草药和水果提取物以及配制剂乳霜的抗痤疮功效的初步评估

《Current Research in Biotechnology》：Preliminary evaluation of the anti-acne potential of herbal and fruit extracts and formulated creams

本研究评估了印度楝、圣罗勒、连翘等草本及石榴、甜橙等水果的乙醇提取物对痤疮相关细菌（包括金黄色葡萄球菌、痤疮丙酸杆菌等）的抗菌活性，并通过GC-MS鉴定了关键活性成分如 Mahanimbine（印度楝）和 Hydroxymethylfurfural（石榴、圣罗勒）。体外实验显示，印度楝和石榴提取物抑制效果最显著，制备的抗痤疮乳霜（Formulation A）对Staphylococcus sp.和Cutibacterium acnes的抑制直径分别达37.67mm和37.66mm。初步体内试验证实其安全性和潜在有效性，但需进一步临床验证。

　　本研究旨在评估一些选定的草药和水果提取物对痤疮相关细菌的抗菌效果，并进一步开发有效的抗痤疮乳霜。研究对象为15至19岁年龄段的青少年，包括男性和女性，这些人群因面部痤疮（包括丘疹、脓疱、结节或疤痕）而成为样本采集的来源。采集过程中，使用了经过消毒的工具对受影响区域进行清洁，并将样本收集在含有营养肉汤的Falcon管中，同时使用高压灭菌的牙签协助采集。采集后的样本在营养肉汤中运输，并在37℃下培养24小时以促进细菌的生长。此外，为了更好地了解受影响个体之间的共性，记录了包括年龄、家族史、性别、治疗用药情况和皮肤类型等信息。

通过生化方法（如革兰氏染色、过氧化氢酶试验、葡萄糖发酵试验）对细菌进行初步鉴定，并最终通过分子方法（如DNA提取、聚合酶链反应和16S rRNA基因测序）确认了六个细菌株，其中包括S1（金黄色葡萄球菌属）、S2（痤疮丙酸杆菌）、S3（金黄色葡萄球菌）、S4（表皮葡萄球菌）、S5（芽孢杆菌属）和S6（哺乳动物乳杆菌）。革兰氏染色结果显示，这些细菌为革兰氏阳性菌，能够保留结晶紫染料。过氧化氢酶试验表明，所有细菌均具有分解过氧化氢的能力。葡萄糖发酵试验则通过观察培养基颜色的变化来判断结果，若颜色从红色变为黄色，则表示为阳性反应。

在实验中，使用了乙醇提取法，从选定的草药和水果中提取活性成分。草药包括印度苦楝（Neem）、香草（Tulsi）、阿马尔塔（Amaltas）和甘草（Liquorice），水果则包括甜橙（Sweet lime）、香蕉（Banana）、石榴（Pomegranate）和柠檬（Lemon）。提取物的制备过程包括将干燥的植物材料放入搅拌机中粉碎，或对水果果皮进行清洗、干燥、研磨，然后将粉末浸泡在95%乙醇中，静置24小时。提取后的溶液通过Whatman No.1滤纸过滤，随后在70℃和110转/分钟的条件下在水浴中蒸发至10毫升，最终浓度为10%（w/v）。这些提取物在4℃下保存，等待后续实验使用。

为了评估这些提取物的抗菌效果，研究采用了两种经典的体外方法：空穴扩散法和圆盘扩散法。在空穴扩散法中，使用6毫米直径的无菌小孔，在营养琼脂上接种细菌后，加入50微升的提取物溶液。而在圆盘扩散法中，将6毫米直径的滤纸圆盘用乙醇提取物浸润，然后将细菌均匀铺在营养琼脂平板上，最后在37℃下培养24小时。通过测量抑菌圈的直径，可以评估抗菌活性。研究发现，其中某些提取物表现出显著的抗菌效果，尤其是在空穴扩散法中，其抑菌圈的直径明显大于对照组。

