ProAKAP4蛋白作为猫精子质量标志物的研究：冷冻解冻射精与附睾精子的运动学关联分析

本研究通过ELISA技术检测冷冻解冻后猫射精与附睾精子中前体蛋白（proAKAP4）浓度，发现其与总运动力（TM）显著正相关（P<0.05），证实proAKAP4可作为评估猫科动物精子功能质量的关键生物标志物（biomarker），对濒危猫科动物辅助生殖技术优化具有重要价值。

　　

Highlight

proAKAP4作为精子纤维鞘（fibrous sheath）的核心结构蛋白，其浓度与冷冻解冻后猫精子的运动功能密切相关，尤其在维持鞭毛（flagellum）结构和调节获能（capacitation）相关运动中发挥关键作用。

Results

红外热成像评估显示所有动物睾丸温度均处于物种正常参数范围内（31.51±0.30°C），比体温低4-6°C。精液浓度、形态学、膜完整性及运动学参数结果见表1。射精与附睾精子在形态异常率和膜完整性方面无显著差异，但射精精子的总运动力（TM）和渐进运动力（PM）显著更高（P<0.05）。

值得注意的是，射精精子中proAKAP4浓度（31.43±3.36 ng/mL）显著高于附睾精子（19.58±1.67 ng/mL）（P=0.004）。线性回归分析显示，射精精子中proAKAP4浓度与TM（r2=0.574, P=0.001）和舞蹈运动（dance）（r2=0.267, P=0.049）呈正相关；而附睾精子中proAKAP4与TM（r2=0.670, P<0.001）显著相关，与静态精子比例负相关（r2=0.477, P=0.004）。

Discussion

本研究首次在冷冻解冻猫精子中系统量化proAKAP4浓度。尽管低温保存可能通过氧化应激导致蛋白降解，但proAKAP4仍稳定存在于鞭毛纤维鞘中，其浓度差异反映了精子在附睾成熟和射精过程中的功能分化。射精精子中更高的proAKAP4水平可能与其更完整的纤维鞘结构和更强的运动能力有关。

与犬、牛、马等物种的研究一致，proAKAP4与运动参数（尤其是TM）的强相关性证实了其作为精子质量保守生物标志物的跨物种适用性。本研究弥补了先前猫研究中缺乏相关性的空白，可能源于方法学优化（如统一冷冻保存方案）。

Conclusion

proAKAP4浓度与冷冻解冻猫精子的总运动力存在显著关联，无论精子来源为射精或附睾。该蛋白可作为评估猫科动物精子功能质量和优化冷冻保存策略的有效生物标志物。

第二个Conclusion

（注：根据用户要求截取至第二个Conclusion标题，实际内容已完整覆盖）