基于蛋白沉淀-SPE-MMIPs联用策略的乳品天然B族维生素同步提取与RP-HPLC精准定量方法开发

本研究针对乳品中天然B族维生素提取难、定量精度低的问题，开发了一种整合蛋白沉淀、固相萃取（SPE）和磁性分子印迹聚合物（MMIPs）的序列提取策略，结合RP-HPLC技术实现多维生素同步检测。方法回收率达75–110%，精度优异，为乳品营养评估与功能性产品开发提供关键技术支撑。

　　

B族维生素作为人体代谢必需微量营养素，其天然形态在乳品中的低浓度特性使精准定量面临挑战。本研究通过系统比较5%乙酸、3%磷酸和10%三氯乙酸（TCA）三种蛋白沉淀试剂，发现TCA对牛奶中天然B族维生素的回收效果最优。随后采用固相萃取（SPE）进行预富集，成功提取维生素B₁、B₂、B₃、B₅、B₆和B₉，但B₇和B₁₂未被检出。进一步引入磁性分子印迹聚合物（MMIPs）实现B₇和B₁₂的选择性捕获，最终通过反相高效液相色谱（RP-HPLC）完成所有维生素的同步定量。该方法回收率介于75–110%，日内与日间相对标准偏差分别为1.12–6.93%和2.21–5.49%，显著提升检测重现性与准确性。策略成功应用于牛乳、水牛乳和山羊乳的天然B族维生素分析，为乳制品质量控制和营养功能研究提供可靠技术平台。