为了进一步揭示这些提取物中的生物活性成分，研究还采用了气相色谱-质谱联用（GC–MS）技术。结果显示，印度苦楝提取物中富含多种生物活性化合物，如mahanimbine，它具有抗炎和抗菌特性，能够调节促炎性细胞因子。石榴提取物中则含有hydroxymethylfurfural，这种成分同样具有抗炎和抗菌效果。此外，石榴和阿马尔塔的提取物中还检测到cyclotetrasiloxane和octamethyl等成分，这些物质具有抗菌、抗炎和皮肤调理作用。这些生物活性成分的发现为后续的临床应用提供了理论依据。

在抗痤疮乳霜的制备过程中，研究人员基于已有的方法进行了微调。乳霜的主要成分包括硬脂酸、丙二醇、三乙醇胺、石蜡、甘油、硼砂、硫和维生素E。其中，乳霜A由印度苦楝、香草、甘草和芦荟提取物组成，而乳霜B则包含石榴、甜橙、柠檬和芦荟提取物。通过调整配方，研究人员旨在最大化提取物的协同效应，提高乳霜的抗菌和抗炎性能。乳霜的pH值被控制在6.0至6.5之间，以确保其不会对皮肤造成刺激。维生素E作为润肤剂和抗氧化剂被添加进去，以增强乳霜的护肤效果。此外，硫被用作抗真菌剂，而芦荟则有助于减轻炎症并软化疤痕。

在对两种乳霜进行体外抗菌测试后，研究人员进一步将这些乳霜应用于患有痤疮的皮肤，并观察其效果。经过7天的持续使用，研究发现乳霜A在抑制痤疮相关细菌方面表现出显著效果，其抑菌圈的直径分别为37.67毫米（针对金黄色葡萄球菌）和37.66毫米（针对痤疮丙酸杆菌）。相比之下，乳霜B的抑菌效果较为温和，但仍然显示出一定的抗菌活性，特别是在抑制痤疮丙酸杆菌和芽孢杆菌方面，其抑菌圈的直径分别为25毫米和22毫米。这些结果表明，含有多种草药成分的乳霜（如乳霜A）在抗痤疮方面具有更大的潜力。

此外，研究还发现，某些草药和水果提取物在体外测试中表现出良好的抗菌活性。例如，印度苦楝、香草和石榴的提取物在抑制多种痤疮相关细菌方面表现出显著效果，而甘草的抗菌活性则相对较弱。这种差异可能与不同提取物中所含的生物活性成分有关。例如，石榴和印度苦楝的提取物中富含具有抗炎和抗菌特性的成分，而甘草的提取物中则含有较少的这类活性物质。这种发现对于开发天然、安全的抗痤疮产品具有重要意义。

研究还指出，某些草药和水果在痤疮治疗中可能具有广泛的适用性。例如，印度苦楝、香草、石榴和甘草的提取物不仅能够抑制细菌生长，还可能通过调节促炎性细胞因子和抗氧化作用来减轻炎症反应。这些发现与之前的研究结果相吻合，例如，Rahimian等人（2013）的研究表明，印度苦楝和香草的乙醇提取物对痤疮丙酸杆菌和表皮葡萄球菌具有显著的抗菌效果。此外，一些水果如石榴、甜橙和柠檬的果皮提取物也表现出良好的抗菌活性，这可能与其富含的多酚、黄酮类和单宁等生物活性成分有关。

研究结果还表明，尽管草药提取物在体外测试中表现出良好的抗菌效果，但这些效果是否能够转化为临床应用仍需进一步验证。因此，建议在未来的动物实验和人体试验中进一步评估这些天然提取物的疗效。同时，由于这些提取物可能具有较长的保质期和良好的安全性，它们在护肤品中的应用前景十分广阔。此外，考虑到抗菌效果与生物活性成分之间的关系，研究还强调了筛选和优化这些成分的重要性，以提高抗痤疮产品的有效性和稳定性。

总之，这项研究揭示了多种草药和水果提取物在抗痤疮方面的潜力。通过体外抗菌测试和GC–MS分析，研究人员确认了这些提取物中的生物活性成分，并验证了它们在抑制痤疮相关细菌方面的效果。这些发现不仅为开发天然、安全的抗痤疮产品提供了科学依据，还可能为未来的研究方向带来新的思路。然而，为了确保这些产品在临床中的实际效果，还需要进一步的实验和临床观察。