。

胰腺淋巴结T细胞表型重塑：CLP+STZ组胰腺淋巴结中CD4⁺T细胞总数及CD62L⁺ na?ve亚群显著减少，但CD25⁺活化细胞及Ki67⁺增殖细胞无变化。细胞因子谱分析显示IL-17⁺和IL-10⁺CD4⁺T细胞增加，TNF⁺细胞减少。CD8⁺T细胞中IFN-γ⁺和IL-17⁺亚群增多，提示脓毒症改变了T细胞功能极化方向。

抗原呈递细胞的有限影响：CLP仅轻微增加CD11b⁺、CD11c⁺CD11b^-及F4/80⁺细胞数量，但对MHCII⁺、CD40⁺等关键抗原呈递功能标记无显著影响，表明脓毒症对APC功能的调控并非主要机制。

脾脏T细胞的系统性耗竭特征：CLP+STZ组脾脏CD4⁺T细胞中PD-1⁺、CTLA-4⁺及KLRG1⁺耗竭表型细胞显著增加。调节性T细胞（Treg）虽总数不变，但PD-1⁺和CTLA-4⁺Treg亚群扩增，提示其抑制功能增强。相关性分析显示CLP破坏了胰腺淋巴结与脾脏间Treg数量的生理协调性。

讨论：本研究首次证实脓毒症可通过诱导CD4⁺T细胞耗竭（高表达PD-1/CTLA-4）和Treg功能活化，抑制胰腺淋巴结中自身免疫反应的启动。尤其值得注意的是，Th17细胞在脓毒症背景下可能转化为保护性表型（如通过IL-10分泌），而非传统促炎作用。虽然CD8⁺T细胞中IFN-γ⁺亚群增加，但可能通过负反馈机制抑制自身免疫扩增。该发现为利用免疫耗竭机制治疗自身免疫疾病提供了实验依据，但需进一步在自发型T1D模型（如NOD小鼠）中验证其普适性。