基于聚集诱导发光纳米颗粒的侧流免疫层析技术用于转基因作物中CP4-EPSPS蛋白的灵敏检测

本文推荐一种新型侧流免疫层析（LFIA）方法，通过聚集诱导发光纳米颗粒（AIENPs）实现信号放大，可在10分钟内完成转基因作物中CP4-EPSPS蛋白的定性/定量检测。该方法对大豆RRS和玉米NK603的检测限分别达0.005%和0.05%，较传统方法灵敏度显著提升，且具备现场快速检测潜力，为农产品生物安全监管提供创新技术支撑。

　　

亮点

本研究开发了基于聚集诱导发光纳米颗粒（AIENPs）的侧流免疫层析（LFIA）平台，用于检测转基因作物中的CP4-EPSPS蛋白。AIENPs作为荧光探针可实现信号放大，检测结果在紫外光下肉眼可见，定量分析通过ImageJ软件完成。该方法对大豆RRS和玉米NK603的视觉检测限（vLOD）分别为0.005%和0.05%，定量限（LOQ）达0.0015%和0.023%，灵敏度优于现有多数技术。实际样本验证表明该方法稳健可靠，适用于食品和农产品中其他转基因作物的快速筛查。

讨论与结论

为验证AIE-LFIA对其他作物的适用性，本研究进一步检测了转基因甜菜H7-1和油菜GT73，其vLOD均为0.05%（图S1），与玉米NK603结果一致。大豆RRS的灵敏度高于其他作物，可能因其本身蛋白质含量较高，导致CP4-EPSPS蛋白表达量更高。该方法通过优化样本垫和结合垫处理缓冲液配方，有效消除假阳性，提升特异性；AIENPs的引入显著提高检测灵敏度，且适用于10分钟内完成实际样本的快速检测。AIE-LFIA具备操作简便、快速、高灵敏和特异性强等优势，为转基因作物高性能检测提供了新技术路径，也为AIENPs作为荧光探针检测其他靶标奠定了理论基础。

作者贡献声明

曾海娟： 文稿审阅与原创撰写、项目管理、方法论构建、概念设计；朱乐梅： 验证与形式分析；王金斌： 可视化、监督指导、项目管理与形式分析；张艳： 原创撰写、资源整合、数据整理；刘华： 验证与形式分析；李友： 资源与调研；刘娟： 资源与形式分析。

利益冲突声明

作者声明本研究无任何利益冲突。所有作者均已阅读并同意提交文稿。

致谢

本研究受上海市启明星计划（编号23QB1403500）、上海市农科院人才项目（2023-2025）及农科院优秀团队计划（编号2022（B-16））资助。