B型单端孢霉烯评估：杀菌剂对禾谷镰刀菌和黄色镰刀菌产毒能力的影响及其HPLC-PDA检测方法开发

本研究通过PCR和HPLC-PDA技术，系统评估了三种杀菌剂（tebuconazole、carbendazim、fludioxonil）对镰刀菌（F. graminearum和F. culmorum）产生B型单端孢霉烯（DON、3-ADON、15-ADON）的影响，建立了高灵敏度检测方法（LOD:1.22-9.35 ng/mL），为食品中真菌毒素防控提供重要技术支撑。

　　

Highlight

化学品

雪腐镰刀菌烯醇(NIV)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)、3-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇(3-ADON)和15-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇(15-ADON)混合标准品（纯度≥97.00%，100 μg/mL乙腈溶液）购自Sigma-Aldrich（产品编号34134），保存于-20°C环境。实验全程使用Milli-Q超纯水系统（电阻率≥18.20 MΩ cm）制备的超纯水，所有溶液均经0.45 μm微孔滤膜（Sartorius）过滤。

方法优化

为提升HPLC对三种霉菌毒素的定量精度，我们系统优化了流动相组成、流速和柱温三大关键参数。流动相中的酸性修饰剂能有效抑制分析物电离、改善峰形——我们特别选用正交磷酸作为调节剂，因其在色谱分离中展现卓越的稳定性。通过梯度洗脱程序（水-乙腈体系）的精细调整，成功实现DON、3-ADON与15-ADON的基线分离。柱温优化实验表明，25°C时各毒素峰形尖锐且保留时间稳定，最终将该温度确定为最佳分析条件。

结论

农业杀菌剂的有效浓度在防控病原菌的同时，不应助长霉菌毒素的生成。本研究通过建立灵敏可靠的HPLC-PDA方法（检测限低至1.22-9.35 ng/mL），首次系统揭示tebuconazole、carbendazim与fludioxonil对镰刀菌产毒模式的差异化调控：DON在两种菌株中均为优势毒素，而杀菌处理显著改变乙酰化衍生物的生产比例。这些发现为作物保护剂的安全应用提供了关键毒理学依据。