基于尿液流式细胞术的BCG免疫治疗膀胱癌复发预测：血液学参数与尿路免疫细胞动态分析

本研究针对非肌层浸润性膀胱癌(NMIBC)患者接受卡介苗(BCG)治疗后复发预测难题，通过分析外周血中性粒细胞-淋巴细胞比率(NLR)、淋巴细胞-单核细胞比率(LMR)及尿液T细胞/髓源性抑制细胞(MDSCs)比值等免疫指标，发现尿路微环境中T/MDSCs比值升高与MDSCs/总细胞比值降低显著关联无复发状态，提示局部免疫动态可成为BCG疗效评估的新型生物标志物。

　　

膀胱癌作为全球男性第七大高发恶性肿瘤，约75%初诊患者属于非肌层浸润性膀胱癌(NMIBC)。虽然经尿道膀胱肿瘤切除术(TURBT)联合卡介苗(BCG)灌注免疫治疗已成为标准方案，但患者术后仍面临高达25.9%（1年）和41.3%（5年）的复发风险。当前基于临床病理特征的EORTC风险评分模型存在预测精度不足的局限，且BCG治疗伴随的毒性反应、脓毒症风险及全球供应紧张等问题，亟需开发更精准的生物标志物体系以实现治疗方案的个性化优化。

为解决这一临床难题，土耳其安卡拉比尔肯特市医院研究团队在《Scientific Reports》发表最新研究，创新性地通过尿液流式细胞术动态监测BCG治疗过程中关键免疫细胞群的变化。该研究纳入2022年1月至2023年1月期间接受BCG治疗的88例NMIBC患者，最终对77例完成30个月随访的患者数据进行分析。研究人员在BCG灌注前、首次灌注后、第六次灌注前及灌注后四个时间点采集尿液样本，运用10色Navios流式细胞仪检测T细胞、中性粒细胞和髓源性抑制细胞(MDSCs)比例，同时分析外周血NLR和LMR等系统性炎症指标。

主要技术方法

研究采用前瞻性队列设计，对符合入选标准的患者进行多时间点尿液采样。通过流式细胞术定量尿液中CD3⁺T细胞、CD15⁺中性粒细胞及CD14⁺HLA-DR^-/lowM-MDSCs群体，计算T/MDSCs、MDSCs/总细胞等特征性比值。统计学分析采用Mann-Whitney U检验进行组间比较，Wilcoxon检验评估治疗前后组内变化。

研究结果

基线特征均衡性分析

77例患者中12例出现复发（15%），复发组与未复发组在性别、年龄、肿瘤数量、吸烟状态等临床病理特征上无显著差异，排除了传统风险因素对结果的干扰。

外周血指标预测价值有限

比较两组患者诊断初期的NLR（中性粒细胞-淋巴细胞比率）和LMR（淋巴细胞-单核细胞比率）发现，这些系统性炎症标志物未能显著区分复发风险（p>0.05）。

尿液免疫细胞比值呈现显著差异

动态监测显示，复发组患者在所有关键时间点（BCG灌注前、第六次灌注前及灌注后）均保持较高的中性粒细胞/T细胞比值（p=0.048，p=0.005，p=0.02）。特别值得注意的是未复发组在完成BCG疗程后呈现特征性免疫格局重构：

如图2所示，未复发组T细胞/MDSCs比值较治疗前显著提升（p<0.001），而复发组虽有一定升高但未达统计学意义（p=0.07）。同时，未复发组MDSCs占总细胞比例显著下降（p=0.003），复发组反而呈现上升趋势：

讨论与结论

本研究首次系统揭示BCG治疗响应与尿路局部免疫微环境重塑的动态关联。未复发患者表现出的T细胞/MDSCs比值升高与MDSCs比例降低，提示BCG成功诱导了以T细胞为主导的抗肿瘤免疫应答。相反，复发患者持续较高的中性粒细胞/T细胞比值及MDSCs优势格局，反映其免疫抑制微环境未能被有效逆转。这些发现为理解BCG作用机制提供了新视角：MDSCs作为关键免疫抑制群体，其动态变化可能成为早期识别治疗抵抗的敏感指标。

尽管存在样本量有限、未分析T细胞亚群等局限，该研究创新性地证实尿液流式细胞术在BCG疗效监测中的实用价值。相较于传统外周血指标，尿液免疫细胞比值能更直接反映膀胱局部微环境状态，为开发非侵入性复发预测工具奠定基础。未来通过扩大样本量并整合多组学数据，有望构建更精准的预测模型，指导临床实现BCG治疗的精准化应用，避免无效治疗带来的风险与资源浪费。