Aspyre Lung技术：挽救NGS质控失败样本实现非小细胞肺癌精准变异检测的新突破

本研究针对非小细胞肺癌(NSCLC)分子检测中下一代测序(NGS)技术存在的样本高失败率、质量控制问题及长检测周期等临床痛点，开发了基于等位基因特异性焦磷酸分解反应(Aspyre)技术的Aspyre Lung检测方法。研究通过对198例NSCLC组织样本（包括107例NGS质控失败样本和91例NGS成功样本）的系统验证，证明Aspyre Lung在两天内即可完成11个基因114个临床相关变异的检测，成功挽救了96%的NGS失败样本，与NGS结果的一致性达97%。该技术为改善NSCLC患者靶向治疗可及性提供了重要解决方案。

　　

肺癌作为全球癌症相关死亡的主要原因，其中非小细胞肺癌(NSCLC)占病例的80-85%。随着精准医疗的发展，基于基因变异的靶向治疗已成为NSCLC治疗的重要组成部分。然而，当前主流的下一代测序(NGS)技术在实际应用中面临严峻挑战：高达25%的样本因质量控制(QC)问题导致检测失败，加之检测周期长、组织样本需求量大，使得近半数患者无法获得及时的靶向治疗机会。特别是在早期NSCLC(eNSCLC)患者中，快速准确的EGFR和ALK检测对于术前新辅助免疫化疗方案的制定至关重要。

针对这一临床困境，发表于《Translational Oncology》的研究论文提出了一种创新解决方案——Aspyre Lung检测技术。这项研究由Biofidelity Ltd.（英国剑桥）的Eleanor Ruth Gray等学者完成，系统评估了该技术在198例NSCLC样本中的性能表现，其中特意纳入了107例NGS质控失败的样本，以验证其"挽救"失败样本的能力。

研究人员采用的主要技术方法包括：从福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织样本中并行提取DNA和RNA，使用Aspyre Lung检测技术（基于等位基因特异性焦磷酸分解反应原理）对11个基因的114个变异进行检测，并与两种NGS方法（Roche Avenio和Illumina TSO500）进行对比验证。样本来源包括前瞻性收集的临床样本和Precision for Medicine生物样本库的存档样本。

Cohort A – NGS质控失败样本的分析结果

在107例NGS质控失败的样本中，Aspyre Lung成功实现了96%（103/107）的检测成功率。尤为重要的是，在这些被"挽救"的样本中，47%（48/103）检出了至少一个临床相关变异，其中包括6例多重变异。通过正交验证方法（如RT-dPCR和Sanger测序）证实了Aspyre Lung检测结果的可靠性，特别是在ALK和ROS1基因融合变异检测方面表现优异。

Cohort B - NGS通过样本的验证结果

在91例NGS检测成功的样本中，Aspyre Lung显示了与NGS高度的一致性（97%）。研究发现了少数不一致案例，经深入分析证实Aspyre Lung的结果更为准确。例如，一例被NGS误判为KRAS p.G12C和p.G12V的样本，Aspyre Lung正确识别为p.G12F，这一发现避免了可能的误治风险。

EGFR/ALK早期阶段样本的检测效能

研究特别关注了早期NSCLC样本的检测情况，发现80%的EGFR阳性样本来自I期和II期患者，证明了Aspyre Lung在早期癌症中的高灵敏度，这对于指导新辅助治疗决策具有重要意义。

研究结论表明，Aspyre Lung技术能够有效解决当前NSCLC分子检测中的多个瓶颈问题。其两天快速检测周期、低样本输入要求（可低至5 ng DNA和1.5 ng RNA）以及高成功率，特别是对NGS失败样本的挽救能力，为临床提供了重要的补充检测方案。该技术覆盖了NCCN指南推荐的所有一线治疗相关基因，在保证检测质量的同时，显著提高了患者获得精准治疗的机会。

讨论部分进一步强调了Aspyre Lung技术的临床价值。与传统NGS相比，该技术不仅检测速度快、操作简便，更重要的是能够处理质量较差的样本（包括存档十年以上的FFPE样本），这为生物样本库资源的有效利用开辟了新途径。研究者建议，Aspyre Lung可作为一线快速筛查工具，阴性样本再行NGS检测以发现罕见变异，这种分层检测策略有望优化临床检测流程。

值得注意的是，Aspyre Lung技术基于独特的焦磷酸分解原理，通过酶促反应特异性降解与靶序列完全互补的探针，实现了类似数字PCR(dPCR)的高灵敏度，同时保持了常规PCR的简便性。这种技术特点使其特别适合在常规分子诊断实验室推广应用。

该研究的局限在于Aspyre Lung主要针对常见变异设计，对极罕见变异的检测能力不如NGS。然而，考虑到其快速、高灵敏度的特点，结合临床实际需求，这种针对性设计反而体现了"精准"的策略性思考。

总之，这项研究证实了Aspyre Lung技术在改善NSCLC分子检测可及性方面的突破性进展。通过挽救传统方法无法检测的样本，并提供快速、准确的结果，该技术有望使更多患者从精准靶向治疗中获益，最终改善生存结局。随着分子诊断技术的不断进步，像Aspyre Lung这样兼顾效率与准确性的检测方法，将在癌症精准医疗领域发挥越来越重要的作用。