PD-L1纳米抗体修饰的细菌外膜囊泡递送铜死亡胶束用于增强癌症免疫治疗

本文报道了一种创新纳米平台（OMV-PD-L1nb@ES），通过PD-L1纳米抗体修饰的细菌外膜囊泡（OMV）递送铜死亡诱导剂埃莱司莫（ES）胶束，实现了三阴性乳腺癌的靶向治疗。该策略巧妙融合了铜死亡（cuproptosis）引发的免疫原性细胞死亡（ICD）与PD-L1/PD-1免疫检查点阻断，显著增强CD8+ T细胞浸润并耗竭Treg细胞，为克服免疫治疗低应答提供了新思路。

　　

Section snippets

Materials

酵母提取物、胰蛋白胨、卡那霉素、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）和苯甲基磺酰氟（PMSF）购自生工生物工程（上海）股份有限公司。埃莱司莫（Elesclomol, ES）和DSPE-PEG₂₀₀₀购自MCE公司（上海）。4′,6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）、1′-二十八烷基-3,3,3′,3′-四甲基吲哚羰花青高氯酸盐（DiI）、β-肌动蛋白抗体和Cell Counting Kit-8试剂盒购自碧云天生物技术（上海）公司。杜尔贝科改良 Eagle 培养基（DMEM）和胎牛血清...

Preparation and characterization of OMV-PD-L1nb

（A）OMV-PD-L1nb制备示意图。（B）IPTG诱导16小时后上清液中ClyA-PD-L1nb表达的SDS-PAGE分析。泳道1：0 mM IPTG，30°C；泳道2：0.5 mM IPTG，30°C；泳道3：0.1 mM IPTG，16°C；泳道4：0.5 mM IPTG，16°C。（C）使用His标签抗体对不同组别上清液中ClyA-PD-L1nb表达的Western blot分析。（D）通过动态光散射（DLS）测定的OMV-PD-L1nb尺寸分布。（E）OMV-PD-L1nb的透射电子显微镜（TEM）图像。标尺...

Discussion

破坏PD-L1/PD-1免疫检查点轴已成为治疗多种晚期癌症的强大免疫治疗策略。这一临床成功推动了多种抗PD-L1药物的开发，包括单克隆抗体、纳米抗体、核酸药物、阻断肽和小分子抑制剂。我们的联合治疗平台选择PD-L1纳米抗体作为阻断剂，是因为其具有独特的优势特性。首先，PD-L1纳米抗体...

Conclusion

在本研究中，我们开发了PD-L1纳米抗体修饰的OMV，用于递送埃莱司莫胶束以增强三阴性乳腺癌的免疫治疗。工程化的OMV改善了铜死亡纳米诱导剂的肿瘤靶向递送，同时实现了PD-L1阻断。负载ES胶束后，OMV通过诱导铜死亡细胞死亡，对乳腺癌细胞表现出强大的细胞毒性。在体内，OMV-PD-L1nb@ES显著抑制了肿瘤生长并引发了强烈的抗肿瘤免疫反应。这一纳米平台...