日本无针乌贼IL-17R信号通路相关基因的分子功能鉴定及其在免疫应答中的作用

本文首次系统鉴定了头足类动物日本无针乌贼（Sepiella japonica）的IL-17受体（IL-17R）信号通路关键基因（SjIL-17Rs、SjACT1、SjTRAF6），揭示了其在鳃、视叶等组织中的特异性分布及在哈维氏弧菌（Vibrio harveyi）和副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）感染后的显著上调表达。通过下拉实验（pull-down assay）和荧光共定位证实了SjIL-17Rs与SjACT1的相互作用，为理解无脊椎动物IL-17R通路在抗细菌免疫中的功能提供了新见解。

　　

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Ethics statement

本研究遵循国家动物福利法规，并获得了浙江海洋大学机构动物护理与使用委员会（IACUC）的批准。所有操作均在使用麻醉剂处理乌贼后采集组织进行。

Cloning of SjIL-17Rs, SjACT1and SjTRAF6gene

SjIL-17R1、SjIL-17R2、SjACT1和SjTRAF6的注释序列从乌贼转录组中获取。使用Primer 6.0软件设计了针对这些基因的特异性引物（表1）。并进行了PCR扩增。

Characterization of SjIL-17Rs, SjACT1and SjTRAF6cDNA sequences

SjIL-17R1基因的开放阅读框（ORF）序列长度为1716 bp，编码一个由571个氨基酸（aa）组成的蛋白质。预测的SjIL-17R1蛋白包含一个跨膜结构域（TM）和一个SEFIR结构域，具有4个潜在的N-连接糖基化位点和62个潜在的磷酸化位点，包括40个丝氨酸（S）、15个苏氨酸（T）和7个酪氨酸（Y）（补充图1）。SjIL-17R1蛋白的预估分子量（MW）和等电点（pI）分别为67.7 kDa和6.64。

Discussion

IL-17作为一种典型的炎症细胞因子，通过结合IL-17R-ACT1-TRAF6复合物来激活NF-κB和MAPK信号通路，从而诱导炎症细胞因子的表达（Huangfu et al., 2023）。哺乳动物中已鉴定出五种IL-17R（IL-17RA至IL-17RE），而无脊椎动物拥有的IL-17R同源物数量较少（Saran et al., 2025）。在环节动物中，已在秀丽隐杆线虫（C. elegans）中鉴定出两个IL-17R基因（Chen et al., 2017）。在软体动物中，已在长牡蛎（C. gigas）和紫贻贝（M. galloprovincialis）中发现了三个IL-17R基因（Rosani et al., 2015）。